鸡cGAS基因的克隆、表达特性分析及FAdV-4感染前后亚细胞定位变化

cGAS作为一种新型的胞质DNA受体,在宿主抵抗DNA病毒而触发的天然免疫中起着至关重要的作用。血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)是无囊膜的一种双链DNA病毒,可引起鸡肝炎-心包积液综合征。为明确鸡cGAS(chcGAS)基因功能,探究在鸡肝癌(LMH)细胞中过表达chcGAS以及FAdV-4感染前后细胞定位的变化情况。本研究针对chcGAS序列设计引物进行PCR扩增,并分析该基因序列与其他物种之间的同源性以及预测该基因的结构域,构建重组质粒pET-32a-chcGAS进行原核表达,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定,利用激光共聚焦观察FAdV-4感染LMH细胞前后chcGAS细胞定位变化。结果表明,本试验克隆得到大小为1 317 bp的chcGAS基因,与其他物种同源性为50.5%～84.4%,SDS-PAGE分析结果显示,chcGAS蛋白主要以可溶性蛋白质的形式在上清液处表达,目的蛋白质相对分子质量为75 000,与预期大小相符。亚细胞定位结果显示,FAdV-4感染可导致定位于细胞核膜上的chcGAS蛋白转移到细胞...     

小鹅瘟的诊断及其病理组织学观察

对3例疑似小鹅瘟感染病禽进行临床观察和病理解剖,结果均发现小肠中后段膨大,小肠末端形成特征性的"肠栓"。针对鹅细小病毒VP3基因设计1对引物,对3例病死鹅的肝脏组织进行PCR检测,结果均扩增出与预想结果一致的331 bp鹅细小病毒特异片段;取病死禽的十二指肠、回肠、心、肝、脾、肾等组织制作石蜡切片,HE染色,进行病理组织学观察,结果显示其十二指肠肠绒毛脱落,回肠粘膜大片坏死脱落并与纤维素性渗出物混杂形成栓子,其他部位病变不明显。皖西白鹅还表现肝组织淤血、肝细胞脂肪变性,肾脏肾上皮细胞变性、坏死,淋巴细胞浸润。     

血清4型禽腺病毒POCT荧光微球免疫层析检测方法的建立

为了迅速且便利地判定血清4型禽腺病毒(FAdV-4),设计引物进行扩增,构建重组载体,原核表达的融合蛋白乳化后动物免疫得到多克隆抗体,用Western Blot检测,最后建立即时检验(POCT)荧光微球免疫层析试纸条,并进行初步应用。用POCT荧光微球免疫层析试纸条检测不同浓度的FAdV-4病毒液及临床阳性样本,结果表明,用POCT荧光微球免疫层析试纸条15 min可以检测出结果,且检测出阳性,与临床诊断结果相符。建立的POCT荧光微球免疫层析检测FAdV-4的方法,特异性良好,操作简单且便于携带,检测效率高,有利于基层兽医临床检测。     

现代生物实验技术综合性实验教学改革探索与实践

在现代生物实验技术课程基础上,开设综合性实验,进行综合性实验教学改革探索与实践。通过对现代生物实验技术综合性教学内容、教学方法的改革实践,探索综合性、开放式、研究性实验教学的新模式,将理论、实验教学与科学研究结合起来,培养学生的动手能力、分析和解决问题的能力,提高教学效果。     

内毒素血症山羊血浆氨基酸含量变化与氧自由基代谢的关系研究

以内毒素诱发山羊微循环障碍为模型,１２只山羊随机分为两组：Ａ组为对照组（Ｎ＝６）,Ｂ组为实验组（Ｎ＝６）。检测内毒素血症山羊血浆１７个氨基酸含量变化,以及氧自由基代谢指标血浆丙二醛含量,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性。     

高效毛细管电泳法同时分离氟喹诺酮类 与四环素类药物的研究

采用高效毛细管电泳建立4种氟喹诺酮类(FQS)与2种四环素类(TC)药物同时分离的方法。通过考虑缓冲液离子浓度、pH、有机添加剂以及分离电压、温度等电泳参数,通过正交试验确立了电泳的最佳条件:紫外检测波长270 nm,缓冲溶液为50 mmol.L-1硼砂-200 mmol.L-1硼酸,pH 8.41,分离电压为18 kV。结果表明,6种药物在12 min内达到完全分离,且各组分浓度与峰面积呈良好的线性关系,其相关系数R2为0.998 2~1,迁移时间的相对标准偏差为0.25%~0.68%,峰面积相对标准偏差为7.3%~9.8%。     

“三位一体”创新创业型农科研究生培养模式的研究与构建——以安徽农业大学为例

农科研究生创新创业能力培养是农业院校研究生培养的重要内容,然而目前农科研究生的供给现状与现代农业发展对高层次农业人才的需求间存在一定的错位。因此,须综合供给侧和需求侧的供需需求进行系统思考,探究构建集“价值塑造、能力培养、思维创新”于一体的创新创业型农科研究生培养模式,以更好实现现代农业发展对高等农业人才培养的根本诉求。     

动物性食品中氟喹诺酮兽药残留分析方法的研究进展

氟喹诺酮药物已广泛应用于治疗兽医临床上一些疾病,并且在养殖业上作为饲料添加剂用于促进动物的生长.近年来有研究发现,动物 性食品中的氟喹诺酮药物残留超标对人体存在潜在的威胁,这类兽药残留问题越来越被人们重视,而氟喹诺酮药物残留的检测方法 也有很多,目前常用的检测方法包括微生物法、各种色谱法及各种免疫分析法等.本文对这些方法加以综述.     

免疫亲和色谱在动物源性食品兽药残留分析检测中的应用

1概述免疫亲和色谱(immnuoaffinity chromatography,IAC)也叫免疫亲和层析,是色谱技术的一种,是一种利用抗原抗体特异性可逆结合的技术。主要原理是根据抗原抗体的高选择性,从复杂的待测样品中提取目标化合物。具体过程是将抗体与惰性微珠共价结合,然后装柱,将抗原溶液过免疫亲和柱,而非目标化合物则沿柱流下,