S100A16蛋白多克隆抗体表达条件的优化

探索优化并构建S100A16原核表达载体、制备S100A16蛋白多克隆抗体的条件。试验方法为,将RT－PCR扩增得到的小鼠肝脏组织的S100A16基因克隆片段连接到带有His标签的原核表达载体pET－28a多克隆位点,并转化大肠杆菌BL21（DE3）,用不同温度、不同浓度IPTG（异丙基－β－D－硫代半乳糖苷）诱导融合蛋白表达,通过亲和层析柱纯化获得纯化的蛋白质。经免疫动物得到His－S100A16抗血清,通过免疫亲和层析获得了具有高度特异性抗体,通过Western Blot和Elisa检测抗体的特异性和效价,结果表明,在温度25℃、IPTG浓度为0．2 mmol／L的条件下,可溶性蛋白的表达效果较好。     

高等职业院校宠物医学专业顶岗实习质量保障体系构建

顶岗实习是高等职业院校的一个重要教学环节,也是加强校企合作、践行工学结合教学模式的有效途径。由于实习学生众多、实习地点较分散等原因,导致顶岗实习过程中学校对学生的监管不到位,顶岗实习质量难以保证。本文以江苏农牧科技职业学院宠物医学专业顶岗实习为例,探索构建高等职业院校宠物医学专业顶岗实习质量保障体系,以期促进顶岗实习的顺利有效开展。     

小动物静脉麻醉研究进展

兽医静脉麻醉历史悠久,应用广泛,随着临床药理学的发展,新超短时作用药物的开发应用及给药技术的进步,对静脉麻醉的研究与使用越来越深入和普遍。本文结合国内外研究动态,就近年来小动物常用静脉麻醉药物及用法做一综述。     

藏獒精液冷冻技术的研究

以藏獒为试验材料,对藏獒精液冷冻过程中的几个主要技术环节进行研究,旨在确定适合于藏獒精液冷冻保存的方法.对藏獒精液冷冻过程中降温平衡时间、不同液氮面高度和解冻温度进行研究,结果表明精液用200 Ml水进行降温平衡,距液氮面3 am熏蒸,用40℃解冻时精液的冷冻效果最好.     

肉中猪源性成分Real-time PCR定量检测技术

【目的】建立一种快速、准确的肉中猪源性成分定量检测方法。【方法】首先从GenBank数据库中筛选猪特异性的微卫星DNA,根据微卫星DNA核酸序列设计引物,对常见10种动物基因组DNA进行PCR扩增,通过有无扩增产物判断筛选的微卫星DNA对猪源性成分的特异性。然后根据微卫星DNA核酸序列,设计特异性引物和探针,建立猪源性成分Real-time PCR检测方法,采用双标准曲线分别对猪源性成分和总动物源性成分进行定量,计算猪源性成分的百分含量。【结果】筛选到猪特异性微卫星DNA（Accession EF172428）,根据其序列设计的引物SEQ-sus2-F/R只能从猪基因组DNA中扩增出目的条带,其他动物的基因组均无目的条带扩增。建立的Real-time PCR检测方法灵敏度为0.02 ng/25 μL反应体系。该方法能够准确检测出混合DNA样品中猪源性成分和混合肉样品中猪源性成分,百分误差分别约为1.32%和1.06%—7.12%。【结论】本研究利用Real-time PCR技术建立的定量猪源性成分的检测方法可以用来检测猪源性成分在混合样品中的百分含量。     

一例犬急性肾损伤的诊断及治疗

急性肾损伤是一种由于局部缺血、缺氧或毒素等原因导致肾小球滤过率突然下降,从而引发以氮质血症和酸碱紊乱为特征的综合症。一般情况下,犬类在患上急性肾损伤之后,发病的速度会非常快,并且过程短,如果不第一时间采取措施进行治疗,或者治疗时出现差错,极有可能对犬的生命造成严重地影响。本文介绍了一例犬急性肾损伤病例的诊治过程,供同行参考。     

加菲猫 糖尿病诊治

正糖尿病是猫的常见代谢性疾病,患猫表现为高血糖、酸中毒和出现酮症。1临床症状7岁雄性未绝育加菲猫尿频,饮欲、食欲增强,体重减轻,出现呕吐,一天呕吐五六次。病猫体温37.3℃,呼吸18次/min,心率72次/min,被毛杂乱、无光泽,皮肤弹性降低,脱水,腹部触诊无疼痛感,口腔黏膜微黄,其精神差,全身无力。     

犬瘟热病毒单抗夹心ELISA检测方法的建立

以2株犬瘟热病毒(CDV)特异性单克隆抗体2H11和1G7为基础建立了检测CDV的单抗夹心ELISA方法.用单抗2H11作为捕获抗体,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的单抗1G7为检测抗体,通过方阵试验确定2H11和1G7-HRP的最佳工作浓度分别为200和475 ng· mL-1.建立的单抗夹心ELISA方法具有良好的...     

人工感染吉氏巴贝斯虫后犬脾脏病理学变化

为了明确吉氏巴贝斯虫感染后犬脾脏的病理学变化，本试验采用静脉接种的方法感染健康犬，每只犬接种含吉氏巴贝斯虫的血液5 mL(红细胞染虫率约2%),接种后每3天采集1次血液，通过血涂片、血常规、PCR等方法监测吉氏巴贝斯虫是否感染成功；每7天采用B超检查脾脏的大小；对发病死亡犬进行病理剖检和组织病理学检查，观察脾脏病理组织结构的变化。结果显示，人工接种吉氏巴贝斯虫3 d后PCR可检测到虫体DNA,6 d后血涂片可见虫体，15 d后血常规指标(红细胞总数、血红蛋白含量和红细胞压积)开始降低。B超检查结果显示，犬感染吉氏巴贝斯虫后其脾门、脾尾厚度随病程延长逐渐增大。于感染后第31、36天和第42天试验犬分别死亡1只，死亡率为50%,剖检死亡犬可见其皮下黏膜黄染，脾脏肿大，被膜紧张，边缘钝圆，脾梗死。组织病理学观察可见脾脏充血，白髓、红髓界限不清，大量中性粒细胞、单核巨噬细胞浸润，结缔组织增生，脾小梁增粗，梗死灶内大面积坏死，淋巴细胞减少，中性粒细胞浸润。由此可见，在吉氏巴贝斯虫感染过程中脾脏首先发生急性炎性脾肿，随着病程延长逐渐演变成坏死性脾炎和慢性脾炎。