两株ALV-K重组病毒感染性克隆的构建及病毒拯救

【目的】为探明引起禽白血病病毒K亚型(ALV-K)两不同毒株之间致瘤性差异的原因,进一步探索ALV-K的致病机理,实现两株ALV-K重组病毒感染性克隆的构建及病毒拯救。【方法】以前期构建的ALV-K毒株HB2018003和HB2015032的感染性克隆为模板,PCR扩增分别获取两毒株单独的5'-端长末端重复序列(5'-LTR)基因片段和剩余目的基因片段。切胶回收目的片段后将两毒株的5'-LTR互换,通过同源重组的方法获得连接产物。将连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞后涂布Amp抗性平板过夜培养,挑取PCR鉴定为阳性的菌落提取重组质粒TOPO-003-032和TOPO-032-003并送检测序。将PCR和测序鉴定正确的重组质粒转染至易感细胞DF-1中盲传3代,使用群特异性抗原P27 ELISA、多重 PCR和间接免疫荧光等方法对拯救的病毒进行检测。【结果】测序和重组感染性克隆PCR鉴定的结果表明成功构建了5'-LTR互换的重组质粒,多重PCR结果显示在目的片段大小处出现ALV-K预期条带,未出现ALV-A和ALV-J条带,间接免疫荧光试验结果显示接种拯救病毒的DF-1细胞出现明显的亮绿荧光,阴性对照则没有出现荧光。综合以上结果,说明两株重组病毒拯救成功,并将其分别命名为rHB2022050(TOPO-032-003)和rHB2022051(TOPO-003-032)。【结论】本研究采用同源重组的方法构建了5'-LTR互换的感染性克隆TOPO-003-032和TOPO-032-003,并成功拯救出病毒rHB2022050(TOPO-032-003)和rHB2022051(TOPO-003-032)。     

地膜覆盖对不同砧穗组合苹果苗木生长的影响及成本分析

研究旨在探讨地膜覆盖在不同砧穗组合上的应用。以2年生苹果砧穗组合(华硕/M9-T337、瑞雪/M9-T337)为试验材料,研究不同砧穗组合苹果苗木地膜覆盖的效果。结果表明：(1)华硕/M9-T337地膜覆盖后苗木高度、粗度分别增加了14.41%、13.5%,分枝长度和分枝粗度分别提升了60.4%、22.6%,最低分枝高度上升了6.4%。(2)瑞雪/M9-T337地膜覆盖后苗木高度提升了6.9%,苗木粗度、分枝粗度和最低分枝高度均有升高,但总体生长与不覆膜相比差异不显著。(3)地膜覆盖可抑制杂草生长,降低苗木管理成本,减少费用948.5元/667m²。综合分析表明,地膜覆盖利于不同砧穗组合苗木生长,提高了苗木质量,建议苹果大苗培育过程采用地膜覆盖技术。     

基于温室内气象数据的适用于冬季日光温室番茄蒸腾量各子模型对比研究

北方寒区日光温室冬季生产基本无通风,为了探寻温室内不同边界层空气动力学阻力(r_a)与气孔平均阻力(r_c)表达式计算植株蒸腾量的差别及适用于此环境下的最优子模型模拟式,以Penman-Monteith(P-M)方程为基础,比较分析了4组适用于北方寒区冬季日光温室(基本无通风条件)的r_a、r_c子模型模拟的温室内番茄植株蒸腾量。结果表明:子模型的变化具有波动性,采用不同子模型模拟的蒸腾量值差异较大,北方寒区冬季日光温室植株蒸腾作用主要集中于白天,此时不同子模型模拟的r_a、r_c平均变化量分别为5.73%、37.10%;本试验环境下,温室仅在中午前后通风,其余时间处于密闭状态,此时,室内风速垂直流通且并不均匀,选用包含空气温度、植株叶片温度及植株生理指标(叶片特征长度、单株植株叶面积指数LAI)等参数模拟单株植株边界层空气动力学阻力值,选用的r_a模拟式在晴天、阴天平均变化范围分别为185～489、249～357 s·m~(-1),模型检验结果为:Pearson=0.826,MRE=21.69%,MAE=0.02,RMSE=18.59,EF=0.81;应用反演式模拟单株植株气孔平均阻力的准确率较高,选用的r_c反演式在晴天、阴天平均变化范围分别为253～1 356、235～1 260 s·m~(-1),模型检验结果为:Pearson=0.955,MRE=7.16%,MAE=0.01,RMSE=8.56,EF=0.95。     

宫廷金鱼健康养殖技术

2005年开始,北京市实施“名优水产新品种及健康养殖技术推广”科技入户项目,在宫廷金鱼养殖之乡——北京市朝阳区黑庄户乡推广宫廷金鱼健康养殖技术。     

黄浦江上游渔业水域鱼类组成及多样性

2007～2008年在黄浦江上游渔业水域横潦泾和斜塘分别设立1个监测点,分春、夏、秋、冬季采集鱼类样品。横潦泾共采集2 521个鱼类标本,隶属4目、8科、34属,主要优势种有麦穗鱼(Pseudorasbora parva)、鲫(Carassius auratus)、斑条鱊(Ataenianalis)等。斜塘共采集2 088个鱼类标本,隶属5目、12科、27属,主要优势种有似鳊(Pseudobrama simoni)、麦穗鱼(Pseudorasbora parva)、鲫(Carassius aura-tus)等。利用香农威纳指数(H')、物种均匀度指数(J)和物种丰富度指数(D)方法分析2个水域鱼类组成及多样性。结果表明,2个水域四季的香农威纳指数(H')和物种均匀度指数(J)均为春季秋季冬季夏季,物种丰富度指数(D)为春季秋季夏季冬季。横潦泾水域全年的物种丰富度指数(D)要明显高于斜塘。刀鲚(Coilia ectenes)、日本鳗鲡(Anguilla japonica)等的洄游活动以及溶解氧、水温等环境因素对物种多样性的季节变化起到明显的作用。浮游植物丰度的区域差异影响到植食性鱼类种类的分布,进而影响到了鱼类多样性指标的空间分布。此外,水流等环境因素以及航运等人为因素对鱼类多样性指标的空间分布也起到明显作用。     

广西三江稻渔综合种养产业现状与发展对策

稻渔综合种养在我国已有上千年的历史,是一种兼具经济效益和生态效益的生态循环农业生产模式.稻渔综合种养在广西三江地区占据相当的规模和经济地位,掌握该地区稻渔综合种养产业发展的最新数据并了解存在的问题,对广西三江地区稻渔综合种养产业发展的科学布局及规划具有重要意义.通过调查广西三江侗族自治县大树村、冲干村和汾水村三个不同自...     

小白菜和土壤中壬基酚残留降解研究

本实验建立完善了小白菜和土壤中痕量NP的检测方法-固相萃取-高效液相色谱-质谱联用,开展了模拟田间施药情况下,壬基酚在小白菜和土壤中的消解动态研究。结果表明：在1～100ng/mL浓度范围内,壬基酚浓度与其峰面积呈良好的线性关系,方法检出限可以满足壬基酚残留检测的最低要求。整个试验期间,除壬基酚水溶液处理外,其他处理NP含量最终都在0.05mg/kg左右,可能提示NP的降解具有一定的阈值。同时,壬基酚在小白菜和土壤中的残留量随着施药后的时间变化以近似负指数函数递减的规律变化,消解规律不符合一级动力学模型,其半衰期为23～100d。     

典型浓香型产区不同生态条件对烤烟化学成分和香气物质含量的影响

以烤烟品种云烟87为材料,在河南省襄城县、方城县、宝丰县、汝阳县和舞阳县研究了典型浓香型产区不同生态条件下烤烟化学成分和香气物质成分含量.结果表明:不同生态区烤烟中大多数常规化学成分如总糖、总氮、烟碱的差异不明显,而化学成分比值存在一定差异;钾含量表现为舞阳县烤烟较高(上、中、下部烟叶分别为0.90%、1.10%、1....     

基于低场核磁共振的柑橘汁胞粒化评级

为更加准确、客观、快速地评定柑橘汁胞粒化程度,改变目前主要依靠肉眼感官评级的现状。该文进行了机器打分研究,并与感官评价进行了相关分析。该研究将低场核磁成像及磁弛豫时间测试结果与柑橘汁胞含水率及汁胞粒化程度的感官分级等指标相对应,应用于柑橘汁胞粒化程度的人工智能鉴定和识别。相关分析、F检验和多重比较等数学分析表明,利用低场核磁横向弛豫时间的响应值可有效反应汁胞粒化程度。横向弛豫时间3个峰的响应值与不同汁胞粒化程度柑橘的感官评价等级及汁胞含水率、果实失重率等存在显著相关(P0.05)或极显著相关(P0.01)。经成对t检验分析,基于低场核磁建立的汁胞粒化评级模型与评价员得到感官平均评分的评价结果间没有显著差异(P=0.4982t=0.7143)。研究结果为柑橘汁胞粒化程度感官分级的理化技术替代研究提供了有益尝试。     

苗前喷施不同剂量玉米除草剂对紫花苜蓿出苗、生长及产量的影响

为明确广泛应用于玉米田中防除一年生和多年生禾本科杂草的烟嘧磺隆·莠去津除草剂对紫花苜蓿是否具有药害,将除草剂剂量设为正常、中等、低等和对照四种剂量,在播后出苗前进行喷施,探讨了不同剂量的玉米除草剂对紫花苜蓿的出苗、生长及产量的影响。结果表明：该除草剂造成出苗时间推迟8 d,低等剂量、中等剂量与正常剂量除草剂处理相对出苗率分别只有对照的13.12%,4.86%和2.93%;生长至77 d,虽然单株鲜重比对照显著增加,但由于单位面积株数为对照的13.73%,5.11%和3.30%,因此,单位面积地上干重只有对照的36.16%,11.81%和7.58%。上述结果表明,该除草剂对紫花苜蓿出苗和生长等具有显著药害。