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中华蜜蜂王浆多肽Apisimin基因转录、克隆与表达研究 总被引:1,自引:1,他引:0
构建中华蜜蜂(Apis cerana cerana)工蜂头部cDNA文库并进行了测序,从8568个表达序列标签(expression sequencetag,EST)中获得96个Apisimin基因克隆,结果表明Apisimin基因是一个高丰度转录的基因。进一步对克隆分析表明该基因cDNA全长为379 nt,包含一个237 nt、可以编码78个氨基酸的ORF。推导的Apisimin蛋白N端含有一个由24个氨基酸残基组成的信号肽,后端为54残基、预计分子量为5.9kDa的成熟肽。该ORF与意大利蜜蜂和印度蜜蜂的Apisimin基因核苷酸同源性分别为100%和95%。将成熟肽编码区进行亚克隆,构建了Apisimin与谷胱甘肽转移酶融合表达的载体pGEX/apisimin,并将重组载体转化入大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达。SDS-PAGE和薄层扫描表明,表达的融合蛋白分子量为31 kDa,表达量占细菌总蛋白的22.1%,约50%是可溶性的。通过亲和柱进一步纯化了表达的融合蛋白。 相似文献
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采用灭活的鱼肠道弧菌作为抗原,制备兔抗血清,建立了鱼肠道弧菌的间接荧光抗体检测技术(indirect im-munofluorescence assay test,IFAT)、Western-blotting免疫印迹检测技术。IFAT结果显示阳性信号覆盖整个菌体,明亮,清晰,荧光信号呈长弧形且两端钝圆,与鱼肠道弧菌形状一致。Western-blotting结果显示共10条蛋白带发生免疫反应,其中6条蛋白带结果较清晰,显示出较强的特异性免疫反应,阴性对照组无条带。IFAT和Western-blotting结果说明所建立检测方法能够准确、快速的检测出鱼肠道弧菌。 相似文献
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林业作为环境保护、生态改善的重要自然资源,在可持续发展的经济社会里,发挥着重大的作用.因此,做好林业资源的管理工作不仅对于林业本身的发展有促进作用,还能创造巨大的生态财富.本文根据工作实践,对于林业资源管理工作提出了相关对策,旨在促进林业资源管理工作. 相似文献
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网络媒体的出现和快速发展对人们的生活都造成了很大的影响,而在网络平台上最为活跃的群体就是大学生群体,因此大学生的身上有很强的网络时代的影子。大学生会通过网络平台进行交友,也会利用网络平台获取收益,同时网络还可以帮助学生开拓视野,带领大学生领略没有见过的风景,还可以加强对大学生的思维培养,提高大学生的创新意识。但是因为网络对于大学生也会产生负面影响,所以高校应该帮助大学生树立正确三观,强化其思想意识形态教育。 相似文献
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