鸡热应激及糖皮质激素受体与热休克蛋白相关性的研究

应用＾３Ｈ－Ｄｅｘ放射配体结合的Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析和＾３５Ｓ－蛋氨酸体外标记法分别测定了环境温度４０℃应热应激时,鸡外周血淋巴细胞的糖皮质激素受体的最大结合容量、平均衡角离常数及其热休克白的表达。     

狐狸皮癣菌病的诊治

狐狸是一种珍贵的毛皮动物,近年来我国北部地区大量人工饲养,品种为北极狐和银黑狐。由于狐狸毛长密,温湿度适宜以及狐狸的生活习性,饲养管理等因素,时常发生狐狸皮癣菌病,严重损害毛皮生产。１９９７年１０月辽宁省辽阳县郊区养狐场发生了石膏样毛癣菌（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎｇｙｐｓｅｕｍ）引起的皮肤癣菌病,报告如下。１　发病情况及临诊症状该场共有１２４只北极狐和４３只银黑狐发生了皮肤癣菌病,患狐鼻部、眼眶、耳根、背部、尾部初期皮肤出现红斑,尔后局部附有界限清楚的白色厚痂,继而呈灰白色与毛紧密相连的痂皮,痂…     

齐帕特罗残留检测酶联免疫吸附试验方法的建立及优化

为建立检测齐帕特罗(ZIL)残留物的间接竞争酶联免疫吸附试验(ic-ELISA),以获得的抗ZIL兔多抗血清为基础,以制备的完全抗原为包被源,通过优化反应条件,建立了检测ZIL残留物的ic-ELISA检测方法。结果表明,兔血清最佳稀释比例为1∶6 000,抗原最佳包被浓度为2μg/mL,半数抑制浓度(IC₅₀)为0.317 ng/mL,线性检测范围(IC₂₀～IC₈₀)为0.136～1.181 ng/mL,最低检测限(LOD,IC₁₀)为0.081 ng/mL。经优化后,检测体系最佳pH为7.4,盐浓度≤0.4 mol/L,甲醇、乙醇、丙酮和和DMSO的含量≤5%,乙腈含量≤10%,且检测基质中牛尿液浓度≤15%时能够获得较高的检测灵敏度,并且该检测方法具有良好的稳定性和特异性,批内和批间重复试验样品添加回收率分别为101%～112%和101%～120%,变异系数均低于10%,检测结果与HPLC-MS检测结果的相关系数为R²=0.990 6。该检测方法检测速度快、灵敏度强、准确...     

新城疫病毒xx08毒株血凝素-神经氨酸酶基因主要抗原区原核表达及鉴定

利用基因工程技术构建新城疫病毒HN基因抗原表位集中区HNI175-K367基因片段(523-1101位)的重组表达质粒pET32-HNI175-K367。将该质粒转化大肠杆菌BL21(ED3),经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定表明,HNI175-K367蛋白得到高效表达,其分子量约为38kD。Western-blot分析证实,HNI175-K367蛋白与鸡新城疫病毒高免血清发生特异性反应,表明利用原核表达系统获得的重组蛋白具有良好的反应原性。     

新城疫病毒F基因真核表达载体的构建及瞬时表达

应用PCR扩增出新城疫病毒F基因,将其克隆入pGEM-T载体,测序。然后将NDVF基因与高效的真核表达载体pcDNA4/HisMax相连,构建NDVF基因重组真核表达质粒pc4F,采用Superfect转染试剂将pc4F瞬时转染COS-7细胞,应用细胞免疫组化法检测其在细胞中的表达情况。结果表明,F基因能够在COS-7细胞中成功表达。     

牛FcγRⅠ(CD64) GST融合蛋白在大肠杆菌中的表达

采用PCR技术从牛巨噬细胞cDNA文库中扩增了牛的高亲和力IgGFc受体FcγRⅠ,测序结果显示与已报道的牛FcγRⅠ序列一致。在牛FcγRⅠ成熟蛋白胞外环区两端分别合成带有BamHⅠ、XhoⅠ限制酶切位点的引物,用PCR扩增后亚克隆到GST融合蛋白表达载体pGEX - 6P- 1,转化宿主菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导,SDS -PAGE分析表达了N端带有GST的融合蛋白,Western -blotting试验表明融合蛋白在变性条件下能和牛IgG结合。GST -FcγRⅠ融合蛋白的成功表达为研究牛IgG和受体的相互作用机制及其介导的免疫反应打下了基础。     

新乡市某猪场猪瘟病毒的鉴别检测

新乡市某猪场发生疑似猪瘟病例,为了鉴别其为疫苗毒还是野毒,采用细胞免疫化学方法和RT-PCR,并对其NS5B基因进行序列测定,序列比对并构建进化树,结果表明,猪只为猪瘟野毒感染,且分离的猪瘟病毒与石门(Shimen)株在基因序列上未发生大的变异。     

非典型猪瘟的免疫酶组织化学方法诊断

2006年4月中旬,河南新乡辉县某养猪厂47头2月龄以下的猪陆续发病,到5月上旬死亡22头。发病猪的主要症状为发热,体温40.5~41.5℃,稽留不退,食欲下降,精神沉郁,弓背卧地,挤在一起。有的病猪呼吸困难,步态不稳。许多病猪表现顽固性腹泻,粪便颜色为黄白色至黄褐色,腹下及耳部皮肤有     

鸡新城疫病毒新乡株ND-XX10的分离与鉴定

2010年初,已免疫过新城疫疫苗的新乡市某鸡场蛋鸡出现以消化道、呼吸道出血为主要症状的疑似新城疫病例.将病料经10日龄SPF鸡胚增殖分离病毒,命名为ND-XX10.提取其病毒基因组RNA,并以此为模板,RT-PCR扩增获得F基因主要功能区(1～631 bp)片段并进行测序.结果显示,ND-XX10毒株F蛋白的裂解位点为...     

氯霉素残留检测阻断ELISA试剂盒的研制及性能测定

在建立氯霉素单克隆抗体（CAP mAb）杂交瘤细胞株和阻断ELISA方法的基础上．研制出CAP残留快速检测试剂盒（CAP-kit），并对其性能进行了测定。结果表明，CAP-kit的标准曲线呈典型的S型，符合4参数logit曲线拟合，相关系数R^2=0．9953，检测范围为1．0μg/L～128．0μg/L，灵敏度为0．85μg／L，半数抑制浓度（IC50）为7．54μg/L，检测限为1．0μg/L；牛奶样、猪肉样的平均添加回收率为88．3％、82．5％，平均批内和批间变异系数均〈15％；CAP-kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应（CR％）为150％，与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应；试剂盒在4℃可保存6个月。