小鼠体内卵母细胞死亡的形态变化研究

目前大多数研究主要是针对体外的卵母细胞凋亡,并且通常采用抗癌试剂来人为的引入。然而,对体内卵母细胞死亡的过程还不是很明确。为了查明体内未受精卵的死亡过程,我们检测了从输卵管壶腹部冲出的注射了HCG后不同间隔的卵母细胞中的细胞化学物质的改变情况。在每一个收集的时间段,在显微镜下将收集的卵母细胞从表观上分成四组:单细胞卵母细胞(没有激活和没有核或胞浆移动),激活的卵母细胞(带有核的单细胞,2-或4-细胞),碎裂的卵母细胞及其死亡的卵母细胞。随着时间的推移,单细胞卵母细胞的数量下降,死亡的卵母细胞数量增加,但是激活或碎裂的卵母细胞数量未发生改变。同时,检测到的大多数死亡的卵母细胞都是单细胞。在每一个时间点上,用抗微管蛋白抗体对单细胞卵母细胞进行着色,来检测它们的纺锤体状态。在注射HCG24h之后,大多数超排后的卵母细胞都有两极纺锤体,然而在超排后64h的单细胞卵母细胞就没有纺锤体。结果表明,大多数的体内卵母细胞在单细胞期就出现死亡,而激活或碎裂的卵母细胞则不是。     

猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)体外培养卵丘细胞凋亡检测

为了验证猪COCs在体外成熟过程中是否存在细胞凋亡的现象及其生物学特征,筛选快速、准确的检测卵丘细胞凋亡的方法,本试验将体外培养的猪COCs采用电子显微镜(EM)技术、苏木素-伊红(HE)染色技术、Hoechst33342-PI荧光染色技术、原位末端标记(TUNEL)法检测猪卵丘细胞凋亡,并对3种定量检测方法进行了比较与分析.试验结果表明:猪COCs在体外成熟过程中存在细胞凋亡的现象,TUNEL法检测卵丘细胞凋亡灵敏度最高,与Hoechst33342-PI荧光染色法、HE染色检测法相关系数分别为0.93、0.85.在本试验中Hoechst33342-PI荧光染色法可代替TUNEL法检测卵丘细胞凋亡.     

冷冻保护剂对延边黄牛体外受精卵的影响

对延边黄牛体外受精卵进行了毒性实验,结果表明,延边黄牛体外受精桑椹胚在0.5M海藻糖(7.6%)和0.5M蔗糖(3.2%)溶液中的存活率差异不显著,早期囊胚在0.5M海藻糖(58.3%)溶液中的存活率显著高于0.5M蔗糖(34.5%)组,在同一处理内早期囊胚的存活率显著高于桑椹胚(P<0.05).以0.5M海藻糖为基础液,分别用0.0(对照组),2.0,2.5,3.0,3.5M甘油处理延边黄牛体外受精早期囊胚,其存活率对照组与不同浓度甘油组之间差异均不显著.     

甘氨酸及二甲基亚砜对冷冻保存兔精液活率的影响

在筛选出稀释液配方和平衡时间的基础上,探讨了不同浓度的甘氨酸及DMSO对冻融后兔精子活率的影响.试验结果表明:(1)在同一浓度的甘氨酸(分别为7.0mg·mL-1、7.5mg·mL-1和8.0mg·mL-1)条件下,解冻后精于活率与DMSO浓度呈负相关,各组彼此差异显著(p＜0.05).(2)当DMSO浓度为7.5％时,不同甘氨酸浓度对精液冷冻效果差异不显著(P＞0.05);当DMSO浓度为10％时,甘氨酸浓度为7.5mg· mL-1组的解冻后精子活率49.82％最高,其次是7.0mg·mL-1组43.41％,8.0mg·mL-1组37.29％最低,且各组间差异显著(p＜0.05);当DMSO浓度为12.5％时,甘氨酸浓度7.0mg·mL-1组的解冻后精子活率26.69％显著低于7.5 mg·mL-1组和8.0mg· mL-1组(P＜0.05),而7.5mg· mL-1组(32.97％)和8.0rng·mL-1组(34.64％)间无显著差异(P＞0.05).综上所述,獭兔精液冷冻保护液中添加7.5mg· mL-1甘氨酸和7.5％ DMSO,可得到较好冷冻保存效果.     

钙离子载体对牛精子体外受精及胚胎发育的影响

在牛精子获能液中添加不同浓度的钙离子载体,应用体外培养技术对牛精子体外获能及早期胚胎发育作了研究。通过对顶体反应、超激活、活率和早期胚胎发育率的观察,筛选出获能液中最适的钙离子载体浓度,作用时间及其有利于早期胚胎发育的最佳浓度。结果表明:钙离子载体在诱导牛精子获能上存在一个浓度-时间阈值,其最佳浓度和时间组合是0.1μM处理2min或者0.15μM处理0.5min,此时的囊胚率最高;钙离子载体的添加不能诱导牛精子获能的发生。     

促卵泡素与促黄体素对猪卵母细胞体外成熟的影响

本试验探讨了促性腺激素(FSH、LH)对猪卵母细胞体外成熟的影响,最终找到了其合理的使用剂量。在成熟液中添加LH浓度分别为1、5、10 IU/mL时,与没有添加FSH与LH的对照组(15.9%)相比,成熟率有显著提高,成熟率分别为49.1%、30.0%、36.3%。LH浓度为1 IU/mL的实验组成熟率最高,显著高于对照组(p<0.05);然后以成熟液中只添加1 IU/mLLH为对照组,试验组分别添加1、5、10 IU/mLFSH。试验结果表明:添加FSH浓度为5和10 IU/ml时其成熟率分别为40.1%、27.6%,低于对照组(49.0%)。添加FSH浓度为1 IU/mL时其成熟率(49.1%)高于对照组(49.0%),但差异不显著(p>0.05)。两组试验同时得出,随着LH与FSH添加浓度的增加,成熟率呈下降趋势。通过本试验结果得出,在体外成熟培养猪卵母细胞时,各添加1 IU/mL LH与FSH时,得到最佳的成熟效果。     

中美高等动物科学教育课程建设的比较与启示

随着科学技术的不断发展和农业生产的商品化、专业化,高等动物科学教育在我国国民经济发展和人民生活水平的提高中发挥着日益重要的作用。同时,农业经济的国际化必然要求我国高等动物科学教育与国际接轨。为了了解发达国家高等动物科学教育的现状、动态、改革和发展趋势,同时,为完善我国培养动物科学高级专门人才的知识结构和培养模式,对我国与美国高等动物科学教育的课程建设进行了比较研究,以期能为新世纪我国高等动物科学教育改革与发展战略规划的研究和制定提供一些参考。1美国高校动物科学专业课程设置美国高校动物科学教育的课程设置,…     

母兔超数排卵影响因素的研究

探讨家兔稳定高效的超数排卵方法,旨在获得充足的优质兔卵母细胞。采用国产促性腺激素对中国白兔进行超数排卵试验,研究激素、季节及超排次数对超排效果的影响。结果发现：FSH组平均排卵数（23．86±2．47个／只）显著高于PMSG组（18．43±2．31个／只）（P〈0．05）。母兔在春、夏、秋、冬的排卵数为（27．34±3．32、12．21＋2．77、21．16±3．54、18．87±3．47）个／只。春季的处理效果显著优于其他3个季节（P〈0．05）,而秋季和冬季处理组之间差异不显著（P〉0．05）,但都显著高于夏季（P〈0．05）。母兔在第1次、第2次、第3次超排后排卵数分别为（24．46±2．68、19．67±2．54、13．37±1．73）个／只,相互之间差异显著（P〉0．05）。以上结果表明,FSH超排效果优于PMSG;且在春季对母兔进行超排处理比较合适;母兔一次超排比多次超排效果更好。     

哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展

本文对哺乳动物卵母细胞孤雌激活机制、激活方法及激活效果的影响因素等作了浅要的综述和总结。     

延边黄牛卵母细胞激活及孤雌发育

探讨了提高延边黄牛卵母细胞激活率及孤雌发育率的适宜方法。从屠宰场回收的卵巢中采集未成熟的卵母细胞 ,置于体外成熟培养液中 ,体外成熟培养 2 0～ 2 2 h。将体外成熟的卵母细胞 ,分别用不同浓度的乙醇或 Ca- ionophore进行单一激活处理。试验结果表明 ,用 5 %、7%、9%、1 1 %及 1 3 %乙醇激活卵子 ,激活率分别为 4 1 .2 %、4 7.2 %、5 3 .1 %、3 9.7%及 2 3 .4 %,7%和 9%乙醇处理组的卵子激活率显著高于其他组 (P<0 .0 5 ) ,但二者之间差异不显著 (P>0 .0 5 )。用 2 .5、5 .0、7.5μm ol/L Ca- ionophore激活卵子 ,激活率分别为 2 9.3 %、5 1 .8%、4 5 .4 %,5 .0、7.5μmol/L Ca- ionophore处理组的卵子激活率显著高于 2 .5 μmol/L 组 (P<0 .0 5 )。用 9%乙醇或 5 .0 μm ol/L Ca- ionophore分别与 1 0 m g/Lcyclohexim ide(CH)组合激活卵子 ,卵子的激活率分别为 77.3 %和 76 .8%,比单独用 9%乙醇 (48.8%)或 5 .0μmol/LCa- ionophore(43 .2 %)的激活率显著提高 (P<0 .0 5 ) ,二者卵子的卵裂率和发育到 8细胞期的孤雌发育率均无显著差异