猪蓝耳病病毒变异株TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR鉴别诊断方法的建立

根据GenBank收录的PRRSV基因序列,设计一对引物F、R和一条TaqMan荧光探针P,建立了猪蓝耳病病毒荧光RT-PCR检测方法.该方法敏感性比常规的RT-PCR高100倍,对PRRSV细胞培养物的检测下限可以达到2个TCID50,能特异检测出蓝耳病病毒,并且可以鉴别诊断PRRSV变异株和经典株,同时根据灵敏度试验建立的标准曲线,能够对PRRSV RNA进行相对定量.     

支原体检测方法的建立及在疫苗检验中的应用

建立了"直接培养法"和"PCR法"两种支原体检测方法.两种方法互为补充,共同应用于生产检验,在为生产提供及时可靠数据的同时对产品严格把关,提高了产品质量.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GD-ZQ变异株的分离及遗传变异分析

用RT-PCR方法从某猪场病猪体内分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),命名为PRRSV GD-ZQ株,可致Marc-145细胞病变。细胞分离培育病毒至增殖性能稳定后,分别扩增分离病毒的Nsp2、ORF3、ORF5基因并测序,绘制进化树比较分析遗传进化。结果显示分离毒株的Nsp2、ORF3、ORF5基因序列与美洲型VR-2332、CH-1a等毒株核苷酸序列相似性在89.0%~95.8%之间,与欧洲毒株LV的相似性在48.2%~49.3%之间,遗传进化分析显示该毒株与CH-1a株处于同一分支,分离毒株的Nsp2序列与以HEB1为代表的PRRSV变异株相似性在98.3%~99.4%之间。该病毒在细胞盲传5代能产生稳定规律细胞病变(CPE),且第5代病毒TCID₅₀达10^-5.6／0.1 mL。进化分析结果显示GD-ZQ分离株是PRRSV变异株,具有"高热病"PRRSV毒株的变异特点,为了解PRRSV在时间上和分子水平上的遗传变异规律、变异幅度和变异范围奠定基础。     

鸭肠炎沙门氏菌分离鉴定与药敏试验

某番鸭养殖场鸭群发生一种高发病率、高死亡率的传染病 ,从病死鸭内脏分离到肠炎沙门氏菌。分离菌毒力很强。根据中、西药体外抑菌试验和中草药体内筛选试验结果 ,用此药和两个复方制剂对人工感染肠炎沙门氏菌病鸭作治疗保护试验 ;结果复方制剂 高、中、低 3个剂量组和制剂 高剂量组及氟甲砜霉素对照组对人工感染肠炎沙门氏菌病鸭均有较好的治疗作用 ,与感染对照组的自然保护率 (72 .7% )比较 ,差异极显著 (P <0 .0 1 ) ,制剂 中、低剂量组的疗效显著。试验各组之间鸭的增重差异不显著     

黄芪多糖提取方法的研究

以黄芪为原料,采用水煮法提取黄芪多糖,并用苯酚-硫酸法测定提取液中黄芪多糖的含量。结果表明:最佳的提取时间为60 min,提取温度100℃,浴比1:6,提取两次的效果较好。     

鸡附红细胞体与白色念珠茵混合感染的研究

对某鸡场送检病、死黄羽肉鸡进行实验室诊断,在血液中检测到附红细胞体,同时从病鸡的嗉囊、腺胃分离出一株白色念珠茵.通过体外培养和杀灭试验分别筛选出对附红细胞体敏感的药物磺胺间甲氧嘧啶、附红净和对白色念珠菌敏感的药物制霉菌素、氟康唑.     

巢式PCR快速鉴定鸡传染性支气管炎病毒的研究

鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）经鸡胚增殖后,直接用尿囊液提取ＲＮＡ后反转录成ｃＤＮＡ,用ＩＢＶ基因３’端的ＵＴＲ１－／ＵＴＲ２＋和ＵＴＲ３－／ＵＴＲ４＋两对引物进行巢式ＰＣＲ,所检测的４个ＩＢＶ标准参考株和１６个ＩＢＶ野毒株均得到了预期的１７４ｂｐ大小的片段,而鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）,鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）及正常鸡胚尿囊液经同样处理没有可见片段出现。本试验不需纯化册毒只需０５ｍｌ病毒尿囊液即可在２４小时内得到准确的试验结果。这表明与其它ＩＢＶ鉴定方法相比,该法具有快速、灵敏、特异的优点。     

鸭坦布苏病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

根据鸭坦布苏病毒(DTMUV)BYD-1株基因序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立了快速检测DTMUV的实时荧光定量RT-PCR方法。特异性结果显示,DTMUV显示阳性,而3株非鸭坦布苏病毒均显示阴性,说明该方法具有高度特异性。其表达式为Ct=-3.32×lg Copy number+41.151,R2=0.998,R循环效率Eff%=100.072,DNA拷贝数在101～108范围内检测曲线有良好的线性关系,对质粒标准品最低检测限为1.0×101拷贝/μL,变异系数低于5%。利用该方法分别对攻毒感染具有典型鸭新型黄病毒病临床症状和病理变化的蛋鸭的脾脏和肝脏组织进行检测,阳性率均为100%,而用本实验室建立的普通RT-PCR方法检测的阳性检测率为85%(17/20)和75%(15/20)。建立的方法具有敏感性高、特异性好、稳定性强的特点,可用DTMUV早期感染的快速诊断和流行病学调查。     

鸽I型副粘病毒病的研究进展

本文就鸽Ⅰ型副粘病毒病的国内外发生历史、流行特点、病原特性、临床症状、病理变化以及免疫防治等方面的研究进展进行了综合整理，以期对该病的深入研究和防制工作起推动作用。     

第十一届世界禽病学会大会概况及对我国禽病研究状况之比较

1会议概况第十一届世界禽病学会大会于1997年8月18－22日在匈牙利首都布达佩斯胜利召开。会议主办单位是世界食病学会匈牙利分会和匈牙利科学院兽医研究所。注册到会人数超过700人,参加国家52个,主要有中国、英国、美国、德国、荷兰、意大利、波兰、俄罗斯、匈牙利等。大会分有Ic个专题,每个专题有一个以上的北分钟的专题发言,共有口头报告151篇,墙报214篇。我国有近70人参加,为除匈牙利本土之外的参加人数最多的一个国家,大会安排中国学者口头发言6人,墙报17篇,其中扬州大学农学院崔治中教授的“表达MDV38KD磷酸化蛋白一I。88…