昆虫抗菌肽基因的合成及克隆

设计并合成了昆虫抗菌肽（ｃｅｃｒｏｐｉｎ）Ｂ 基因,合成的抗菌肽Ｂ 基因全长１３２个碱基对,克隆到ＰＵＣ１９ 载体上,经过ＤＮＡ 序列分析证实,合成的基因序列与设计的序列完全一致。     

柞蚕核型多角体病毒感染离体细胞的研究

柞蚕核型多角体病毒(Antheraea Pernyi Nuclear Polyhedrosis Virus简称ApNPV)对樗蚕蛹精细胞和草地贪夜蛾Sf9细胞的感染是非同源昆虫细胞的感染。运用昆虫细胞培养、病毒感染及电子显微镜等病毒学技术研究了ApNPV在体外培养的樗蚕蛹精巢细胞中的感染情况,初步探明了ApNPV在体外培养昆虫细胞中的形态发生过程,表明它是典型的杆状病毒复制。并用该病毒以一定浓度感染草地贪夜蛾Sf9细胞,说明ApN-PV不能在Sf9细胞中复制。     

五种柞树叶营养成分分析

为研究柞树叶的营养特性,采集丹东地区的5种柞树叶进行基础营养成分测定。测得柞树叶中粗蛋白、粗脂肪、粗多糖、粗灰分、粗纤维含量分别为1.84%~5.73%、0.23%~0.42%、1.04%~3.87%、1.71%~3.67%、9.50%~18.67%,总黄酮含量为0.34%~1.27%,柞叶中矿质元素及维生素含量丰富,其中蒙古栎、尖柞、辽东栎还含有一定量的硒。5种柞树叶均有较高的营养价值,在医药食品行业有很好的应用前景。     

柞树叶提取液的体外抑菌活性试验

以不同浓度乙醇和水为提取介质,浸提柞树叶中的抑菌活性成分,获取对食源性细菌有抑制作用的柞树叶提取液。采用抑菌圈法分别检测不同提取介质获取柞树叶提取液在不同溶液p H值和不同处理温度条件下,对痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌、大肠杆菌、肠道沙门氏菌5种目标细菌的体外抑制作用,同时观察柞树叶提取液对新鲜果蔬的防腐保鲜效果。结果显示,采用不同提取介质获得的柞树叶提取液在体外对5种目标细菌的生长均有抑制作用,以75%乙醇作介质获得的提取液的抑菌效果最好(P0.05);酸性条件及热处理能在一定程度上增强柞树叶提取液的抑菌效果,p H为8时,抑菌活性稍有减弱,温度为100℃时,抑菌效果显著;柞树叶提取液可延长果蔬的储藏保鲜期。试验结果初步提示:柞树叶提取液在体外对食源性细菌的生长有较强的抑制作用,有望进一步开发为天然食品防腐剂。     

柞蚕5龄幼虫主要营养成分含量及相关酶活性测定

为研究抗大、9906、辽蚕582和辽蚕988柞蚕品种5龄幼虫不同生长期体内主要营养成分及相关酶活性变化,测定并比较了4个柞蚕品种5龄幼虫生长第2天、第7天、第14天和营茧第3天体内总蛋白、糖原、海藻糖及溶菌酶、脂肪酶、抗氧化酶(超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶)等含量及活性。结果表明,柞蚕5龄幼虫体内均含有总蛋白、糖原、海藻糖及溶菌酶、脂肪酶、抗氧化酶等生物活性物质,同一品种各生长期体内总蛋白、糖原、海藻糖及溶菌酶、脂肪酶等生物活性物质差异显著,并且4个柞蚕品种5龄幼虫体内抗氧化酶活性水平较高。研究结果为柞蚕资源进一步开发利用提供了理论依据。     

栗蚕血球细胞的初代培养

分别采用TC-100、Grace、MGM-448加20%胎牛血清和10%苯基硫尿做为细胞原代培养基,在27℃,pH6.2-6.4的条件下,对5令栗蚕(Dicty-opoea japonica )幼虫血淋巴进行体外培养,细胞贴壁较好,原代培养细胞能够长期存活.细胞形态有圆形、椭圆形和梭形,培养7d后,细胞聚集产生分化现象,每隔7d换液1次.3种培养基中细胞变化不一.Grace培养基优于其他两种.     

蛹虫草中虫草素的研究进展

虫草素是虫草中特有的活性成分,具有广泛的生物活性和显著的药理作用.就近年来蛹虫草中虫草素的理化性质、合成、提取纯化方法及药理作用等方面的研究进展进行综述.     

用cDNA末端扩增法克隆柞蚕攻击素(attacin)基因及序列分析

利用cDNA末端扩增(RLM-RACE)方法,克隆了柞蚕攻击素(attac in)基因cDNA序列(GenBank登陆号:AY960680)。柞蚕攻击素基因cDNA序列全长912 bp,其中699 bp的蛋白质编码区可编码233个氨基酸。预测蛋白质分子量为25 kD,等电点(pI)为7.54。柞蚕攻击素基因中包含2个内含子。S ignal P 3.0 Server程序分析结果显示,柞蚕攻击素第1-17位氨基酸为信号肽序列。蛋白质功能区分析预测,柞蚕攻击素在第47-112氨基酸之间为攻击素-N(attac in-N)功能区,第113-233位氨基酸之间为攻击素-C(attac in-C)功能区。以邻接法(ne igh-bor-join ing,NJ)建立了与其它昆虫攻击素的系统关系图。     

柞蚕微孢子虫体外培养技术体系的建立

建立了一套柞蚕微孢子虫株分离及体外增殖保存的技术体系。主要方法是利用柞蚕蛹精巢或卵巢组织制备原代细胞,分离、培养柞蚕微孢子虫;利用柞蚕蛹期滞育可以长期储存的特点,将柞蚕原代细胞分离、培养的柞蚕微孢子虫注射入健康柞蚕蛹体进行继代培养和长期保存;通过原代细胞分离培养、蛹体增殖和保存的交替循环体系,达到分离、增殖及保存微孢子虫株的目的。该技术体系既解决了微孢子虫来源困难,品种混杂不易分离和长期保存等问题,也为进一步探索柞蚕微孢子虫侵染、传播规律和提升柞蚕微粒子病防控效果提供了有力支持。