花鲈虹彩病毒交叉引物恒温扩增检测方法的建立

【目的】花鲈虹彩病毒(Lateolabrax maculatus iridovirus,LMIV)严重威胁花鲈养殖业安全,无特效防控药物,早期诊断在LMIV防控中发挥极其重要的作用。建立一种简便、快捷、准确的现场快速诊断方法,可为LMIV的基层诊断提供技术支撑。【方法】利用交叉引物恒温扩增技术(Cross priming amplification,CPA),针对LMIV ATPase基因高保守区设计1套单交叉引物。以构建的ATPase重组质粒作为阳性模板,对反应体系中的引物浓度比,Bst DNA聚合酶、Betaine、MgSO₄、dNTP浓度,以及反应温度和反应时间进行优化;结合一次性核酸试纸条,建立可视化检测LMIV-CPA的方法。【结果】最优引物浓度比组合为交叉引物CPF1.0μmol/L,引物F3和B3均为0.4μmol/L,探针引物B1(FAM)和B2(Biotin)均为0.8μmol/L;MgSO4浓度为6 mmol/L、Betaine浓度为0.4 mol/L、dNTP浓度为0.6 mmol/L、Bst DNA聚合酶浓度为0.256 U/μL;最佳反应...     

乡村振兴与空间规划体系改革双重背景下对村庄规划的思考

本研究立足历史与问题导向,研究创新符合新时代要求的村庄规划内容,归纳梳理了新中国成立以来村庄规划的发展历程,结合新时代的多重要求,通过对村庄规划的科学认知,阐述了实用性村庄规划编制的内容与方法,分析了村庄规划存在的问题和优势,提出了村庄规划发展的保障措施。首先,村庄规划从传统的单一导向规划转向分类指引规划;其次,村庄规划工作重点从居民点规划转变为全域空间管控;最后,从单一规划向多规合一的思维转变且村庄规划还要预留弹性空间。乡村规划师要深刻认识村庄规划的实用性内涵,以村民为主体,统筹城乡各种资源,分析研判村庄的优劣势,进行全要素规划,编制实用性村庄规划。     

乡村振兴背景下畜牧业经营方式的重构——基于内蒙古兴安盟实地研究

畜牧业高质量发展是乡村振兴战略产业振兴的重要内容之一,作为我国农村农业经济的重要组成部分,对大多数农牧民家庭经济收入有决定性的影响,因此以乡村振兴为背景,阐述畜牧业个体经营及其所面临的市场风险,并结合实际提出畜牧业规模化经营的3种实践逻辑,即家庭牧场、股份制合作社、专业合作社,并在此基础上归纳出规模化经营的本质特征及其面临的挑战。     

黄土丘陵区典型县域耕地健康评价:以河南宜阳县为例

耕地健康是粮食安全的基础,是立国之本,探索符合新时代的耕地健康评价方法尤为重要.为满足新时期对耕地管理的需要,选取耕地质量、耕地产能及土壤环境3个准则层共16个指标构建了黄土丘陵区的耕地健康评价体系,采用图层叠加定量评价、层次分析法和最小因子等方法对宜阳县耕地健康状况进行评价.结果表明:宜阳县耕地健康评价结果分异特征明...     

关于大庆市河蟹养殖情况的调查

文章通过对大庆市杜蒙、林句、肇源三县的实地调查,全面介绍了这些地方河蟹养殖的基本情况、突出特点,分析了河蟹养殖发展过程中存在的制约因素和问题,结合大庆市的实际情况,提出了今后发展河蟹养殖业的相关对策建议。     

猪气喘病的病因及防治技术

<正>当前,在东兰县三石镇,由于把动物防疫的侧重点转向猪口蹄疫等烈性传染病,故许多烈性传染病已得到有效控制,而以猪气喘病为主的呼吸道疾病成为养殖户的主要危害。下面就关于猪气喘病,从病原、流行病学、临床症状、发病机理、病理变化、诊断及防治等方面作一一概述,以供参考。1猪气喘病的概述     

转座子mini-Tn10介导的运动突变对溶藻弧菌毒力的影响

采用转座子mini-Tn10/Km构建了致病性溶藻弧菌的突变库,采用半固体双层平板初筛到73株运动缺陷突变株,初筛的突变株纯化及重复筛选后获得运动性缺陷表型稳定的突变株ND-01MM,Southern鉴定确定其为单位点插入。野生型菌株ND-01和运动缺陷突变株ND-01MM对致病性溶藻弧菌的天然宿主大黄鱼粘液的趋化、粘附以及在大黄鱼吞噬细胞内存活能力等生理功能的比较研究发现,溶藻弧菌运动缺陷后趋化及粘附能力均极显著下降(P<0.01),但在吞噬细胞内的存活能力则与野生型菌株差异不显著(P>0.05)。采用腹腔注射和浸泡两种方式感染大黄鱼,结果发现运动缺陷对浸泡感染的影响较为明显,但对腹腔注射的感染方式影响不大。     

旧虾池改造的有效方法——铺防渗地膜

养虾池是对虾赖以生存的最基本环境，对虾在养虾池吸收一定的物质才能生存，同时又将生命活动的产物如排泄物等排到池水中，对虾的生存、发育都是在虾池的水体中，它只能在虾池内一定条件的限制内生存、发育、成长。如果虾池环境条件发生改变，就会影响到对虾的生活。在对虾与环     

间接ELISA法研究嗜水气单胞菌对鳗鲡表皮黏液的黏附特性

采用间接ELISA法研究菌浓度、孵育时间、温度、pH、阳离子及碳源等因子对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)黏附鳗鲡(Anguilla anguilla)表皮黏液的影响。结果表明, 改良后的间接ELISA法的检测灵敏度约为9.92×10⁴ CFU, 细菌的黏附量随菌浓度的升高而逐渐增大并符合饱和黏附动力学方程: y=0.135ln(x)-0.936(R²= 0.986); 嗜水气单胞菌黏附鳗鲡表皮黏液的最佳条件为: 温度20~28℃, pH 6.2~6.6, NaCl、MgCl₂质量浓度分别为15~25 g/L和3 g/L, 孵育时间为150 min。碳源对嗜水气单胞菌的黏附作用有不同程度的影响, 葡萄糖和麦芽糖能显著提高嗜水气单胞菌的黏附量(P<0. 05), 果糖则显著降低嗜水气单胞菌的黏附量(P<0. 05)。以上结果说明, 嗜水气单胞菌对鳗鲡表皮黏液具有较强的黏附作用, 且其黏附作用具有可控性。

     

河蟹套养南美白对虾养殖技术

正河蟹是我国重要的淡水蟹类,其肉质细嫩,味道鲜美,营养丰富,但随着河蟹养殖面积和产量的增加,河蟹市场价格波动较大,经常出现价格低迷的情况,为了提高养蟹池塘的利用率,提高池塘养蟹的经济效益,迫切需要探索河蟹套养的新模式。南美白对虾是当今世界养殖产量最高的三大虾类之一,其生长快,抗病能力强,肉质鲜美,加工出肉率可高达67%,适温适盐范围都较广,是一种优良的淡化养殖品种。2015年笔者在江苏省宿迁市水产科技示范园有限公司养殖基地探索了蟹池套养南美白对虾新模式,在既不影响河蟹养殖,也不需要