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为了全面了解犬冠状病毒(CCoV)分离毒株JS1706和JS1712基因组3'端主要结构蛋白基因和非结构蛋白基因的分子特征,本研究设计了8组引物进行RT-PCR扩增,产物经测序和拼接后,获得了约8.7 kb基因组片段,该基因组结构及其编码蛋白顺序为5'-S-3abc-E-M-N-7ab-3'。对CCoV JS1706、JS1712株8.7 kb基因组核苷酸序列与α冠状病毒属参考毒株的相同区域核苷酸序列进行比对,结果表明,2个分离株与CCoV Ⅱ型参考毒株相似性最高(83.4%~93.1%),其次为FCoV Ⅱ型参考毒株(87.1%~87.9%)、TGEV参考毒株(86.1%~86.8%)、CCoV Ⅰ型参考毒株(72.0%~72.1%)和FCoV Ⅰ型参考毒株(67.5%~69.9%)。JS1706、JS1712毒株与同属冠状病毒参考株的结构蛋白S、E、M和N蛋白氨基酸相似性分别为46.4%~95.2%、75.6%~100%、82.8%~99.2%和78.5%~99.7%。说明同属内冠状病毒的S基因变异度大,E、M、N基因相对保守。根据基因组3'端8.7 kb核苷酸序列和S蛋白氨基酸序列相似性比对结果,JS1706和JS1712毒株均与泛嗜型原型株CB/05相似性最高,分别为93.0%~93.1%、94.8%~95.2%,其他结构蛋白包括E、M和N氨基酸序列比对也发现与CB/05株的相似性较高,分别为97.6%~100%、92.4%~93.1%和97.9%。S蛋白氨基酸序列的进一步分析表明,JS1706和JS1712毒株的S蛋白N端有一些特有氨基酸,S蛋白氨基酸序列中没有明显的S1/S2蛋白酶切位点(RRARR),但在958—963位氨基酸有S2'裂解位点特征基序(KRKYRS)。基于S蛋白氨基酸序列构建的系统发育进化树分析显示,CCoV JS1706和JS1712株与CCoV Ⅱa亚型参考毒株和FCoV Ⅱ型参考毒株聚集形成一个分枝。CCoV JS1706和JS1712株非结构蛋白的编码基因ORF3abc和ORF7,其结构、大小与经典疫苗株INSAVC-1相似,无明显插入、缺失和移码突变。本研究有助于深入了解国内CCoV流行毒株的分子特性,为后续分子流行病学调查、诊断试剂和疫苗研发奠定了基础。 相似文献
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喷雾灵消毒剂实验室消毒试验 总被引:1,自引:0,他引:1
喷雾灵消毒剂实验室消毒试验甘军纪扬州大学农学院畜禽传染病实验室扬州225009消毒在家畜疫病防治中起重要作用,碘作为一种消毒剂由来已久,有机碘复合物是新一代碘消毒剂,能显著增强碘的杀菌活性,并使碘变得无毒、无刺激和无染色性,因而在养殖业中用途很广,几... 相似文献
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将马立克病病毒(MDV)Z_4毒种感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)悬液(7×10~5PFU/ml)接种到支原体培养基中作盲传培养,连传3代,未见有支原体生长。经鸡胚接种试验,细胞培养试验和血清学试验证明,Z_4毒种没有受到所试12种外源病毒的污染。利用电镜技术检查Z_4感染的CEF超薄切片,除在细胞核中见到较多典型MDV病毒粒子外,在细胞核、细胞浆及细胞间隙均未发现有支原体和其它非目的病毒粒子。 相似文献
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博莱药业是江西省民营企业的成功代表。5年前,企业从零开始,经过几年的发展如今已成为跨兽药、生物制品、畜禽良种、饲料、养鱼等行业的大型农牧企业,速度之快令业界侧目。近日,该公司的总经理唐进波先生向记者畅谈了他对企业发展过程的看法。 相似文献
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用超声波裂的鸡毒霉形体(MG)S6菌液作抗原建立了检测鸡血清和卵黄中MG抗体的血凝抑制(HI)试验,HI试验的敏感性比血清平板凝集(SPA)试验提高了2-32倍。HI中检出卵黄中SPA试验不足以检出的MG抗体。以SPF鸡血清、卵黄抗体、鸡滑液囊霉形体(MS)阳性血清作对照,证明无假阳性反应及交叉反应。 相似文献
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马立克氏病二价疫苗(Z4+Fc-126)是一种需在液氮中保存的细胞结合性疫苗.试验表明,疫苗在液氮中保存一年对效价没有影响.疫苗从液氮中取出后,用37℃温水融化对疫苗病毒的损失最小.根据疫苗在18种稀释液中的稳定性试验结果,选出一种(5%肉汤-SPG)作为疫苗的指定稀释液.用该稀释液稀释的疫苗在使用过程中,存放在冰浴上(0℃)能最好地维持疫苗的稳定性. 相似文献
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马立克氏病(MD)疫苗 Z_4和 HVT Fe-126病毒在对MD 病毒(MDV)有高度易感性的 P 系鸡、有高度抵抗力的 O 系鸡和普通非免疫鸡的鸡胚成纤维细胞(CEF)上形成的病毒蚀斑大小和数量均无显著差异.说明,CEF 对MDV 的易感性不受遗传因素的影响.MDV 血清2型 Z_4毒株和血清3型 HVT Fc_(126)株在 CEF 上的生长特性比较表明,Z_4毒株生长速度慢,蚀斑小,培养10天蚀斑大小为0.23mm~2,相当于 Fc_(126)毒株培养第4天时的水平. 相似文献