艾美耳球虫单卵囊分离及PCR鉴定

目前为止,鸡主要有7种艾美耳球虫,在卵囊形态、结构、大小、肠道病变、寄生部位、最短孢子化时间、最短潜伏期等方面均具有自身特征[1].这使球虫诊断问题复杂化.     

利用重组表位蛋白map0862-2154c检测牛副结核血清抗体胶体金免疫层析方法的建立（英文）

筛选牛副结核分枝杆菌的2个主要抗原map0862、map2154c中抗原指数高的抗原表位基因,将多表位基因序列合成,与原核表达载体pET28a(+)连接,构建重组质粒pET28a-map0862-2154c。重组质粒转化至大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中诱导表达,以表达的重组表位蛋白为抗原建立检测牛副结核分枝杆菌抗体的胶体金免疫层析方法(GICA,map0862-2154c-GICA),同时对河北省部分牛场采集的242份副结核病奶牛血样进行血清抗体检测。结果表明,牛副结核分枝杆菌表位蛋白map0862-2154c成功表达,表达产物能与牛副结核分枝杆菌阳性血清反应。临床血清样本检测结果表明,其敏感性、特异性和符合率分别为91.86%(79/86),94.23%(147/156)和93.38%(226/242),该方法可用于牛副结核病的血清抗体检测。     

温氏附红细胞体PCR检测方法的建立

本研究旨在建立1种快速准确检测温氏附红细胞体感染的分子生物学诊断方法。根据温氏附红细胞体的16S rRNA基因参考序列的保守区,利用软件Primer Premier 5.0设计合成了1对特异性引物,对温氏附红细胞体的基因组DNA进行PCR检测。结果表明,扩增出1段985bp的DNA序列,EcoRⅠ酶切鉴定得到2条500bp左右的条带,与预期结果一致,说明该方法扩增出了温氏附红细胞体的特异性条带。通过敏感性、特异性、重复性和临床样品检测试验证明,该方法具有特异、灵敏、快速的优点。结果提示,所建立的方法具有较高的特异性和灵敏性,可用于牛附红细胞体病诊断和流行情况监测。     

温氏附红细胞体双抗体夹心ELISA检测方法的建立

采用辛酸硫酸铵法从温氏附红细胞体高免血清中提取IgG,过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶,建立了检测温氏附红细胞体抗原的双抗体夹心ELISA.结果显示:抗体最佳包被量为156μg/mL,酶标抗体最适工作浓度为1∶400,抗原最低检出量为6.64μg/mL,抗原及酶标抗体的最佳作用时间分别为1 h.应用建立的检测方法对河北省内222份奶牛血样进行了检测,阳性检出率为91.0%.证实:该方法灵敏度高,简便快速,适合作群体检测.     

早期断奶仔猪腹泻的影响因子及防制措施

在目前集约化、规模化养猪生产中,断奶仔猪腹泻病的报道较多。大部分报道表明,腹泻病死率一般占10%~20%,高的可达40%以上。断奶仔猪腹泻已成为常见病、多发病,严重困扰着养猪业的发展。如何有效防制断奶仔猪腹泻病是当今养殖生产中最为重要的问题之一。1断奶仔猪发生腹泻的原因     

浅析框图分析法在装载机液力传动系统故障分析中的应用

文章根据装载机液力机械变速箱总成系统结构组成、工作原理与零部件失效之间的关系绘制了故障分析框图,通过框图分析装载机变速箱温度过高、装载机行驶无力两种常见的故障。结果表明:框图方法运用到故障分析,会包含全部总成系统工作信息,能最大程度的把故障点限定在某些零件或者工作环节,这样的分析结果即使对维修经验不足者也能起到很好的帮助。     

牛病毒性腹泻病毒HB-DCZ株E0基因的克隆与抗原表位预测

根据GenBank上发表的牛病毒性腹泻病毒(BVDV) Oregon C24V株E0基因的核苷酸序列设计1对特异性引物,应用PCR技术扩增BVDV HB-DCZ株E0基因.将PCR产物克隆到pMD18-T载体,克隆产物进行序列测定与分析.结果显示,HB-DCZ cDNA体外扩增获得特异性条带,约为687 bp.序列测定结果表明,HB-DCZ株E0基因由681个核苷酸组成,编码227个氨基酸.与已公开发表的BVDV其他毒株核苷酸和推导氨基酸序列同源性相似顺序依次为:CCSYD 99％和98.7％、QHZK10 98.4％和97.8％、VEDEVAC 98.2％和97.8％、Oregon C24V80.9％和89.9％、Yak 74.2％和81.1％.HB-DCZ与CCSYD、QHZK10以及VEDEVAC株的遗传距离较近,与国际标准毒株C24V、Yak株的遗传距离较远.运用Kyte-Doolittle方案预测氨基酸的亲水性,采用Karplus-Schulz方案预测蛋白质的柔性区域,按Jameson-Wolf方案预测抗原指数,利用Emini方案预测蛋白质的表面可及性.对预测结果综合分析,推测最有可能的B细胞表位位于N-端6～17、23～29、47～53、59～68、70～81、97～109、114～122、127～134、137～143、165～172、186～198和213～220.     

"抗暑一号"对热应激小鼠部分血液生理生化指标的影响

为探讨中药复方制剂"抗暑一号"对热应激小鼠部分血液生理生化指标的影响,将50只昆明小鼠随机分成5组,每组10只,其中1组至3组为热应激中药低、中、高剂量治疗组,4组为阳性对照组,5组为阴性对照组。各组按常规饲养,其中1组至4组模拟夏季高温天气,在生化培养箱内复制热应激病理模型。1组至3组分别灌服1∶1的"抗暑一号"煎剂0.2、0.40、.6 mL,4组和5组分别灌服生理盐水0.4 mL,各组连续灌胃1周。各组于末次灌药后的24 h,摘除眼球采血分离血清检测相关生化指标。结果表明,阳性对照组中的K+、Cl-、GOT、GPT浓度较阴性对照组显著升高(P<0.01),而Na+、TP、ALB、AKP浓度较阴性对照组显著降低(P<0.01)。3个剂量均能不同程度改善热应激小鼠的血液生理生化指标异常,与阳性对照组相比,差异均极显著(P<0.01),其中Na+、K+、TP、GPT浓度已回升至正常水平(与阴性对照组相比,P>0.05)。