阿尔巴斯绒山羊iPSCs诱导及培养体系的优化

阿尔巴斯绒山羊多潜能干细胞(giPSCs)在遗传育种方面有重要的应用价值,然而目前还没有完善的giPSCs诱导及培养体系。为了获得稳定的giPSCs诱导及培养体系,根据培养基中添加的血清和小分子化合物的不同,构建了5组不同的培养基体系,分别观察了giPSCs在不同培养基中的生长状态、增殖能力以及重编程效率,并检测了不同组giPSCs的多潜能性,最后分析了不同小分子化合物的组合对giPSCs重编程效率和干细胞标记基因表达的影响。结果发现,血清的添加更适合giPSCs的诱导培养,小分子化合物Vc、VPA和LiCL能有效促进giPSCs的生成和自我更新。这为完善而稳定的绒山羊i PSCs诱导培养体系的建立奠定了基础,并且为阿尔巴斯绒山羊胚胎干细胞的建系提供了试验平台。     

水分胁迫条件下“洛旱2号”小麦根系的基因表达谱

为探讨小麦水分胁迫反应的分子调控机制,以抗旱小麦品种“洛旱2号”根系为材料,采用Affymetrix小麦基因芯片比较了20% PEG6000溶液处理后根系及对照的基因表达谱。结果表明,洛旱2号根系中受水分胁迫诱导而上调和下调表达的基因分别有3 743个(4 074个探针组)和4 573个(5 043个探针组),下调表达的基因远远多于上调表达的基因,其中上调2倍以上的1 593个(1 716个探针组),下调2倍以上的2 238个(2 451个探针组)。通过Affymetrix 的NetAffx Analysis Center查询和NCBI的BLASTX分析,差异表达2倍以上的基因中有619个已注释了功能,利用MIPS数据库将注释基因分为10类,包括生物代谢、逆境胁迫反应、细胞组分生成、蛋白合成、细胞信号交流、细胞运输、转录相关、细胞分裂和蛋白质加工等。差异表达16倍以上的基因中有32个已注释了功能,其中与逆境胁迫反应相关的基因16个,与生物代谢相关的基因5个。利用实时定量RT-PCR对8个代表性候选基因在水分胁迫条件下的差异表达特性分析表明,其结果和芯片杂交分析的结果基本一致。     

肉豆蔻精油对番茄采后病原真菌的抗菌活性研究

研究了熏蒸处理和培养基直接接触条件下肉豆蔻精油对番茄采后4种病原真菌菌丝生长的抑制活性。结果表明,肉豆蔻精油对番茄采后4种病原真菌菌丝的生长均有抑制作用,其中对灰葡萄孢霉（Botrytis cinerea）和粉红单端孢霉（Trichothecium roseum）的抑制作用较强,在熏蒸条件下的EC50分别为37．79μL·L^-1和32．95μL·L^-1,对串珠镰刀菌（Fusarium verticillioides）和细极链格孢（Alternaria tenuissima）抑制作用相对较弱,熏蒸条件下的EC50分别为43．57μL·L^-1和54．47μL·L^-1。培养基接触条件下的EC50值大大高于精油熏蒸处理,对灰葡萄孢霉和粉红单端孢霉的EC50分别为315．12μL·L^-1和299．56μL·L^-1,约为熏蒸条件下的10倍。     

一种低水分固态发酵玉米粉工艺研究

为研究固态发酵对玉米中碳水化合物的影响,本试验以可溶性糖含量和总酸为指标对发酵产物的营养价值进行了全面评价。最终确定最佳发酵条件为:枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、屎肠球菌的接种量分别为5%、7%、9%,料水比为1:0.55,每克玉米粉中高温淀粉酶的添加量为10 U,发酵时间为72 h,发酵温度为35℃。玉米发酵后的可溶性糖含量由11.5%提高到60%以上,总酸由0.6%提高到1.5%。     

高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中恩诺沙星、环丙沙星和诺氟沙星

建立饲料中恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定方法。试样用磷酸盐缓冲溶液提取,经固相萃取小柱净化,氮气吹干后用溶解待测。采用LC-MS/MS测定,色谱柱为C8反相色谱柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液,电喷雾正离子模式电离,多反应选择离子检测(MRM),外标法定量。结果表明方法可用于饲料中恩诺沙星、环丙沙星和诺氟沙星的同时测定。。     

金黄色葡萄球菌诱导牛原代乳腺上皮细胞的凋亡

【目的】观察金黄色葡萄球菌能否诱导牛原代乳腺上皮细胞发生凋亡。【方法】先以新鲜牛奶为材料分离培养牛乳腺上皮细胞并鉴定,然后用金黄色葡萄球菌侵染牛乳腺上皮细胞,采用普通光镜和扫描电子显微镜观察金黄色葡萄球菌诱导牛乳腺上皮细胞凋亡的形态学变化;用流式细胞仪（Annexin V/PI双染法）定量检测金黄色葡萄球菌感染对牛乳腺上皮细胞凋亡的诱导作用;RT-PCR检测细胞凋亡通路中关键蛋白caspase 3和caspase 8的变化情况。【结果】从乳汁中分离的细胞经原代培养后,细胞呈典型的铺路石状,细胞表层可产生大小不等的乳滴,RT-PCR法扩增出乳腺上皮细胞的骨架蛋白8特异性条带;免疫荧光细胞染色法结果显示分离培养的牛乳腺上皮细胞表达角蛋白8;金黄色葡萄球菌感染牛乳腺上皮细胞3 h后,可诱导牛乳腺上皮细胞发生凋亡,表现为细胞核皱缩,染色质边缘化和细胞浆内空泡增多等典型凋亡特征;Annexin V/PI双染法检测后发现,与对照组相比,感染组细胞凋亡率明显升高,差异极显著（P﹤0.01）;与对照组相比,感染组细胞caspase3及caspase 8表达量明显增高。【结论】金黄色葡萄球菌可以诱导牛原代乳腺上皮细胞凋亡,具有细胞凋亡的典型形态特征和生化特性,凋亡通路可能涉及caspase 3和caspase 8参与的外源性凋亡途径。     

污染场地修复工程设计的主要原则

我国污染场地修复技术的应用尚处于起步阶段,选用合理的修复技术是决定场地修复成败的关键。修复方案应根据场地的自然特点、污染特征和修复目标等因素选择修复技术和开展工程设计。探讨了污染场地修复工程设计中应遵循的主要原则。     

益生菌、寡糖和黄连素对仔猪生产性能的影响

选择60日龄三元杂交（杜×长×皮）健康仔猪90头,按照体质量和性别均分为9个处理组,每组10头,公母各半,正试期为60d。试验饲粮分别为：基础饲粮（第1组为对照组）,第2～9组在基础饲粮中分别添加0.10%金霉素、0.05%益生菌、0.10%益生菌、0.05%益生菌＋0.05%寡糖、0.05%益生菌＋0.10%寡糖、0.10%益生菌＋0.05%寡糖、0.10%益生菌＋0.10%寡糖、0.05%益生菌＋0.05%寡糖＋0.02%黄连素。结果表明：与对照组相比,第2,7,9组平均日增重分别提高了6.45%,6.45%,3.23%（P〉0.05）,料肉比分别降低8.27%,9.71%,8.63%,表明益生菌与寡糖和黄连素组合可完全替代抗生素来促进仔猪生长;第6,9组腹泻率分别降低了80.5%和66.7%,说明黄连素在抑制仔猪腹泻方面具有一定的作用;第2,4,8组营养物质消化率得到了显著提高（P〈0.05）,其他处理组有提高的趋势,但差异不显著（P〉0.05）;第9组能显著地增加粪便中乳酸菌数量和减少大肠杆菌数量（P〈0.05）,其他各处理组乳酸菌数量也有一定提高。     

云南新平县干热河谷地区农户生计与农地利用——以新平县为例

基于参与式农村评估法和数理统计方法,对新平县元江干热河谷地区4类农户的生计多样化、生计策略和农地利用模式进行分析,研究结果表明:①随着农户由纯农型向非农型转化,农业生计多样化指数逐渐下降,非农化多样化指数逐渐增加.就生计活动而言,纯农户全部从事农业生计活动,非农户除少量种植外,基本上从事非农生计活动.农兼户和兼农户兼事两种生计活动,但农兼户以农业生计活动为主,兼农户以非农生计活动为主;②就作物种植而言,纯农户和农兼户往往选择投入较多、生长周期较短和经济收益较高的作物,而兼农户往往选择投入较少、管理较简单和生长周期较长的作物;③为了应对当前农业生产存在的问题,纯农户主要采取改变种植结构、维持和扩大种植规模、增加种植投入和转入土地等措施来促进种植业的发展;农兼户通过改变种植结构、缩小种植规模、维持种植投入、转入和收回已出租土地以及从事非农生计来克服面临的困境;兼农户则通过改变种植结构、缩小种植规模、减少生产投入、大量出租土地和从事非农活动来规避生计风险.