猪源ST9型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中前噬菌体的流行状况与转导分析

本研究旨在分析猪源ST9型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,MRSA)中前噬菌体的流行情况、结构特点和转导能力,探究前噬菌体在猪源MRSA流行克隆形成中的作用。基于全基因组信息,分析了近年来从我国多省分离的131株ST9型MRSA中前噬菌体的流行率、分型、亲缘关系和结构特征;选取含不同分型前噬菌体的菌株进行诱导,对诱导获得的噬菌体颗粒进行转导,测定转导子的耐药表型及体外适应性。研究结果显示：猪源ST9型MRSA的前噬菌体携带率为78.6%(103/131株),其中,63株携带完整前噬菌体序列,所有前噬菌体序列均不含耐药基因,仅2.9%(3/103株)的前噬菌体序列含毒力基因;前噬菌体谱型丰富,其整合酶分型主要为Sa2int和Sa4int;各型别前噬菌体结构同源性较高,完整前噬菌体可被诱导为长尾噬菌体;噬菌体颗粒可包装供体菌的aadD、tet(L)耐药基因并转导至受体菌中;转导子可获得卡那霉素、四环素耐药表型,体外生长能力与受体菌株无明显差异(P>0.05)。研究结果表明：猪源ST9型MRSA的前噬菌体携带率较高,谱型丰富,不携带耐药基因,部分噬菌体可包装供体菌的耐药基因转导至受体菌,产生的适应性代价小。     

布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白VceC对山羊滋养层细胞内质网应激和性腺激素分泌的影响

旨在研究布鲁氏菌IV型分泌系统效应分子VceC对山羊滋养层细胞(GTC)内质网应激及性腺激素分泌的影响,为揭示其在布鲁氏菌感染宿主细胞中的作用,阐明布鲁氏菌胞内生存和引起动物流产的机制提供重要依据。本研究通过构建VceC的真核表达载体pEGFP-C1-VceC并转染GTC,Western blot检测内质网应激标志性分子GRP78和CHOP蛋白表达量变化,qRT-PCR和Western blot进一步检测未折叠蛋白反应(UPR)信号通路相关分子;ELISA检测细胞培养上清液的孕酮和雌激素的浓度变化。结果表明,成功构建了VceC真核表达载体pEGFP-C1-VceC,转染GTC后,12和24 h GRP78蛋白表达均显著升高(P<0.01),24 h后CHOP蛋白表达显著降低(P<0.05);qRT-PCR检测IRE1和XBP-1的mRNA表达量在24 h均显著升高(P<0.05),而PERK、ATF6和ATF4 mRNA的表达未发生显著变化(P>0.05),Western blot检测IRE1蛋白的表达在转染12 h后显著升高(P<0.01);VceC转染...     

猪繁殖与呼吸综合征病毒凝胶层析纯化方法的建立与初步应用

为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRSV。结果显示,与氯化铯密度梯度离心相比,凝胶层析纯化可以得到纯度更高、结构更完整的病毒粒子。将凝胶层析纯化得到的PRRSV免疫小鼠制备多抗,间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,多抗血清可与PRRSV发生特异性反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,抗体效价可达到1∶25 600以上,纯化的病毒具有良好的免疫原性。结果表明,应用凝胶层析技术可得到高纯度、结构完整的PRRSV粒子,且纯化后PRRSV能够诱导良好的免疫应答,本试验结果可为PRRSV的纯化提供参考。     

rep-PCR法对稻瘟病菌有性后代随机群体的评价

构建稻瘟病菌有性后代随机群体是研究目的基因遗传特点，乃至克隆目的基因的重要基础，但是在建立有性后代随机群体时，可能会有无性后代污染。采用先分离单个子囊，待其长成菌落并产生分生孢子后，再分离单个萌发的分生孢子的方法构建稻瘟病菌有性后代随机群体。利用基于重复DNA序列Pot2的rep-PCR方法对分离得到的有性后代进行DNA指纹分析，并评价构建的稻瘟病菌有性后代群体的质量。结果表明，构建的有性后代随机群体共包含176个后代。每个后代个体的DNA指纹图谱均与两亲本的DNA指纹图谱不一致；有性后代之间的DNA指纹图谱也彼此不一样，说明得到的有性后代个体都是由子囊孢子萌发形成的，且分离自不同的子囊。GUY11的rep-PCR扩增片段中的5个特异性片段的分离比例也都符合1:1的期望值，是按单个位点标记分离的，与已知的结果相吻合，说明有性后代随机群体的质量较高，不存在偏离现象，是一个较为理想的群体。同时，研究结果还得出基于Pot2的rep-PCR方法可以用来快速评价稻瘟病菌有性后代群体的质量。     

西藏山南、昌都地区杂粮作物资源

1981和1982年,考察队分别考察了山南、昌都两地区的24个县,240个区,618个公社,1,208个生产队。共搜集到杂粮作物及其近缘野生植物的植株、果穗、种子样本400余份,基本上摸清了当地杂粮作物的分布和种植情况,并对其类型和主要性状做了初步分析鉴定。发现了一些新的类型、种和变种。现分别将几种杂粮作物和近缘野生植物的考察鉴定结果汇总如下:     

多种用途的甘薯新品种

1979年以来我所先后育成两个适于烘烤、蒸煮与食品加工的甘薯新品种。苏薯1号(原系号:南京79-42)杂交组合为南瑞苕×华北52-256。1988年江苏省农作物品种审定委员会审定通过。本品种株型呈半直立高度疏散,单株分枝多,长势优     

河南省优质大豆发展策略

大豆是我国重要的油料作物,也是重要的加工原料,对油脂工业、饲料工业和食品工业等具有多方面用途.近年来,随着人民膳食结构的改变,生活水平不断提高,对植物蛋白的需求强劲增长,大豆是重要的植物蛋白来源.     

珍稀冬桃、冬李资源

1992年,重点地区作物种质资源考察队在四川北部山区考察时,收集到珍稀冬桃、冬李种质资源,现简介如下。1.冬桃在四川青川县青溪镇海拔1000米处,发现2株冬桃,时值10月下旬、果实仍挂满全树、鲜艳夺目。果实椭圆形,果顶圆平,顶点微突,梗洼圆眼形,缝合线中