猪食欲肽受体2激动剂细胞筛选模型的建立及对天然中药提取物受体激动剂的筛选

本研究旨在构建猪食欲肽受体2（pOX2R）的真核表达载体,探究其对天然中药提取物的药理学活性。将成功构建的pcDNA3.1（+）-myc/pOX2R和报告质粒PGL4.29[luc2p/CRE/Hygro]分别瞬时转染HEK293T细胞,利用萤火虫荧光素酶报告基因检测法测定阳性细胞株在不同浓度激动剂Orexin A和Orexin B以及颉颃剂TCS作用下胞内cAMP水平。将目的质粒与报告质粒稳定共转染CHO-K1细胞,利用G418和潮霉素B进行抗性筛选,获得6株阳性细胞株和5株阴性细胞株。对具有促进食欲作用的18种天然中药材的36种提取物进行筛选,并用瞬时共转染了pcDNA3.1（+）-myc/pOX2R和PGL4.29[luc2p/CRE/Hygro]的HEK293T细胞作为研究对象,对阳性提取物进行剂量效应分析。结果显示,Orexin A与Orexin B单独作用细胞时,可以使萤火虫荧光素酶的活性提高,呈明显的剂量效应关系,当与颉颃剂TCS联合作用时,TCS可以颉颃激动剂对受体的激活作用。通过优化药物刺激时间和二甲亚砜（DMSO）用量后,建立了以pOX2R为靶点的稳定、可靠的激动剂细胞筛选模型。经过初筛和复筛,得到了甘草水提物、白莲子和山药醇提物3种可以使阳性细胞荧光素酶表达量升高的提取物。提取物在一定浓度范围内可以刺激胞内荧光素酶的表达,呈剂量效应关系。以上结果为筛选出可以提高猪生产效率的先导化合物及相关药物研究提供参考依据。     

转基因甘蓝型油菜的小孢子培养及转基因的遗传分析

[目的]研究甘蓝型油菜转查尔酮异构酶反义基因T1代植株及其小孢子成苗的遗传表达,为甘蓝型油菜的转基因和种质资源创新研究提供参考。[方法]以甘蓝油菜转查尔酮异构酶反义基因T1代5个独立转基因植株为材料进行小孢子培养,通过GUS报告基因的组织化学染色鉴定对外源转基因在花粉植株中的遗传进行了分析。[结果]5个独立转基因植株均获得了胚状体和花粉植株;转基因在花粉培养后代和有性自交后代中遗传行为一致;在每个独立转基因植株的花粉植株中GUS阳性和阴性的分离比均为3∶1,符合孟德尔遗传规律,表明有2个转基因拷贝整合到受体2条非同源染色体上;3个独立转基因植株自交后代中GUS阳性和阴性的分离比符合15∶1,同样表明有2个转基因拷贝整合到受体2条非同源染色体上。[结论]通过转基因油菜的小孢子培养快速获得转基因纯系是可行的。     

致病疫霉两种交配型的致病性及对不同碳氮比例的反应

 对云南省分离到的7个晚疫病菌A2交配型菌株的致病性及对不同碳氮比（C/N）的反应进行了研究。结果表明: 单个的A2交配型菌株、A2+A1交配型菌株孢子囊接种致病性无显著差异,但均比对照的A1交配型菌株接种致病性强。在C/N比为4∶1,3∶1,2∶1时,A2菌株的生长速率比A1菌株慢,C/N为1∶2,1∶3,1∶4时A2菌株比A1菌株生长快,在C/N为2∶1时,A1与A2菌株各自生长最快。在不同C/N条件下A2产孢量都比A1少,在C/N为2∶1时,A1与A2各自产孢最多;C/N对A2交配型菌株的游动孢子释放有影响,在碳氮比为3∶1时,A2的游动孢子释放率明显高于A1菌株。     

春季保健重在养肝

春天止怒,是由于阳气在大怒时会上逆,血随气升而淤积,使人发生肝郁气滞。春季邪气伤人多病在头部,肝气相关于目。肝属木,木气生于酸味。酸味滋养肝气。人能知道自然界变更的道理,就会顺应自然使自己健康长寿,享受生命的宝贵。     

鸡滑液囊支原体对常用抗菌药的耐药性研究

为研究常用抗菌药对滑液囊支原体的敏感性及耐药基因的流行分布,试验使用微量肉汤微稀释法确定了截短侧耳素类、大环内酯类、氟喹诺酮类药物对21株鸡滑液囊支原体临床分离株的最小抑菌浓度,并且对相关耐药基因进行探讨.结果显示:1株分离株对截短侧耳素类抗生素耐药(4.76％),7株对泰乐菌素耐药(33.3％),5株对替米考星耐药(...     

浅析“点线面体”在古典园林中营造的视错觉形象

本文主要是从点线面体的角度出发,分析在古典园林中点线面体怎样去营造视错觉效果,并去发现在现代园林设计中怎样合理的运用视错觉原理,才能使其现代园林设计更加符合人的视觉生理需求,为现代园林设计增加趣味性。     

美国鮰鱼养殖技术总结

美国鮰鱼又称斑点叉尾鮰，尾鲇形目，鮰科，是一种原产于美国密西西比河的淡水鱼类，美国于60年代初期开始进行人工养殖，目前已经成为美国淡水养殖的主要对象．产量约占美国淡水鱼产量的一半以上。1984年湖北省水产科学研究所从美国引进试养．由于其生长速度快、产量高、抗病力强，获得引种成功．并迅速在全国推广养殖。     

无公害流水养殖杂交鲟技术

鲟鱼在英国、古罗马和中国古代的皇室都被视为珍品,故有“皇帝鱼”之称。鲟鱼籽酱位列世界三大珍味之一,价格奇高不下,被称为“黑色黄金”。杂交     

土地征用补偿机制研究

随着我国经济社会的发展,土地征用已成为当今社会的1个普遍现象。征地补偿机制是国家公共利益与土地所有者的“生产利益”、“财产利益”在矛盾中的必要协调。在对现有征地补偿机制研究的基础上,指出其不足,并结合国内外经验提出改革建议,着重讨论了征地补偿标准的确定。     

彩叶桂花新品种‘红运彩桂’

‘红运彩桂’是从四季桂（Osmanthus fragrans Siji Group）的扦插苗中选育出的彩叶桂花新品种。丛生灌木或小乔木。嫩叶边缘初为紫红色或粉红色,中间浅紫红色,随着生长叶片渐变成边缘黄白色或黄色,中部绿色,每片叶呈现花叶。整株可呈现紫红色、粉红色、绿色、白色、黄色等多彩的颜色,花期从8月中下旬至次年5月中旬,可达10个月,观赏价值高。