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61.
人胎儿骨髓间充质干细胞(BMMSCs)的群体倍增次数(70~80次)是成体BMMSCs(30~40次)的2倍,分化能力优于成体干细胞.研究采取纵向剪开骨髓腔涮洗细胞法和全骨髓培养法分离2~3月龄流产胎儿BMMSCs,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)筛选基础培养液和血清浓度并制作生长曲线,流式细胞仪和免疫组织化学法鉴定细胞抗原标志,并通过核型分析和成瘤实验评估细胞的安全性.结果表明,沿长轴剪开骨髓腔涮洗细胞法是获得2~3月龄人流产胎儿四肢长骨骨髓的实用方法.在实验范围内α-MEM(minimum essential medium alpha medium) 20?S(fetal cattle serum)是体外培养2~3月龄流产胎儿BMMSCs的最佳体系.分离的第3代BMMSCs除表达成体BMMSCs表面抗原标志外还表达Oct4、SSEA3和SSEA4,第6、12和24代细胞在对数增长期的群体倍增时间分别为34、36和40h,且均为二倍体核型、不成瘤.这证明2~3月龄人流产胎儿BMMSCs可以成为人类组织工程和再生医学研究理想的种子细胞. 相似文献
62.
胚胎移植技术的现状与展望 总被引:15,自引:0,他引:15
统计与分析了1991-2000年国际胚胎移植状况,结果表明胚胎移植已成为畜牧产业中最活跃的领域之一,胚移比例最大的依然是牛,其它各类的动物胚胎移植,如:绵羊、山羊、猪、马、鹿、美洲驼、羚羊等,也十分活跃。牛的胚胎移植,有几个重要指标分析结果如下:(1)供体牛的品种分布基本相同,肉牛与奶牛所占比例接近,但不同国家之间差别很大;(2)每头供体所得可用胚数在5-6枚之间;(3)鲜胚移植与冻胚移植的比例基本持平,但近年来冻胚移植的比例稍大于鲜胚移植;(4)通过IVF体外方式生产胚胎数目有所增长,目前每年大约在3-4万枚;(5)妊娠率、鲜胚移植妊娠率在60%以上,冻胚移植妊娠率在50%以上,IVF体外方式生产胚胎妊娠率在40%左右;(6)胚胎移植技术的发展状况在全世界分布不均衡,北美和欧洲胚移技术最成熟;(7)胚胎贸易有所增长。最后,对该技术存在的问题与发展前景提出了探讨和展望。 相似文献
63.
64.
为探讨不同激活剂的卵母细胞孤雌激活效果及激活胚体外发育情况,用乙醇、CaA23187、SrCl2、6-DMAP及CB分别对小鼠卵母细胞进行了激活处理.结果显示,70 mL/L乙醇刺激小鼠卵母细胞时,以激活5~7 min的激活效果及孤雌胚发育较好,桑囊胚发育率可达29.11%;用SrCl2激活小鼠卵母细胞时,6~10 mmol/L为最佳处理浓度,3~6 h为最佳激活时间,桑囊胚发育率可达16.67%;以70 mL/L乙醇激活5 min,再用2 mmol/L 6-DMAP+5 μg/mL CB激活3 h效果最佳,桑囊胚发育率高达35.77%.研究证实,小鼠卵母细胞经乙醇、6-DMAP和CB等复合激活后能较好地发育. 相似文献
65.
原始生殖细胞的人类ES细胞的分离克隆 总被引:6,自引:0,他引:6
本研究收集47例4-13周龄人流产胎儿分离PGCs,采用与其生殖嵴/腺或类似物胎儿成纤维细胞共培养的方式,获得了具小鼠ES细胞或EG细胞特征的人类ES细胞,该类细胞在体外可自发分化为类胚体,成纤维细胞样细胞,神经胶质细胞样细胞及心脏跳动样细胞团等,同样方法自4例大于17周龄胎儿未观察到人类ES细胞,研究表明,采用共培养法可以从4-13周龄流产儿的PGCs分离克隆到人类ES细胞,最适宜胎龄为7-10周龄。 相似文献
66.
67.
68.
69.
研究了人胎儿肺间质干细胞染色体的制备方法,并对其染色体进行分析。结果表明,第5代细胞培养44 h,第15代细胞培养42 h,经终浓度0.025μg/mL秋水仙素作用2 h,0.075 mol/L KCl低渗25 min,正常核型比率最高,分别达到85.1%(171/201)和80.0%(172/215)。 相似文献
70.
研究了牛卵泡卵母细胞体外受精时向成熟液中加入EGF(表皮生长因子),受精液中加入GSH(谷胱甘肽)对受精率和囊胚率的影响。成熟液以M-199为基础液并加入一定浓度的促性腺激素和OCS,作为成熟液的对照组,试验组加入不同浓度的EGF。受精液以改良TALP为基础液并加入一定浓度的BSA、肝素和咖啡因,作为受精液的对照组,试验组加入不同浓度的GSH。早期胚胎培养液为SOFaa。在成熟液中加入10ng/mlEGF和50ng/mlEGF组时,试验组与对照组的受精率分别为76.00%(114/150)、76.71%(112/146)和60.70%(85/140);囊胚率分别为23.68%(27/114)、24.11%(27/112)和17.64%(15/85);在受精液中加入1mMGSH和10mMGSH组时,试验组与对照组的受精率分别为71.66%(86/120)、63.28%(81/128)和76.00%(114/150);囊胚率分别为34.88%(30/86)、24.69%(20/81)和23.68%(27/114)。结果表明,成熟液中加入EGF对牛卵母细胞的体外成熟和受精后的早期胚胎的发育都有促进作用,在一定范围内增加EGF浓度,不会提高受精率和囊胚率;受精液中加入一定浓度GSH能够提高受精率和囊胚率,但是在高浓度的GSH时则影响受精率。 相似文献