云南蔷薇属部分种质资源的SSR遗传多样性研究

利用简单重复序列SSR标记技术对蔷薇属（Rosa L．）13份野生种、变种、变型及29份栽培品种的遗传多样性进行了研究。用筛选出的18对SSR引物对42份材料DNA进行PCR扩增,在18个位点共检测到148个等位基因,每一位点的等位基因变幅为6～14个,平均8．2个。材料问遗传相似系数为0．282—0．892,表明在分子水平上具有丰富的遗传多样性。在相似系数为0．456时,基于SSR标记的聚类分析将13个蔷薇野生种分为5个组,这与植物形态学分类结果大体一致。在遗传相似系数为0．43水平上,聚类分析将42份供试材料分为5大组群。初步探讨了野生种之间以及野生种与栽培品种之间的亲缘关系。     

月季柱头形态发育进程与可授性

为研究月季柱头的形态发育进程与可授性的相互关系,提高授粉效率。以切花月季为材料,显镜观察柱头在不同发育阶段的形态变化,田间定期授粉后荧光显微观察柱头花粉萌发情况,并采用联苯胺-过氧化氢法检验柱头可授性。结果表明,月季柱头发育阶段可分为4种形态时期,分别为柱头中间凹陷期、丫状期、柱头2裂片平展期、柱头乳突组织衰老期;最佳授粉时期为柱头2裂片平展180°左右时,持续时间24～60h;定期授粉观察以及联苯胺-过氧化氢检验发现,柱头不同形态时期的可授性结果一致。说明月季柱头形态发育与可授性存在直接联系,可通过观察柱头形态来确定最佳授粉时期。     

二倍体月季F_1群体的SSR鉴定与遗传分析

以中国古老月季品种‘月月粉’(Rosa chinensis‘Old Blush’,用OB表示)为母本,‘无刺光叶蔷薇’(Rosa wichuriana‘Basye’s Thornless’,用W表示)为父本,构建F_1代共296个单株。从146对SSR标记中筛选出亲本间多态性好且条带清晰的23对SSR标记,对随机选择的94株F_1进行杂种鉴定和遗传分析。结果表明:筛选到3个纯合显性标记分别为Fv512、Fv609和305,可单独一次性鉴定全部杂种真实性;随机筛选的94株子代均为真杂种;20个SSR标记用于基因型分析,有9个标记出现了偏分离,并在统计上达到显著或极显著水平,偏分离率45%,说明该F_1群体基于SSR位点的基因型偏分离率较高,在进行高密度遗传图谱构建时应重视偏分离标记对作图的影响;UPGMA聚类分析显示,94株F_1的遗传变异大,且遗传多样性丰富,可划分为2个大类7个亚类。     

月季SSR反应体系的优化

以月季品种'月月粉'为试材,利用CTAB法提取DNA,对影响SSR-PCR扩增体系的主要因子设计了多梯度的优化实验,建立了适用于月季的SSR反应体系:总反应体积为25μL,包括模板DNA溶液(20 ng/μL)2μL,10×PCR buffer(Mg2+free)2.5μL,MgCl2(25 mmol/L)2.0μL,dNTPs(10mM)0.5μL,正反引物各(10μmol/L)1μL,Taq DNA聚合酶(5 U/μL)0.3 μL.利用该优化体系对部分月季品种进行PCR扩增和电泳检测,扩增结果清晰且有较高的多态性,表明该体系适合用于分析月季的遗传多样性.     

月季“月月红”(Rosa chinensis‘Slater’s crimson China’)愈伤组织诱导及植株再生初报

以"月月红"(R.chinensis‘Slater’s crimson China’)的嫩叶为外植体,采用MS为基本培养基,在添加不同浓度的2,4-D、TDZ、GA3和NAA上,结合不同时间的暗培养,研究"月月红"胚性愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明,2,4-D 5 mg/L暗培养20 d诱导出的愈伤组织,在MS+TDZ 1.0 mg/L+GA30.1 mg/L+NAA0.01 mg/L培养基上暗培养12 d,可以获得较好的胚性愈伤组织;胚性愈伤组织转入光照培养15 d后可形成肉眼可辨的子叶期体胚及具有不定芽和胚根的结构,20 d后可长成绿色的小植株。     

冠状银莲花栽培技术

冠状银莲花（Anemone coronaria）是毛茛科银莲花属多年生块根草本花卉,原产地中海沿岸东部,目前在欧洲已广泛栽培,尤其在意大利和以色列。银莲花Anemone起源于希腊语“ancmos”,种子似绒毛,其瘦果外具白色绒毛,俗称“白头翁”。银莲花植物资源全世界约有150多种,主要分布在北半球,多数分布于亚洲和欧洲;我国有野生资源53种,有25个变种,5个亚种,在大陆各省区和台湾省均有分布,主要分布在西南部高山地区。通过对以色列切花栽培品种Jerusalem引种栽培试验,总结出冠状银莲花栽培技术,为花卉生产提供参考。     

‘月月粉’连续开花习性遗传规律分析

连续开花(Perpetual blooming,PB)是观赏植物的重要性状之一,是中国月季对现代月季的重大贡献。然而月季连续开花性状的遗传基础至今尚未清晰。为研究中国古老月季品种‘月月粉'(Rosa chinensis‘Old Blush',用OB表示)连续开花习性的遗传规律,以其为母本,以一季开花(Single seasonal blooming,SB)园艺品种‘无刺光叶蔷薇'(Rosa wichuriana'Basye's Thornless',用W表示)为父本,构建了OB、W、F_1、F_2、BC_1OB和BC_1W等6个世代827个株系的二倍体遗传分离群体。遗传分离群体表型测定将开花表型分为连续开花和非连续开花(Non-perpetual blooming)2种类型。296株F_1和150株BC_1W群体均表现为非连续开花,表明OB连续开花性状受隐性基因位点调控。300株BC_1OB群体中83株为连续开花,223株为非连续开花,χ~2适合性测验符合1:3的遗传分离规律(P0.05),表现为双隐性基因遗传,表明‘月月粉'连续开花可能受双隐性基因位点共同调控。     

百合鳞片扦插繁殖研究

对东方百合Siberia、东方百合Sorbonne、亚洲百合Navona、铁炮百合Snow queen共4个品种分别作了4种基质的鳞片扦插繁殖方法比较试验。结果表明：百合品种、基质配比及培育方式对扦插繁殖均有显著影响。百合鳞片扦插的繁殖系数与籽球直径成反比，全锯末和珍珠岩／腐殖土／锯末(1／1／1)这2种基质较适合于鳞片扦插，并可大规模用于生产，两段培育比较适合鳞片扦插。     

药渣在切花月季生产中的应用

采用药渣和有机肥混施改良土壤,研究药渣及有机肥混用对土壤的改良效果及对切花月季生产的影响.结果表明:施入药渣1 kg/m2+有机肥5 kg/m2对土壤的改良效果最好,与对照相比,月季种植成活率提高14.20百分点,早期萌枝数增多,花蕾增粗,切花瓶插时间延长了4.7d,药渣和有机肥混合施用对盐碱地切花月季生产的促进作用显著.     

中国古老月季品种的核型研究

采用常规压片法对‘月月红’等11个中国古老月季品种进行了以染色体形态和倍性为主的核型分析研究。结果表明: (1) 不同品种的染色体数差异较大, ‘绿萼’、‘玉玲珑’、‘月月红’和‘月月粉’是二倍体(2n = 2x = 14) ; ‘春水绿波’和‘湖中月’是三倍体( 2n = 3x = 21) , ‘大富贵’、‘金粉莲’、‘菊红潮’、‘映日荷花’和‘思春’是四倍体(2n = 4x = 28) 。(2) 11个品种染色体的绝对长度均在1～3μm之间; 品种间核不对称系数变化范围为56.560% ～60.376%; 除‘思春’和‘映日荷花’外,其它9个品种中均未观察到随体存在。(3) ‘春水绿波’和‘湖中月’的核型公式为2n = 3x = 21 = 3 sm +18m, 核型类型均是1A; ‘金粉莲’和‘菊红潮’的核型公式为2n = 4x = 28 = 4 sm + 24m, ‘大富贵’的核型公式为2n = 4x = 28 = 2 sm + 26m, 核型类型都是1A; ‘绿萼’的核型公式是2n = 2x = 14 = 2 sm + 12m, 核型类型为1B; ‘思春’和‘映日荷花’的核型公式是2n = 4x = 28 = 4 sm + 22m + 2m ( SAT) , 核型类型为1A; ‘玉玲珑’的核型公式是2n = 2x = 14 = 2 sm + 12m, 核型类型为1A; ‘月月粉’和‘月月红’的核型公式是2n = 2x = 4 sm + 10m, 核型类型为2A。