杭州市农业产业化发展的现状、问题与对策

“十五”期间,杭州市农业产业化围绕都市农业发展战略,扶持力度不断加大,服务水平不断提高,农业产业化经营步伐逐步加快,为农业增效农民增收做出了积极贡献。为了更好地做好“十一五”期间的农业产业化工作,特对过去的工作做一回顾,并就今后的发展做一思考。     

鸡传染性支气管炎病毒HN99株膜蛋白基因的分子特征分析

根据GenBank中已经公布的鸡传染性支气管炎病毒株M基因序列,设计并合成1对特异引物,利用RT-PCR方法扩增出IBV河南分离株HN99株M基因的全长片段,然后进行克隆、测序,获得了长度为669 bp的HN99株M基因全序列,编码M蛋白222个氨基酸残基,其N端的前60 nt为前导序列,近N端含有1个潜在的N-糖基化位点,M基因编码的膜蛋白中含有9个高度保守的半胱氨酸;HN99株M蛋白点突变较多,且突变位点呈散在分布遍及整个ORF,主要表现为碱基的插入和缺失,在Glu 21～Leu 37,Set 45～Ile 68,Pro 74～Phe 94位氨基酸的区域内形成3个跨膜区域,在39 Try～43 Thr,171 Ile～176 Pro,183 Arg～193 Ser住氨基酸处含有3个潜在的抗原位点;与GenBank中的11个国内外参考毒株相比,IBV-HN99株M基因核苷酸同源性为87.0%～90.3%,推导的氨基酸同源性为89.7%～94.2%;在系统发生进化树中,HN99株M基因与其他参考毒株属于不同的分支,亲缘关系均较远.     

泰安市丹参害虫及天敌种群动态与群落特征

为明确泰安市丹参田节肢动物的物种组成、种群动态和群落特征,于2017年对丹参害虫及天敌种类和数量进行系统调查.结果表明,泰安地区丹参主要害虫及天敌共59种,隶属于2纲10目35科.主要害虫有棉蚜(Aphis gossypii)、叶蝉类、微小跳盲蝽(Halticus minutus)、烟粉虱(Bemisia tabaci...     

恩诺沙星单克隆抗体的制备及ciELISA试剂盒的研制

【目的】研制快速、灵敏、特异的恩诺沙星残留检测ciELISA试剂盒(ENR-Kit),为动物源性食品中恩诺沙星(ENR)残留的快速免疫学检测奠定基础。【方法】通过细胞融合技术制备恩诺沙星单克隆抗体(ENR mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法生产ENR单抗,应用ENR mAb研制ENR残留间接竞争ELISA(ciELISA)快速检测试剂盒,并对其灵敏度、半数抑制浓度(IC50)、特异性、准确度和基质效应性进行检测。【结果】筛选出2株杂交瘤细胞,其单抗亚类均为IgG1亚型。4G1-B3杂交瘤细胞株的ENR mAb间接ELISA效价为1∶1.024×106,亲和常数(Ka)为9×1010L/moL。ENR-Kit的线性检测范围为0.05~48.75μg/L,灵敏度0.05μg/L,半数抑制浓度(IC50)为1.31μg/L,与环丙沙星的交叉反应率(CR)为0.02%,与其他化合物的交叉反应率(CR)均<0.01%。ENR-Kit对牛奶样、鱼肉样和鸡肉样中ENR的平均添加回收率分别为96.49%,86.95%和84.13%,平均变异系数均<10%,不同基质对ENR-Kit检测结果影响小。【结论】研制的ENR-Kit具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合ENR残留快速检测的推广应用。     

机器视觉技术对氯化三苯基四氮唑染色法鉴定玉米种子生活力的改进

为探讨机器视觉技术在提高玉米种子生活力检测结果判定上的准确性和可重复性,以‘三北6号’玉米种子为试验材料,将吸胀的玉米种子沿胚部纵切,置于0.1% 氯化三苯基四氮唑(TTC)溶液,30 ℃黑暗条件下染色2 h,使用Image J和PhenoSeed软件进行图像分析,结合人工观察鉴定,分析玉米种子胚部的颜色指标、染色比例与种子生活力之间的关系。结果表明,基于机器视觉技术提取的‘三北6号’玉米种子TTC染色后胚部的颜色特征建立的生活力检测模型,准确率均达到83 %以上。随机选取6份其他品种玉米种子进行模型验证,结果表明发芽率的预测值与真实值之间无显著差异。     

液相色谱/酶标免疫分析法测定动物组织中己烯雌酚

欧盟及国际社会对在动物性食品严禁使用1,2-二苯乙烯类药物.我国也相应制定了严禁在肉食动物中使用己烯雌酚(DES)等激素的法规.继而我国于1999年制定了《中华人民共和国动物及动物源食品残留监控计划》,加强了对违禁药物的监控力度,规定动物产品中1,2-二苯乙烯类药物的最大残留限量(MRL)为不得检出.目前,检测动物产品中DES残留量的方法较多,有紫外分光光度法、液相色谱法、放射免疫法、GC/MS法等.     

乌拉尔甘草种子发芽检测方法研究(简报)

乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)属于豆科蝶形花亚科甘草属,是我国传统的中药材,素有"十方九草"、"国老"之美誉.甘草还是干旱地区维护生态平衡的一种优良冬春牧草[1].     

采穗园母株生根性状遗传变异和选择效应*

对３．５年生日本落叶松采穗园４个家系４０株母株生根率、生根量和偏根率遗传变异，不同生根性状间表型相关研究表明，家系间生根率、生根量和偏根率差异尚达不到０．０５的显著水平。但不同母株间上述差异均极显著。单株生根率、生根量等的遗传力大于家系，方差分量分别比家系大４～３６倍。部分家系生根率与生根量、偏根率之间相关关系紧密程度不同，但生根量与偏根率之间各家系均呈极显著负相关。根据生根率、生根量综合评价结果，按５０％入选率对采穗园进行淘汰，或用生根性状优异的母株扦插苗建第二轮采穗园，插穗生根率、生根量比总体利用水平可分别提高２０．３％和２９．８％，而又不致严重减少采穗园母株的遗传多样性。     

猪水肿病的成因及发病机制

猪水肿病（ED）由肠毒血症大肠杆菌（ETEEC）引起。在母源抗体IgA下降、饲料中蛋白质含量过高、缺硒和过食等诱因的刺激下，猪肠道内大肠杆菌迅速繁殖，依靠定植因子粘附到肠粘膜细胞上，并产生SLT－IIe毒素。SLT－IIe是一种热不稳定蛋白质，它能与血管内皮细胞和平滑肌细胞上的受体结构，阻碍细胞内蛋白质合成，造成血管损害而致水肿。     

湖北地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定与耐药性分析

本研究旨在分离鉴定湖北地区致奶牛乳房炎的病原菌，鉴定细菌的耐药特征．为奶牛乳房炎防治提供理论依据。从湖北两个主要奶牛小区的9个不同规模的奶牛场采集牛奶样本200份，经检测．其中3份为临床乳房炎样本，49份为隐性乳房炎。两地区隐性乳房炎的检出率分别为36．4％（20／55）与20％（29／145）。两地区乳房炎牛奶的细菌种类分布也各不同。其中武汉东西湖地区停乳链球菌的分离率最高，占33.3％（8／24）．而宜昌夷陵区以金黄色葡萄球菌分离率最高，占29％（9／31），其次为无乳链球菌，占25．8％（8／31）。从乳房炎牛奶中共分离到7种细菌共55株，其中金黄色葡萄球菌11株，表皮葡萄球菌10株，无乳链球菌10株，停乳链球菌14株，乳房链球菌2株，大肠埃希氏菌4株，克雷伯氏菌4株。分别对所有分离株进行12种药物的敏感性试验，结果表明所有菌株对先锋V、氧氟沙星均高度敏感．对临床常用的青霉素、链霉素具有较高的耐药性。