鸡新城疫病毒新乡株ND-XX10的分离与鉴定

2010年初,已免疫过新城疫疫苗的新乡市某鸡场蛋鸡出现以消化道、呼吸道出血为主要症状的疑似新城疫病例.将病料经10日龄SPF鸡胚增殖分离病毒,命名为ND-XX10.提取其病毒基因组RNA,并以此为模板,RT-PCR扩增获得F基因主要功能区(1～631 bp)片段并进行测序.结果显示,ND-XX10毒株F蛋白的裂解位点为...     

IBDV VP2蛋白P22表位多肽的原核表达及初步鉴定

为了进一步了解传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白P22多肽抗原表位的功能,根据IBDVVP2蛋白的三维结构,设计合成编码P22多肽的基因序列,通过大肠杆菌密码子优化,并将基因序列P22串联二次合成并转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株。用IPTG诱导P22基因的表达。表达纯化后的P22多肽经SDS-PAGE电泳和Western-blot分析及传染性法氏囊病毒快速检测试纸条检测。结果表明,P22表位多肽的分子质量约为16kD,并能被His单抗识别,用试纸条检测纯化的P22多肽,呈阳性反应结果。提示IBDV VP2蛋白P22多肽能与IBDV单抗特异性反应。     

新型猪瘟疫苗的研究进展

猪瘟是危害猪健康的重要传染病之一,具有急性、热性和高度接触性等特性,给世界养猪业造成了巨大的经济损失。目前,传统疫苗接种仍是预防猪瘟的主要手段,虽然传统疫苗(如C株)在防控猪瘟方面发挥着巨大的作用,但也存在一些缺陷,如无法区分野毒感染和疫苗免疫动物,猪瘟免疫失败时有发生等。因此,研制新型猪瘟疫苗具有重要意义。随着分子生物学技术与重组DNA技术的不断发展及基因工程疫苗研究的不断深入,亚单位疫苗、核酸疫苗、活载体重组疫苗、基因缺失疫苗、全长感染性cDNA标记疫苗和合成肽疫苗6种新型猪瘟疫苗被相继开发。与传统疫苗相比,新型疫苗拥有廉价、安全、高效、易于运输与保存、能区分野毒感染和疫苗免疫等优点。作者对6种新型猪瘟疫苗的研究进展作一综述,以期为猪瘟的防控提供参考。     

鸡大肠杆菌抗药性报告

随着养鸡业的发展,鸡大肠杆菌病的发生日趋严重。鸡群发病率高,而且易反复发生,致使鸡群死淘率明显升高,对养鸡业的危害极为严重。为预防和控制本病,很多鸡场和专业户采取定期投喂抗菌药物的办法,于是药物添加剂应运而生,充满兽药市场,在某一时期及范围内也许凑效,但也会带来消极影响和危害。为了能找到对大肠杆菌治疗效果好的药物,为本病的防治提供依据,作者特地对１９９６～１９９８年分离鉴定的４７株鸡大肠杆菌进行了抗药性调查,多数分离菌株对多数抗菌药物具有耐药性;多数抗菌药物的抗菌效力不佳。优选出丁胺卡那霉素、诺…     

鸡新城疫病毒Lasota株HN蛋白主要抗原表位基因在大肠杆菌中的表达

用RT-PCR法从NDV Lasota疫苗株中扩增出HN基因,将其克隆到pGEM-T easy vector中,构建了重组质粒pT-HN.设计了1对引物,用PCR法扩增出HN蛋白主要抗原表位基因(442～1 734 bp共1 239 bp),将其连接到原核表达载体pET-28a( ),构建重组质粒pET-HN.用IPTG诱导使其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.SDS-PAGE结果表明,NDV HN主要抗原表住基因在pET-HN中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子量为28 kD.同时,通过试验摸索并确定了表达HN蛋白主要抗原表位基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为0.4 mmol·L-1,诱导时间为4 h,温度为37℃.     

鸡马立克氏病毒蛋白的分离与鉴定

鸡马立克氏病是一种高度接触性、致死性、恶性肿瘤性传染病,一旦发生,损失严重。为快速诊断此病,建立了一种应用SDS-PAGE电泳和Western-blot染色分离鉴定、纯化马立克氏病毒特异性抗原蛋白的方法,并获得了与MDV抗血清特异反应的抗原蛋白。为进一步制备抗MDV特异性单克隆抗体奠定基础。     

Pb、Cd复合胁迫下美人蕉的生长及富集特征

以美人蕉幼苗为材料,通过盆栽试验研究不同含量Pb(0、100、500、1000 mg/kg)和Cd(0、1、5、10 mg/kg)单一及复合胁迫对美人蕉幼苗株高、根长和生物量等的影响,以及Pb、Cd在美人蕉地下部分和地上部分的富集和迁移,探索美人蕉对修复Pb、Cd污染土壤的潜能.结果表明:(1)低含量Pb(≤500 m...     

猪传染性萎缩性鼻炎综合防制研究报告

以生物安全体系理论为依据，对一年出栏７０００多头猪，患传染性萎缩性鼻炎的猪场进行治疗、免疫接种、加强卫生管理等综合性防制，经半年的试验，取得了十分显著的效果。使总患病率下降８６．９２％；公猪和母猪的治愈率为９０．７４％；７０日龄仔猪的平均体重提高６．２２％，料肉比下降７．１７％，成活率提高 ３．１６％；育肥猪的日增重提高 ４．３４％，料肉比下降５．６６％，成活率提高１．５６％，残次率下降７６．４８％。     

鸡油乳剂型疫苗接种部位的病理形态学观察

对7批近百只接种油乳剂型疫苗的病鸡尸体进行大体剖检,组织学检验,病源学检验,发现接种油乳剂型疫苗后10天左右,有10～30％（有时高达78．6％）鸡在注射接种局部发生病理性损伤。这些损伤有：组织坏死、瘤样增生（肉芽肿性炎症）、蜂窝织炎等。对鸡的影响有：死亡、生长发育迟滞等,同时也使肉尸卫生质量下降。提议加强油乳剂型疫苗的生产、质量监察,也提请注意研究油南残留对食用者有无危害。鸡用油乳剂型疫苗应用十分广泛,在预防传染病中起到了积极作用。但也有一些不良反应,本文报道作者近几年发现的油乳剂疫苗接种后引起的局部病理学反应。经观察这些病理反应有：严重蜂窝织炎、组织坏死、肿瘤样增生、“肿头病”等,这些不良反应带来的后果有：死亡、生长发育迟滞、肉尸卫生质量下降等,发生率在10～30％左右,竟有高达78．6％者。这种情况应引起有关人员的重视。     

鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白与幽门螺杆菌铁蛋白基因融合PCR扩增及其真核表达载体的构建

为获得高活性的鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)VP2蛋白的重组蛋白,本试验对IBDV VP2蛋白基因与能进行自我组装的幽门螺杆菌(Hp)铁蛋白基因进行融合PCR扩增,获得其融合基因。根据成熟VP2蛋白基因cDNA序列和Hp铁蛋白基因的碱基序列,设计合成2对引物,应用融合PCR技术扩增获得融合基因片段VP2-Fe。将目的基因克隆至pMD18-T载体筛选阳性重组克隆质粒,然后将目的基因亚克隆至真核表达载体pPICZaC后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选获得阳性表达质粒。结果显示,通过两轮PCR扩增出长度为1 824 bp的融合基因VP2-Fe,亚克隆至pMD18-T载体,测序结果显示,融合基因无任何碱基的突变,筛选的阳性质粒命名为pMD-VP2-Fe。双酶切回收目的基因大小为1 824 bp,亚克隆至pPICZaC,PCR和双酶切鉴定出现预期大小的片段,将获得的阳性表达质粒命名为pPICZaC-VP2-Fe。本研究为后期利用真核表达载体获得其融合重组蛋白奠定基础。