IHH过表达对鸡原代软骨细胞增殖和分化的影响

为探究印度刺猬因子(IHH)基因对鸡原代软骨细胞增殖和分化的调控作用，本研究根据IHH基因序列信息，构建真核过表达载体(OV-IHH);采用双酶切和测序进行鉴定，并将其转染鸡原代软骨细胞；采用CCK-8法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡，对软骨细胞进行成骨诱导分化至21 d,采用ALP试剂盒检测细胞ALP活性。结果表明，IHH真核过表达载体构建成功，与对照组和空载体组(OV-NC)相比，过表达组IHH基因的mRNA表达显著增加(P<0.01),过表达效率扩大2 700倍左右。过表达IHH促进细胞周期从G1期到S期的转换，从而促进增殖，抑制细胞凋亡，且ALP活性升高，促进细胞分化。综上，IHH基因显著影响鸡软骨细胞的生长发育，研究结果为进一步解析IHH基因调控鸡匍匐性状的作用机制提供理论依据。     

茶叶和土壤中cis-联苯菊酯、高效氯氟氰菊酯手性对映体残留分析

为了满足茶叶和土壤中手性农药cis-联苯菊酯和高效氯氟氰菊酯对映异构体残留检测的需要，本试验首次对比研究了正相液相色谱条件下，Daicel ChiralPak^?AS-H、Phenomenex^?Cellulose-1和Cellulose-3柱对两组手性对映体的拆分效果，以及气相色谱条件下BGB-172柱的分离测定效果，并建立了基于手性气相色谱分离的茶叶和土壤中cis-联苯菊酯和高效氯氟氰菊酯对映体残留分析方法。样品采用正己烷和丙酮提取，Florisil与GCB混合柱净化，气相色谱手性柱BGB-172程序升温分离，电子捕获检测器(ECD)外标法定性定量测定。结果表明，在2.5～800μg·L^-1浓度范围内，cis-联苯菊酯对映体色谱峰面积(Y)与浓度(x)之间分别满足线性方程Y=15 381.1x-279 657.5(r=0.996 7)和Y=17 387.6x-399048.0(r=0.993 7)，对映体分数(EF值)=0.489±0.017；在2.5～200μg·L^-1浓度范围内，高效氯氟氰菊酯对...     

小桐子赤霉素合成酶JcGA3ox基因家族成员的克隆与功能分析

赤霉素(gibberellins, GAs)是一类在植物生长和发育过程中起重要调控作用的植物激素。本研究克隆了木本油料能源植物小桐子(Jatropha curcas)赤霉素3-氧化酶(gibberellin 3-oxidase, JcGA3ox)基因家族全部3个成员，分别命名为JcGA3ox1、JcGA3ox2和JcGA3ox3。采用RT-qPCR技术检测JcGA3oxs在成年小桐子不同组织部位的表达量，发现JcGA3ox1的主要表达部位是成熟叶和幼果；JcGA3ox2的主要表达部位是成熟叶、雌花和雄花；JcGA3ox3主要表达部位是根、成熟叶和幼果。为了进一步探究JcGA3oxs在植物生长和发育过程中的作用，采用35S启动子分别构建了35S:JcGA3ox1、35S:JcGA3ox2和35S:JcGA3ox3超量表达载体，并转化拟南芥和小桐子。结果显示，35S:JcGA3oxs转基因拟南芥和小桐子植株的JcGA3oxs表达水平均显著高于野生型植株。与野生型拟南芥植株相比，转基因拟南芥植株GA₁和GA₃含量均有减少，GA₄