H5N1 和 H9N2 亚型禽流感病毒HA基因的原核表达

采用自行设计的引物,通过PCR的方法,分别从pMD-HA5和pMD-HA9中成功扩增出AIV 0025(HSN1)株和KMⅢ(H9N2)株的血凝素(hemagglutinin,HA)基因,然后分别亚克隆到pET-32a( )、pET-28a( )表达载体中,构建并筛选出阳性重组子,分别标记为pET32-HA5、pET28-HA9.将阳性重组质粒转化进B121(DE3)宿主菌中,通过改变IPTG浓度和诱导时间,使重组蛋白获得表达,并确定了最佳诱导条件为IPTG终浓度1.0 mmol/L、诱导时间4～5 h.经SDS-PAGE和 Western-blotting 分析表明,重组蛋白相对分子质量约为85 000和63 000,主要存在于包涵体中,具有良好的免疫学活性.     

贵州毕节市优质牧草种植技术要点探讨

草食家畜在饲养过程中需要种植牧草,这是降低成本、提高经济效益的有效手段之一。近年毕节地区畜牧业发展很快,探索和应用高效牧草种植技术具有重要意义,毕节作为传统农业大区,大力种植优质牧草饲料作物发展养殖业,是畜牧业提质增效的关键。该文主要介绍优质牧草种植技术要点,提出种植、牧草病害防治、刈割与加工等具体措施。     

一株产生氨氮和亚硝酸盐氮菌的筛选鉴定及特性研究

从4个草鱼池塘中分离和定性筛选获得29株能够产生氨氮和亚硝酸盐氮的菌株。通过对编号为C95的菌株进行菌落形态学观察和16S rDNA序列分析,表明该菌株为革兰氏阴性杆状菌,与寡养单胞菌属（Stenotrophomonas sp.）的同源性达98%。采用单因素多水平试验对菌株的产氨氮和产亚硝酸盐氮特性进行研究发现：（1）氮源、碳源、温度和摇床转速都能显著影响菌株的生长及产生氨氮和亚硝酸盐氮的含量,但pH（5～9）对其无显著影响（P〉0.05）;（2）该菌株生长及产生氨氮和亚硝酸盐氮最适宜的培养基以及培养条件为：LB、pH 5～9、25℃、150 r.min-1。由C95作为指示菌株筛选得到SC01、SC07两株（2/33）去除氨氮和亚硝酸盐氮效果较好的菌株。因此,C95可作为筛选具有降氨氮和亚硝酸盐氮功能的有益菌的指示菌株。     

动物园野生动物消化道寄生虫感染调查

为了解广州市某野生动物园草食类及灵长类野生动物肠道寄生虫的感染情况,采用粪便检查法共检查36种动物500份粪样,总阳性率为50.6%。其中毛圆线虫、毛尾线虫、蛔虫、类圆线虫、钩虫、绦虫、片形吸虫、球虫的感染率分别为37.4%、5.0%、5.4%、2.0%、0.2%、2.4%、0.4%、7.8%。草食类和灵长类动物寄生虫感染率分别为61.3%和28.4%,其中长颈鹿的毛圆线虫、猴科动物的毛尾线虫感染较为普遍,年平均感染率分别为64.5%和31.2%,具有明显季节性。采用粪便培养法将毛圆线虫卵培养至第三期幼虫,对其进行形态学鉴定,结果显示,来自长颈鹿、角马、弯角剑羚的毛圆线虫样品多为混合感染,其中捻转血矛线虫为优势虫种。     

月季黑斑病害调查及抗病品种初筛

月季黑斑病是一种公认的世界性病害,严重制约着月季栽培生产和发展。为了解不同月季品种对黑斑病抗病性的差异,筛选抗黑斑病的月季品种,对昆明市南国山花月季种质资源园内400个露天栽培的月季品种进行黑斑病发病情况田间调查,初步筛选出210个黑斑病严重感病品种、39个易感病品种、55个中抗品种、31个高抗品种和65个黑斑病免疫品种。     

橡胶林下饲养密度对瑶鸡生长性能的影响

在云南德宏橡胶林下开展不同饲养密度对瑶鸡生长的影响试验,结果表明:1∶1、1∶2两种饲养密度对瑶鸡的采食量和料重比有显著影响,但对瑶鸡的平均增重、总增重、出栏体重无显著影响。高密度(1∶2)的鸡数量多而获得低料重比、高出栏总重的效果。德宏橡胶林下放养瑶鸡较适的饲养密度为1∶2,即2只鸡/m~2,既能充分利用橡胶林下空间,又能使鸡群表现出较好的生长性能。     

新时期农村剩余劳动力转移研究

作为后发外生型现代化的农业大国,在迈向现代化的进程中,不可避免地遇到了农村剩余劳动力向非农产业转化的问题。在中国这样一个农业大国,农业现代化是实现全国现代化的重要条件,而实现农业现代化的关键在于农村剩余劳动力的转移。该文将从农村剩余劳动力转移的特征、制约因素、所带来的问题以及对策建议方面加以论述,以期为"三农"问题提供相关参考。     

基于多运动特征的森林火灾烟雾图像识别算法

为甄别林火烟雾与大气云雾,提出了基于多种运动特征判据的视频烟雾图像检测算法。首先利用烟雾自身 的光学动态特征———光流方向性、相关性、扩散性,分别对连续帧包含烟云的可疑区域进行图像特征标志判别;再 经数据融合算法有效区分林火烟雾与大气云雾,克服了依靠单一图像特征检测烟雾的不足。结果表明,光流方向 性、相关性、扩散性判别相结合的识别算法能提高森林火灾视频图像的有效识别率。      

鸡新城疫病毒(NDV)HN蛋白基因核酸疫苗的构建与血凝活性测定

将NDV弱毒株长春株表面糖蛋白HNcc基因和强毒株四平株HNsp分别插入到核酸疫苗质粒pIRES1中 ,置于CMV启动子的调控之下 ,构建成核酸疫苗表达质粒pIRHNC 及pIRHNS。经酶切鉴定插入正确后 ,用脂质体法转染BHK细胞 ,并于转染后 2 4h、4 8h、72h和 96h收获细胞 ,同时用G4 18进行筛选 ,待筛选细胞长成单层后收获一次细胞。取细胞裂解液检测其血凝活性。通过血凝试验表明两核酸疫苗质粒中的HN蛋白基因均获得表达并具有类似与天然蛋白的蛋白活性 ,且G4 18筛选后表达量高于筛选前的表达量 ,HNC活性略高于HNS。     

养殖水体中添加芽孢杆菌对草鱼免疫和抗氧化功能的影响

选取体质量约45 g的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)210尾,随机分为2组,每组设3个重复;对照组在水中不添加任何菌,处理组每隔7天分别向水中按照1×108cfu/m3添加芽孢杆菌(Bacillus)菌粉,二组均饲喂基础日粮。结果表明,与对照组相比,处理组血清球蛋白、白球比、免疫球蛋白M(IgM)和补体C3分别提高了44.62%(P<0.05)、54.59%(P<0.05)、8.28%(P>0.05)和45.12%(P<0.01),而血清总蛋白、白蛋白以及溶菌酶(LZM)、血清髓过氧化物酶(MPO)和碱性磷酸酶(AKP)活性无显著变化(P>0.05);与对照组相比,处理组草鱼肝脏、血清和肠黏膜中总抗氧化力(T-AOC),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和抗超氧阴离子自由基(ASAFR)显著升高(P<0.01),而肝脏中丙二醛(MDA)含量显著下降(P<0.01),肠黏膜MDA显著升高(P<0.01),血清中MDA无显著影响。由此可见,水体中添加芽孢杆菌制剂可以提高草鱼机体免疫力和抗氧化活性,但也使草鱼肠道受到一定程度的应激胁迫。