应用RT-PCR和病毒学方法诊断山东省鸡新城疫感染的比较研究

分别应用病毒分离和区分新城疫强弱毒株的RT—PCR技术,对山东各地疑似鸡新城疫感染的25份病料进行了实验室诊断。结果表明：从18份病料中既扩增到了新城疫强毒基因,也分离到了新城疫病毒;3份病料未分离到病毒,仅扩增到了新城疫强毒基因;4份病料分离到了新城疫病毒,但未检测到相关基因。研究表明,将RT—PCR和病毒分离鉴定两种方法相结合,可更好的满足快速、灵敏、准确的新城疫诊断要求。     

“火烧战船”法治疗家畜腰背风湿

“火烧战船”一法属中兽医炙术当中的一种。几年来，笔者运用此法治疗家畜腰背风湿症数十例，获得了较好的效果，现介绍于下。     

新城疫病毒融合蛋白单克隆抗体的研制

以纯化的新城疫病毒(NDV)R8E9免疫BALB／C小鼠，最后1次免疫后3d取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2／0)融合。以纯化的NDV和表达NDV融合蛋白(F)的重组鸡痘病毒(rFPV)分别建立了间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光(IIF)方法，并用于单抗筛选的第一、二检测系统。经反复筛选并3次亚克隆后共获得7株针对F蛋白的单克隆抗体，它们的生物学特性和在不同反应系统中的敏感性各有不同。用这7株单抗对国内外不同时期分离的：NDV毒株进行排谱发现，单抗几乎可以与所有毒株反应，表明所得的单抗都是针对NDVF蛋白的抗原保守区。     

基于荧光显色的环介导等温扩增技术(LAMP)检测禽呼肠孤病毒

建立了一种基于荧光显色的禽呼肠孤病毒(ARV)环介导等温扩增(LAMP)检测方法.该检测方法使用针对ARV的p10基因8个区域的6条LAMP引物,能够在等温(63℃)条件下1h内完成反应,具有良好的敏感性和特异性,最低能够检出102个拷贝的病毒,敏感性比普通PCR高100倍,而对其他病毒检测结果为阴性.在荧光显色中分别应用SYBR Green Ⅰ和钙黄绿素作为显色剂,其结果与琼脂糖凝胶电泳一致.在对80份临床样本的检测中,使用LAMP和PCR检测出阳性样本的数量分别为68份和55份.因此,基于荧光显色的LAMP方法可以应用于ARV的快速检测,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力.     

鸡包涵体肝炎病理形态学观察

鸡包涵体肝炎 ( IBH)患鸡主要表现为肝脂肪变性和肝细胞内包涵体形成为特征的一种鸡腺病毒感染症。 1 980年以后我国辽宁、河北、山东、内蒙古呼和浩特市区先后有该病发生的报道。 1 997年河北省呈地方性流行。我们对该病进行了系统的病理形态学观察。1　材料与方法被检病例取自河北省 5个县市 1 7家养鸡场的发病鸡群 ,进行了流行病学调查、临床症状观察、细菌学、病理学检验。采集自然死亡病鸡肝脏、胸腺、脾脏、肾脏、法氏囊等病理材料 ,Bouin氏液固定 ,常规石蜡包埋、切片、苏木素—伊红、亚甲蓝伊红染色、光学显微镜检查。2　结果2 .1…     

两种口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体ELISA检测方法的比较

对常用的兰州兽医研究所和北京世纪元亨生产的两种口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体的ELISA检测方法,在检测猪血清抗体时的敏感性进行比较,以期获得可应用于口蹄疫检疫的最佳试剂盒。采用上述两种阻断ELISA试剂盒对170份猪血清样品进行ELISA检测。结果表明,两种试剂盒的阳性检出率相差不大,阳性检出率分别为5. 29%和5. 88%。本试验表明:兰州兽医研究所和北京世纪元亨生产的口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体检测试剂盒检测结果差异不大,均可应用于口蹄疫血清学筛选性试验。     

吉林省猪源致病性E.coli K_(88~ )株的检测及两种检测方法的比较

病原性 E.coli K_(88)抗原的发现(Φrs-kov,1961)大大地推动了大肠杆菌病的研究。近年来,国内外学者就 K_(88)抗原的多种特性进行了大量的研究工作。现已查明:凡具有 K_(88)抗原的 E.coli 株均能吸附在小肠粘膜的绒毛上,并产生两种肠毒素,即热稳定肠毒素(ST)和热敏肠毒素(LT)而导致仔猪发生腹泻。因此,检测病原性 E.coli的 K_(88)抗原无疑对流行病学的调查和免疫学的防治研究起着重要作用。     

蛋鸡暴发寄生虫病的诊治

发病情况 2008年3月6日,蒙城县漆园镇某蛋鸡场养殖户常某饲养6000只蛋鸡,280天左右,产蛋率90％左右,近些天鸡群采食下降、羽毛凌乱．产蛋有轻微的下降,蛋壳苍白,发现极个别的鸡消瘦,鸡身上有很多黑色小点样的虱子,在羽毛、翅膀下方、头部、身体及肛门等处可发现不同种类的虱子寄生。用了很多氨基甲酸酯类的药物喷洒,用药后见好转,停药又起,反反复复。治疗了一段时间,不见好转,带鸡前来就诊。     

猪瘟病毒石门株在ST细胞连续传代后E0基因变异分析

为了解猪瘟病毒(CSFV)石门(Shimen)株连续传代后变异情况,根据已发表的CSFV E0基因序列(AF092448.2),设计合成引物,以在ST细胞中连续传代培养的CSFV石门株细胞毒总RNA为模板,每5代通过RT-PCR方法扩增病毒的E0基因,测定其核苷酸序列和氨基酸序列,用DNA Star软件分析比较原代、5代、10代、15代、20代、25代接毒细胞中CSFV E0基因的变异性。结果显示,接种病毒第10代的病毒E0基因在630核苷酸位点出现变异,第15代病毒在632核苷酸位点出现变异。本研究通过分子生物学方法发现CSFV Shimen株在ST细胞连续传代过程中E0基因能保持遗传的稳定性。     

猪鼠伤寒沙门氏菌的分离与鉴定

从江苏泰州某猪场分离到1株革兰氏阴性杆菌,经生化试验、血清学试验鉴定为鼠伤寒沙门氏菌,对小白鼠有强烈的致病作用,其抗原式为1,4,5,12∶i∶1,2。该菌株对丁胺卡那、环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星等抗菌药高度敏感,对氨苄西林、四环素、青霉素等不敏感。