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克伦特罗和莱克多巴胺多残留胶体金免疫层析试纸条的研制 总被引:3,自引:0,他引:3
本试验旨在研制同时检测克伦特罗(CL)和莱克多巴胺(RAC)的多残留胶体金免疫层析试纸条(Multistrip).用细胞融合技术筛选CL和RAC杂交瘤细胞株,制备单克隆抗体,金标抗体竞争性膜层析技术研制Multistrip.该试纸条由样品垫、偶联垫、双检测线和质控线标记的NC膜、吸收垫等几部分构成,其中偶联垫上灌注有CL和RAC两种金标单克隆抗体,双检测线由检测抗原CL-OVA和RAC-BSA喷膜构成,间距2 mm.结果表明:多残留试纸条的CL和RAC目测检测限分别为1和2 ng·mL-1,检测时间5~8 min.基质呈阳性的真实样品用单残留试纸条、ELISA和GC-MS检测,结果一致,无假阳性或假阴性案例.该试纸条具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于现场检测和筛选. 相似文献
143.
杂交肉牛不同精料水平育肥效果研究 总被引:2,自引:0,他引:2
选择西杂牛(西门塔尔与本地牛的杂交后代)40头,分为4组,分别饲喂精粗比例为35:65,45:55,55:45。65:35的4种饲粮。经过90d的育肥,结果表明:以55%精料组的增重最快,平均日增重为1.05kg。育肥结束时进行屠宰试验,产肉性能以65%精料组最好,但饲粮精料水平的不同并没有显著影响肉牛的屠宰性能及牛肉品质。 相似文献
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新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的全球传播引发人们对动物冠状病毒的高度关注.猪肠道冠状病毒(swine en-teric coronavirus,SECoV)是一类能够引起猪腹泻、呕吐等症状的猪肠道病原体.本文就猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪德尔塔冠状病毒和猪急性腹泻综合症病毒四种SECoV检测技术的研究... 相似文献
146.
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氟喹诺酮类药物多残留酶联免疫检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
【目的】氟喹诺酮类药物(FQs)在畜牧业中广泛用于预防和治疗细菌性疾病,不合理使用导致在动物性食品中残留,严重危害消费者健康,其检测受到世界各国重视。制备抗多种FQs单克隆抗体(mAbs),建立间接竞争ELISA(icELISA)检测方法,为动物性食品中FQs多残留检测奠定基础。【方法】环丙沙星(CPFX)羧基上引入氨基丁酸后为半抗原(CPFX-A),质谱鉴定;分别用碳二亚胺法(DDC)和混合酸干法将半抗原与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成免疫原(CPFX-A-BSA)和包被原(CPFX-A-OVA),紫外和红外光谱鉴定是否偶联成功;CPFX-A-BSA 免疫Balb/c小鼠,间接ELISA和icELISA方法测定多抗血清效价和敏感性,选取抗血清效价高和敏感性好的鼠用于细胞融合;NS0细胞和脾细胞按1﹕5比例在PEG-1500作用下融合,筛选抗FQs杂交瘤细胞株,并进行效价、亚型、敏感性和交叉反应率鉴定;体内诱生腹水法制备mAb,液体石蜡作为诱导剂,每只鼠注射108个杂交瘤细胞;选敏感性和广谱特异性好的腹水mAb,建立icELISA标准曲线,对icELISA检测方法优化,在鸡肉中添加10种FQs进行测定,将测定结果与HPLC法比较,用SPSS 17.0软件进行显著差异性分析。【结果】半抗原改造和人工抗原合成成功;3只鼠血清效价均达到1﹕1.28×104以上,2号鼠血清效价最高(1﹕2.56×104),且IC50值最低(12.92 ng·mL-1),选择2号鼠作为细胞融合用鼠;4次亚克隆筛选并鉴定后获得3株敏感广谱特异的杂交瘤细胞,分别命名为2H5、3D11、4F4,细胞上清效价分别为1﹕1 600、1﹕1 600和1﹕800,腹水效价分别为1﹕1.6×106、1﹕8.2×105和1﹕8.2×105;icELISA方法的包被原浓度为1 μg·mL-1,5%猪阴性血清4℃包被过夜,单抗1﹕40 000稀释,山羊抗鼠酶标二抗(GaMIgG-HRP) 1﹕8 000稀释;反应温度均为37℃,标准品与单抗同时加入反应15 min,洗板后加二抗反应25 min;显色10 min,2H5细胞株腹水敏感性和广谱特异性最好,2H5的线性回归方程为y=-28.022x+56.219,R2=0.9 782,对10种FQs的IC50值分别为环丙沙星(CPFX)1.67 ng·mL-1、诺氟沙星(NOR)1.82 ng·mL-1、培氟沙星(PEF)1.97 ng·mL-1、恩诺沙星(ENR)1.54 ng·mL-1、单诺沙星(DAN)2.79 ng·mL-1、洛美沙星(LOM)3.38 ng·mL-1、氧氟沙星(OFL)5.50 ng·mL-1、麻保沙星(MAR)4.40 ng·mL-1、沙拉沙星(SAR)11.76 ng·mL-1、二氟沙星(DIF)13.60 ng·mL-1,与10种FQs的交叉反应率为12.3%-108.4%,与非FQs交叉反应率均低于0.01%,对10种FQs的检测限(LODs)为0.09 ng·mL-1-0.64 ng·mL-1。icELISA法鸡肉中10种FQs的回收率为80.5%-91.8%,HPLC法的回收率为85.1%-95.7%,二者变异系数均低于10.0%;两种检测方法差异不显著(P>0.05)。【结论】该试验获得了高效价、敏感、广谱特异性的mAbs,建立的icELISA方法可用于同时检测鸡肉中10种FQs。 相似文献
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为了研究等比例的鱼粉、膨化血粉和普通血粉对生长鹅日粮营养物质表观代谢率及血清生化指标的影响,选择了300只28日龄、体重(1 142.68±50.64)g的豁眼鹅,随机分为3组,每组设5个重复,每个重复20只鹅,进行为期28 d的饲养试验。结果表明:各饲粮营养物质表观代谢率及血清生化指标的高低顺序为鱼粉组>膨化血粉组>血粉组,在鱼粉组和膨化血粉组间差异不显著(P>0.05);鱼粉组和膨化血粉的NDF、ADF、CP、E的表观代谢率,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、白蛋白(ALB)含量均显著高于血粉组(P<0.05);总蛋白(TP)含量,鱼粉组显著高于血粉组(P<0.05),而膨化血粉组和血粉组间差异不显著(P>0.05)。综合各项指标,本试验条件下,可用3.0%膨化血粉替代相同水平的鱼粉用于豁眼生长鹅的日粮中。 相似文献