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利用试剂盒快速检测苹果锈果类病毒的研究 总被引:3,自引:1,他引:2
为简化苹果锈果类病毒(Apple skin scar viroid, ASSVd)的常规RT-PCR检测步骤,找到更为快速准确的检测方法,本研究以感染ASSVd的田间苹果枝条为试验材料,根据基因库中ASSVd的基因序列设计合成特异性引物,选用国产试剂盒,对RT-PCR体系进行优化。结果表明,总RNA和反转录产物的用量分别为37.4~74.8 ng、1.0~3.0 μL,退火温度为63.8℃,可以获得良好的两步RT-PCR扩增;而总RNA用量为3.74~7.48 ng、退火温度在50.1~62.6℃范围内时,一步RT-PCR的扩增效果较好。采用优化的RT-PCR检测体系对山东采集的样品进行检测,2种检测体系的检测结果完全一致。本研究建立的两步和一步RT-PCR优化体系为ASSVd的批量快速检测奠定了基础。 相似文献
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以当年春季单芽腹接‘天红2号’富士矮化中间砧苹果苗为试材,对6-BA处理后幼苗腋芽萌发生长和萌发过程中内源激素含量的变化和平衡关系进行了研究。结果表明:喷施300 mg · L-1 6-BA水溶液后,前期单芽质量增长缓慢,4 d后快速增长,5 d时腋芽明显膨大,7 d时萌发,9 ~ 10 d长约1 cm,在处理时苗木顶端以下5 ~ 45 cm平均萌发15个腋芽,萌发株率高达100%。6-BA处理后腋芽内IAA含量初期(大约2 d)明显降低,随后开始缓慢升高,ZRs和GAs含量迅速升高,6 ~ 8 d后二者均开始降低;枝皮内IAA含量显著持续降低,ZRs含量略有降低,6 d后二者均开始缓慢升高,GAs含量变化趋势相反,先升后降;腋芽和枝皮内ABA含量均降低。6-BA处理后打破了顶端优势,枝皮内IAA降低有利于腋芽内IAA向主茎输出,同期调动枝皮中ZRs向腋芽运输,腋芽内ZRs升高,腋芽激活萌发,芽内开始合成大量IAA。随着6-BA作用减弱,4种内源激素含量变化曲线大都在6 ~ 8 d开始回落,同时腋芽萌发,内源激素又开始达到新的平衡。 相似文献
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制药工程是一个多学科交叉、实践性很强的新兴专业.为全面提高河北农业大学制药工程专业学生的培养质量,提出以社会需求为导向,改变制药工程专业单一的、验证为主的传统实验形式,构建制药工程专业综合性实验,培养符合时代要求的复合型制药工程专业人才,满足当前社会需求. 相似文献
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以苹果砧木SH40[(Malus × domestica)× M. honanensis]为试材,采用RT-PCR 结合RACE
技术从SH40 茎尖中克隆得到一个赤霉素合成关键酶基因(GA20–氧化酶基因),命名为MdGA20ox1,
其cDNA 全长1 579 bp,编码392 个氨基酸。该基因在GenBank 登录号为KC493633。氨基酸序列同源性
分析表明:MdGA20ox1 与玉米、拟南芥、梨等植物GA20ox 具有55.9% ~ 96.7%的相似性。洋葱表皮细
胞瞬时表达显示,MdGA20ox1 蛋白定位于细胞核与细胞质膜。植株生长量测定和相对定量表达结果表明,
MdGA20ox1 基因在砧木SH28、SH40 和M26 自根苗的表达呈先下降再上升然后下降的趋势,这与其生长
动态基本一致。嘎啦/SH28 的植株生长量和MdGA20ox1 表达量最高,嘎啦/M26 次之,嘎啦/SH40 最低,
初步表明该基因的表达有与苹果植株矮化程度呈负相关的趋势。MdGA20ox1 在嘎啦/SH40 和嘎啦/SH28
不同组织中的表达模式一致,且半矮化类型砧木SH28 嫁接‘嘎啦’,其茎尖、幼叶、成熟叶和枝皮中的
表达量均高于矮化类型SH40 嫁接‘嘎啦’。 相似文献
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红富士苹果叶片不定芽再生中激素、多胺和NO含量的变化 总被引:3,自引:0,他引:3
以红富士苹果继代试管苗叶片为试材,对光、暗培养条件下叶片不定芽再生过程中内源激素、内源多胺及NO含量变化进行了测定。研究结果表明:暗培养下内源ZR和ABA及内源多胺的水平显著高于光培养。叶片接种初期诱导细胞启动分化时ZR、IAA和ABA含量较高,细胞旺盛分裂期及芽原基形成期ZR和ABA含量较高而IAA含量较低。与光培养相比,暗培养下ZR/IAA和ABA/IAA均较高。在叶片接种初期(0~7d)内源腐胺(Put)、精胺(Spm)、亚精胺(Spd)以及内源多胺总量均达到峰值,并且在不定芽分化时期内源多胺含量始终维持在较高水平。与光培养相比,暗培养叶片的NO含量较高。红富士苹果叶片不定芽再生与其内源激素、多胺和NO含量密切相关。 相似文献
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应用正交试验研究菌龄、酶浓度、酶解时间和渗透压稳定剂种类对肠道肠球菌(Enterococcus hirae)AUH-HM195原生质体制备与再生的影响。结果表明:菌龄与酶浓度的交互作用对原生质体的制备和再生影响最大。最优组合为:菌龄6 h,溶菌酶浓度5 mg/mL,酶解时间1 h,渗透压稳定剂在制备时使用0.7 mol/L KCl,再生时使用17%蔗糖,制备率为93.2%,再生率为14.5%。 相似文献
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‘长富2号’红富士苹果离体叶片高效再生不定芽技术研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以‘长富2号’(Nagafu No.2)红富士苹果试管苗为试材,研究了BA和TDZ组合、不同浓度的TDZ、糖的种类和不同暗培养时间对红富士苹果离体叶片再生不定芽的影响。结果表明:高浓度的TDZ可以有效提高红富士苹果离体叶片再生效率;最适宜叶片再生的糖类为蔗糖,最适宜的暗培养时间为3周,最佳的叶片再生培养基为MS+TDZ 6.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖35 g/L+琼脂6.2 g/L。在上述培养条件下,‘长富2号’红富士苹果离体叶片再生率达到100%,平均叶片再生芽数达到10.6个。 相似文献