2006年吉林地区野生鸟类禽流感病毒流行病学监测

禽流感（Avian influenza，AI）是由禽流感病毒（AIV）所引起禽类的一种急性和高度接触性传染病，几乎所有的野生和家养禽类都可感染。2003年底从亚洲始发并席卷全球的高致病性禽流感疫情中，泰国等国家从多种死亡野鸟体内分离到了H5N1型禽流感病毒。2005年4月，我国青海湖中的近6000只斑头雁等侯鸟发生急性死亡，经病毒分离和鉴定，证实病原体为H5N1亚型禽流感病毒。因此，许多学者认为野生鸟类在传播禽流感病毒过程中扮演了重要角色。吉林省处于亚太地区候鸟迁徙路线上的重要位置，每年有大量的野生鸟类栖息和停留。为了解吉林地区野生鸟类禽流感病毒抗体的动态，2006年3月至2006年7月份对吉林市花鸟市场上的野生鸟类抽样进行血清学检测，为禽流感防控提供科学依据。     

表达牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的嵌合狂犬病病毒生物学特性

牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus, BVDV)引起牛发热、腹泻、黏膜糜烂溃疡等症状，给养牛业带来严重经济损失，新型疫苗的研发意义重大。狂犬病病毒(rabies virus, RV)作为病毒载体可稳定表达外源蛋白，反过来外源蛋白也不会阻碍病毒的复制。本研究目的是利用反向遗传操作技术构建和拯救表达BVDV结构蛋白的重组RV,以期获得一种能表达高水平BVDV E2蛋白的重组病毒。选择Ⅰ型BVDV主要优势抗原E2蛋白基因序列进行优化后合成E2基因片段，利用Overlap PCR的方法将E2基因改造为DE2片段，以RV疫苗毒株LBNSE为病毒载体，利用BsiWⅠ和NheⅠ酶切位点，将DE2基因插入LBNSE基因组中，成功构建pRV-DE2重组质粒。脂质体法将全长重组质粒转染BSR细胞后，拯救重组病毒RV-DE2,并用直接免疫荧光和RT-PCR的方法对其鉴定，对构建成功的病毒进行生长特性、致病性、重组蛋白表达特性等生物学特性和小鼠体内免疫效力的研究。结果表明，RV-DE2病毒滴度在F3代之后趋于稳定，在相同的培养条件下比亲本LBNSE病毒滴度高。重组病毒对小...     

浅谈毛皮动物防疫措施

近年来，我国毛皮动物养殖业发展迅速，但是科学饲养和疫病防治知识普及范围狭窄，加上种兽的引进、买卖频繁、兽医卫生制度不健全等原因，导致疫病暴发流行，造成大批死亡，经济损失惨重。养殖业的健康发展，疫病防治是关键。必须遵循“以防为主，防重于治，防治结合”的原则。     

一例貉子犬瘟热的诊断

2006年8月20日,河北沧州市肃宁县送来3只冷冻貉子,我们对其进行了剖检检查、显微镜观察、细菌检测和分子生物学检测,并根据临床发病流行特点诊断为犬瘟热,给养殖户提供合理的治疗方案,取得了一定效果,避免了巨大的经济损失。现将诊治报告如下。     

几种家畜寄生虫基因工程疫苗研究进展

<正> 1.囊虫及绦虫病疫苗将编码绦虫保护性抗原的基因(45w)分别克隆到真核质粒表达载体pcDNA3和羊腺病毒载体(OAV200),构建成的pcDNA3-45W核酸疫苗和OAV205重组病毒疫苗,免疫接种羊后,诱发羊产生了特异性免疫应答,保护羊抵抗绦虫卵的攻击。吴丹等以囊虫病患者血清为探针     

高致病性PRRSV TJ株Nsp2蛋白的缺失及其二级结构预测

根据GenBank上发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) TJ株F3代全基因序列(GenBank登录号为EU860248),结合多个PRRSV亚洲株Nsp2基因比对结果,设计合成引物,选择高致病性PRRSV TJ株噬斑克隆纯化前后14个不同代次,利用合成的引物扩增各代次Nsp基因的高变区片段及F3代和F92代Ns...     

伪狂犬病病毒gB和gE蛋白重组表达及抗体间接ELISA检测方法的建立

本研究利用PCR扩增伪狂犬病病毒(PRV)Bartha-K61株gB基因核心抗原区和闵A株gE基因核心抗原区,构建了重组质粒pET-32a-gB和pET-32a-gE,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导进行表达.SDS-PAGE分析表明,pET32a-gB蛋白分子量约为44 kDa,pET3...     

犬腺病毒间接免疫荧光检测方法的建立

用犬腺病毒制作的抗原玻片,通过确定最佳一抗和荧光抗体浓度,特异性试验和敏感性试验,建立了犬腺病毒间接免疫荧光方法,可用于狐狸脑炎的诊断.     

新城疫病毒F基因与传染性喉气管炎病毒gB基因重组鸡痘病毒免疫保护产生时间的测定

为了检测表达鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白gB基因和新城疫病毒F基因的重组鸡痘病毒(rFPV-gB-F)的免疫产生期，将60只30日龄SPF鸡随机分为6组，以5d为间隔在试验开始第0、5、10、15、20d时选取10只进行免疫，经翅内侧皮下注射接种1000PFU rFPV-gB-F，另外的10只作为对照。在第1组免疫后的第25d，将不同日龄免疫组和对照组试验鸡再随机分为2组，分别用传染性喉气管炎病毒WG株和新城疫病毒F48E9株强毒攻击。结果表明，在rFPV-gBF免疫接种后第10d时，可以诱发抗gB的抗体，保护免疫鸡抵抗传染性喉气管炎病毒WG株强毒和新城疫强毒的攻击。由此确定，rFPVgB-F免疫产生的时间是接种后第10d。     

犬瘟热疫苗株CDV3核蛋白基因全序列测序及分析

根据GenBank上发表的犬瘟热病毒(CDV)核蛋白(N)蛋白基因序列,设计合成了1对寡聚核苷酸引物,提取犬瘟热病毒疫苗株CDV3的RNA为模板,采用RT-PCR扩增病毒的N蛋白基因,并进行产物克隆和序列分析。将CDV3疫苗株N基因与GenBank数据库中的疫苗株Onderstepoort及中国、美国和德国等分离的疫苗株或毒株共14株CDV N基因序列进行同源性分析,发现CDV3 N基因序列与疫苗株Onderstepoort的同源性为97.1%,与其他分离毒株的核苷酸同源性为92.8%～94.0%,其中与中国分离的TN株同源性为93.6%;然而,CDV3 N蛋白与它们的氨基酸同源性却基本都为96.6%～97.3%。这说明虽然犬瘟热弱毒株CDV3在核苷酸水平上与其他疫苗株毒株的差异较大,但是在氨基酸水平上的比较差异较小。