构建鲤现代种业的核心技术

对于任何一个农业物种而言,现代种业核心技术包括3个方而：收集与创制最优良的种质资源、建立先进实用的育种技术、方便的可最大化利用上述资源的数据库及网站。针对鲤这个水产养殖种,黑龙江水产研究所及合作单位经过30多年的研究积累和创制了抗寒能力强、生长速度快、肉质好的三大系列种质,在此基础七已经培育出6个水产新品种;构建了基于亲本遗传距离的分子育种技术,并在常规育种技术的使用过程中增加了统计分析和染色体操作技术,如BLUP技术、雌核发育技术等,将现代育种技术充分地运用于鲤的品种培育之中;同时建瓿了涵盖表型、生物学特征、一般遗传参数的鲤种质数据库和涵盖基因、标记及经济性状QTLs的鲤基因组数据库,使鲤具备了现代种业需要的生物学、遗传学、基因组学的完整数据库。综上所述,初步构建了鲤现代种业的核心技术。     

鲤鱼新品种——松浦镜鲤

品种简介 松浦镜鲤是在德国镜鲤选育系F4的基础上,采用混合选择方法,从1998年开始继续选育3代后获得的体形完好、背部较高而厚、生长快、抗寒力强、繁殖力高、体表基本无鳞的鲤鱼新品种。它适宜在全国各地人工可控的淡水中养殖。     

用全血短时离心培养法制备鲤鱼染色体

本实验改进了鱼类淋巴细胞培养方法,采取全血短时离心方法纯化淋巴细胞,分离效果较好,使鱼血清保留在培养液中,促进了淋巴细胞的增殖。进行染色体制片时,背景清晰,分裂相多,满足了核型分析和原位杂交等研究需要。     

池塘养殖兴凯湖翘嘴鲌的人工繁殖和胚胎发育观察

对池塘养殖的兴凯湖翘嘴鲌Eryghroculter ilishaeformis进行人工药物催情、产卵和孵化,并连续观察胚胎发育的全过程.结果表明:用激素LRH-A2、HCG和DOM混合制剂催产,催产率达(92.32±3.86)%;利用水族箱在底部充气孵化效果最好,受精率为(85.69±2.52)%,孵化率为(84.63±3.49)%,畸形率为(1.42±0.61)%;翘嘴鲌受精卵的胚胎发育时序和特征与鲢相似,可分为22个时期,水温为(26±0.5)℃时,从受精到完全孵出需24.32 h,积温为632.32℃·h,从仔鱼孵出到开口摄食需82 h,积温为2132℃·h;翘嘴鲌的成熟卵呈淡黄绿色或青灰色,无黏性,为半浮性卵,卵径为(1.16±0.13)mm,吸水膨胀后卵径达(4.15±0.32)mm,初孵仔鱼全长(3.84±0.48)mm,开口摄食时全长达(5.48±0.23)mm.     

光合细菌在越冬池中的应用研究

在黑龙江水产研究所民富富类培育中心进行了越冬池冰下施光合细菌对鱼类越冬影响的试验。经过水质定期分析与越冬成活率的比较,得出越冬池施光合细菌能使越冬池冰下水体中溶解氧和浮游植物生物量的波动较小,净化越冬池水质,使越冬水体各理化因子处于较稳定的状态,从而保证鱼类安全过冬。     

两种肝胰腺色泽中华绒螯蟹营养品质比较

将辽河水系中华绒螯蟹Eriocheir sinensis扣蟹饲养在10.4m×7.6 m× 1.2m、前期为伊乐藻Elodea nuttal-lii,后期搭配喜旱莲子草A lternanthera philoxeroides和苦草Vallisneria natans的3口池塘中,密度约为1.2只/m2.经7个月左右的常...     

兴凯湖翘嘴红Bai同工酶的研究

用水平淀粉电泳技术,对兴凯湖翘嘴红Bai的肌,肝,眼,心4种不同组织的8种同工酶（LDH,EST,MDH,IDH,SOD,ME,G－6－PDH,ADH）进行了研究,分析了各种同工酶的基因表达谱式,其中,在所检测到的20个基因卒位中只有EST同工酶中的一个座位（Est-2)表现为多态,兴凯,湖翘嘴红Bai的多态率（P）为0．05000,平均杂合度（H）为0139,与其它鲤科硬骨鱼类相比,兴凯湖翘嘴红Bai在蛋白质水平上的遗传变异表现比较贫乏。     

TLR9基因SNP位点检测及其在7种鲤中的遗传多样性研究

采用直接测序法对7种鲤(Cyprinus carpio):德国镜鲤(C.carpio L.mirror)、松荷鲤(C.carpio L)、松浦鲤(C.carpio var.Songpu)、易捕鲤(C.carpio var.Yibu)、大头鲤(C.pellegrini T.)、松浦镜鲤(C.carpio var.Songpu mirror)和野鲤(C.carpio haematoperus)TLR9基因的SNP位点的多态性和遗传多样性进行了研究。结果显示,在292个个体中共检测出37个碱基变异位点,均位于基因外显子区域,占整个片段长度的0.84%,其中20个SNP位点为非同义突变。野鲤的碱基突变位点最多,松浦镜鲤的碱基突变位点最少(P<0.05),其他各品种间无显著性差异(P>0.05);野鲤的非同义突变位点最多,松浦镜鲤的非同义突变位点最少(P<0.05),其他各品种间无显著性差异(P>0.05)。稀有等位基因频率大于0.05时,经Hardy-Weinberg卡方检验结果显示各品种中除了德国镜鲤和松浦镜鲤外,大多数位点都处于平衡状态(P>0.05);各品种的PIC值处于中低度多态水平(PIC<0.5)。卡方检验分析结果显示,各品种间共有24个位点的基因型频率存在显著性差异(P<0.05),其中11个位点为非同义突变位点,这可能是影响TLR9基因免疫应答功能的原因。     

鱼类培养的体细胞与成熟卵的电融合技术研究

利用极化注射仪—I型,对混有青鱼体外培养细胞的草鱼,鲢鱼成熟未受精卵进行正弦交(?)电场处理,使细胞与卵紧密接触,继而进行两次电脉冲。结果在673粒草鱼实验卵中有45粒发育至囊胚期,12粒发育至血液循环期,孵出鱼苗8尾。在224粒鲢鱼实验卵中,有68粒发育至囊胚期,13粒发育至血液循环期,孵出鱼苗6尾。鱼类体外培养细胞和未受精卵融合后,能继续分裂发育,说明已分化的体细胞核仍具有发育的全能性。     

黑龙江野鲤与德国镜鲤杂交组合的亲子鉴定分析

利用微卫星多态性进行鱼类亲子鉴定,在鱼类选育中具有重要意义。采用8个微卫星标记对黑龙江野鲤♀×德国镜鲤♂(正交组合),及德国镜鲤♀×黑龙江野鲤♂(反交组合)进行亲子鉴定。结果显示:(1)正交组中父母本和子代观测杂合度分别为0.607 1、0.714 3和0.681 8,多态信息含量依次为0.442 1、0.281 3和0.553 5;反交组中父母本和子代观测杂合度分别为0.708 3、0.538 6和0.743 8,多态信息含量依次为0.673 5、0.375 9和0.624 1,表明8个位点具有较高的多态性。(2)正交组中,8个位点累计排除率为99.92%,亲本与子代的配对率为98.00%(置信度为95%);反交组中,8个位点累计排除率为99.99%,亲本与子代的配对率为99.00%(置信度为95%)。(3)关于使用微卫星标记数与鉴定率的探讨,对3、4、5、6、7、8个微卫星标记时的累计排除率和亲子配对率进行比较,结果表明,正反交组分别利用6和8个多态性良好的引物就能正确鉴定。研究亮点:(1)将亲子鉴定技术运用在黑龙江野鲤和德国镜鲤杂交育种过程中,能够更加准确地构建家系,有效地避免近亲交配,防止种质退化;(2)对微卫星标记数与鉴定率的探讨结果表明,正反交组分别利用6和8个多态性良好的引物就能正确鉴定。