武威市凉州区绵羊寄生虫感染调查

为掌握武威市凉州区绵羊寄生虫感染情况,选择具有代表性的山区、干旱草原地区、沙漠和半沙漠地区的3个乡镇,进行绵羊蠕虫学全身剖检调查。对所获全部寄生虫进行分类鉴定,共检出22种寄生虫,隶属于3门、4纲、5目、11科、21属,其中包括吸虫2种,绦虫6种,线虫12种,蜘蛛昆虫2种。本次调查基本摸清了当地绵羊寄生虫种类、分布状况、危害程度,为开展寄生虫病防治工作提供了科学依据。     

肠道出血综合征研究进展

肠道出血综合征(HBS)是近年来发现的反刍动物的肠道疾病,其原因不甚明了。而从俄勒冈大学的实验中意外地发现,在HBS患病奶牛和对照奶牛的饲料、胃肠内容物、胃肠壁、淋巴结和血液等病料中都检测到烟曲霉菌和梭菌,怀疑这两种微生物可能是HBS的致病病原。经进一步研究表明,在HBS病牛和对照奶牛中都检测到梭菌毒素基因,而烟曲霉菌只在患病奶牛中检测到,对照牛则呈阴性。由此可见,烟曲霉菌与HBS之间具有密切的联系,烟曲霉菌很可能就是HBS的一个重要的病原学因素。目前,已有一种称为OmniGen-AF的产品可有效预防HBS的发生。     

RT-PCR检测犬粪便中的冠状病毒

根据犬冠状病毒(caninecoronavirus, CCV) 的S基因序列, 用计算机设计并合成了1对引物P1、P2, 以此引物及以从美国进口的CCV疫苗的反转录产物为模板, 初步建立了检测CCV的RT PCR。将纯化的PCR产物成功地克隆到pGEM T easy载体中, 鉴定、测序并进行同源性分析。结果表明, 与1 71和UCD 1株同源性分别为91 5%和94 3%。该RT PCR能对疫苗中CCV及CCV参考株USCV B1的S基因进行特异性地扩增,长度为575bp, 对犬的其他病毒及CRFK细胞未能扩增出任何片段, 该RT PCR能检测出0 5μLCCV培养液/2g粪便。用建立的RT PCR在上海对50条犬粪便进行检测, 结果表明CCV阳性6例。本研究建立了检测犬粪便中的CCV的RT PCR, 能用于犬冠状病毒流行病学调查。     

四碘甲状腺原氨酸单克隆抗体的制备

采用碳二亚胺(EDC)法合成游离3,3',5,5'-四碘甲状腺原氨酸(FT4)的完全抗原FT4-BSA和FT4-OVA,将FT4-BSA作为免疫原,免疫BALB/c雌鼠,以FT4-OVA为包被原,利用ELISA方法确定抗FT4多克隆抗体的效价和敏感性。通过杂交瘤技术筛选出分泌抗T4单克隆抗体(T4 McAb)的杂交瘤细胞株,制备腹水单抗。经检测,腹水单抗效价是1∶9.0×104,以此建立的间接竞争ELISA方法,半数抑制质量浓度(IC50)是24.7 ng/mL;FT4单抗与游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)的交叉反应率是4.2%,与促甲状腺激素(TSH)无交叉反应;经抗体类型鉴定,获得的单抗重链属于IgG1亚类,轻链属于κ型。结果表明:本试验制备的单抗特异性强、敏感性高,能够为T4免疫学检测方法的建立和相关研究奠定良好基础。     

黑白花奶牛球虫和蛔虫混合感染的诊疗

2001年4月初上海地区某黑白花奶牛场1月龄左右犊牛爆发了初以水样腹泻、后期伴有便血为特征的出血性肠炎,经实验室检查,确诊为球虫和蛔虫混合感染。采取相应防制措施后,控制病情。1　发病情况　2001年4月初,该场50%哺乳犊牛发生以水样拉稀、青便、青便混血为主要特征的疾病,发病牛以14～50日龄为主,就诊时已有7头死亡。部分成年牛也有零星的轻微拉稀。发病后经庆大霉素、疾特灵、收敛药等治疗无效。2　临床表现　病初犊牛拉稀,粪便呈水样,随着病程的延长,排便次数增多,便中血量增多,颜色变青直至变黑,粪便中伴有血块和肠粘膜碎片,病牛精…     

畜禽免疫增强剂的开发应用

目前畜禽疾病的防制主要依靠疫苗和药物。我国的畜禽饲料中添加多种抗菌药、驱虫药、激素和促生长的药物或制剂 ,这些药物和制剂均可导致在畜禽产品中的残留 ,这些残留物大多对人体的健康造成危害。所以 ,畜牧产品的安全性必须提高到应有的重视程度。寻找一种替代物 ,使之无药物残留和不污染环境 ,成了现代畜牧业的当务之急。畜禽免疫增强剂应是一种天然物质 ,适合生物体内降解 ,无毒无免疫原性 ,可增强循环抗体的滴度或抗体形成细胞产生 ,并可增强体内细胞免疫的诱生 ,从而提高畜禽整体的免疫力。它的应用可以减少因各种药物所造成的药物残…     

北京地区秋季两个好蜜粉源

一、益母草益母草是野生草本植物。生长于林荫、路旁、田边、山坡 ,近年发展造林 ,又为益母草扩大生长面积。益母草第一年种子发芽出土 ,只匍伏生长 ,不起茎、不开花 ;第二年春季返青 ,夏季起身拔节 ,初秋开花流蜜。在北京地区一般多在 8月 2 0日前后始花 ,至 9月中旬结束 ,花期 2 0多天。蜜粉丰富 ,蜂群采集积极 ,若雨水调和 ,壮群可取蜜 1 0～ 2 0公斤。益母草蜜味清香 ,水白色 ,对妇女有调经养血作用 ,是特种蜜之佳品。益母草茎叶可入中草药 ,有利尿降压、安神镇静功效。益母草性喜潮湿、土地肥沃、茎高多在 1至 2米以上。若花期温湿度适…     

副溶血弧菌主要毒力因子三重荧光定量PCR检测方法的建立与应用

为建立快捷、准确、高效检测副溶血弧菌的方法,以副溶血弧菌种属特异性基因toxR和毒力因子tdh、trh基因序列,分别设计3对特异性引物及相应TaqMan探针,并在toxR、tdh和trh基因的3个探针的5'端分别标记FAM、HEX、CY5荧光报告基团,3'端标记BHQ1淬灭荧光基团,通过优化反应体系和反应参数,确定最佳反应体系,建立一种基于Taq Man探针定量检测副溶血弧菌的三重荧光定量PCR方法。结果:本试验所建立三重荧光定量PCR方法与其他菌株无交叉反应,其最低检出限达到了10 CFU/m L,重复性试验中每组变异系数均小于1%;检测人工染菌的虾肉和贝类样品时,最低检出限亦达到10 CFU/m L,且整个检测扩增时间大约为1 h。结果表明,本研究建立的三重荧光PCR检测方法,特异性强、敏感性高、重复性好且耗时短,是高通量检测致病性副溶血弧菌的有效手段。     

家禽饲料中玉米赤霉烯酮化学发光酶联免疫分析方法的建立

为了建立比较间接竞争化学发光酶联免疫分析法(ic-CLEIA)与直接竞争化学发光酶联免疫分析法(dc-CLEIA)检测家禽饲料中玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的方法,采用二因子交叉试验优化确定最佳包被原浓度和抗体稀释度,建立ic-CLEIA和dc-CLEIA。结果显示:icCLEIA在0.05~5 ng/m L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=-0.383 5x+0.417 9(R2=0.994 6),灵敏度(IC50)为0.611 ng/m L,检出限(LOD)为15 pg/m L,平均批内和批间变异系数为1.79%和1.02%,家禽饲料添加样品回收率为91.9%~112.1%,变异系数小于10.5%;dcCLEIA在0.025~5 ng/m L范围内线性关系良好,线性回归方程为y=-0.386 5x+0.334 1(R2=0.991 8),灵敏度(IC50)为0.372 ng/m L,检出限(LOD)为3 pg/m L,平均批内和批间变异系数为1.16%和1.20%,添加样品回收率为87.3%~119.3%,变异系数小于9.8%。结果表明:两种方法精确,灵敏度高,均可作为定量检测ZEN的有效手段;与ic-CLEIA相比,dc-CLEIA更适用于检测家禽饲料中的ZEN。     

呋喃它酮代谢物人工抗原及多克隆抗体的制备

本文利用对醛基苯甲酸(CPA)与呋喃它酮代谢物(AMOZ)进行衍生化,得到衍生物CPAMOZ,并通过质谱法对其结构进行确证。然后采用混合酸酐法将CPAMOZ与载体蛋白偶联,采用紫外扫描(UV)法对偶联物进行验证。用偶联成功的人工全抗原(CPAMOZ-BSA)免疫BALB/c小鼠,间接ELISA测定小鼠血清抗体效价为1∶8×104,对NPAMOZ的半数抑制量为26.55μg/L,间接竞争ELISA鉴定小鼠血清多克隆抗体,与NPAMOZ、CPAMOZ的交叉反应率分别为100%、44.8%,与AMOZ、对醛基苯甲酸、对硝基苯甲醛以及同类其他三种药物呋喃妥因、呋喃西林、呋喃唑酮等原药及其代谢物以及代谢物衍生物的交叉反应均小于0.01%。结果表明,制备的AMOZ多克隆抗体效价高、特异性强,灵敏度高,为进一步制备AMOZ单克隆抗体和研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。