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H5亚型禽流感病毒HA基因在重组杆状病毒中的表达及检测 总被引:6,自引:3,他引:6
利用杆状病毒表达系统对H5亚型禽流感病毒HA基因在sf9细胞中的表达进行了研究。首先将pUCm—T—H5HA质粒用BamHⅠ及NotⅠ酶切,获得HA基因片段,同时杆状病毒转座载体质粒pFastBacⅠ也用BamHⅠ及NotⅠ酶切,然后用T4DNA连接酶连接,构建了重组质粒pFastBac—H5HA。再将该重组质粒转化DH10Bac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid—H5HA。将Bacmid—H5HA转染sf9细胞,获得重组杆状病毒,经SDS—PAGE和Western blotting检测表明,HA蛋白在重组杆状病毒中获得表达。 相似文献
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将禽流感病毒(AIV)H5、H7、H9血凝素亚型标准血清中的IgG作为包被抗体,H5、H7、H9血凝素亚型单克隆抗体作为第二抗体,建立了双抗体夹心ELISA(AC-ELISA)方法,并优化了反应条件.结果表明:单抗和标准血清最适工作质量浓度分别为5、10 mg/L,标准阳性血清于4℃包被12 h,二抗作用条件为37℃作用1 h,封闭条件为37℃作用1 h,酶标抗体工作条件为1∶5 000稀释后,37℃作用1 h,底物作用条件为37℃作用10 min.阴阳性抗原临界值为0.274~0.332.本方法具有很高的特异性和敏感性. 相似文献
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胶体金方法检测H3和H7亚型禽流感病毒 总被引:4,自引:0,他引:4
用微波法制备金溶胶,对禽流感病毒(AIV)H3和H7亚型单克隆抗体(H3-1D6和H7-1F7)用亲和层析法进行纯化,优化单抗与金溶胶的最佳结合条件后,喷涂于玻璃纤维上制成金标垫.将纯化的马抗H3和H7亚型AIV多克隆抗体和山羊抗鼠二抗分别包被于硝酸纤维素(NC)膜上作为检测线和质控线,制备胶体金检测试纸条.用制备的试纸条对H3和H7亚型AIV标准抗原、毕赤酵母真核表达蛋白和已知样品进行检测,结果与血凝试验、血凝抑制试验、AC-ELISA和RT-PCR方法相符.同时用该方法对H5和H9亚型AIV标准抗原、病料以及传染性支气管炎、新城疫等抗原进行检测,结果均为阴性.该方法操作简单,肉眼于10 min内可判定结果,且达到了血凝试验和血凝抑制试验的敏感性. 相似文献
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广西独特的地理位置使得广西成为全国野生动物贸易的集散地之一。为了解广西野生动物的走私种类及其季节性变化,作者统计了广西2007~2008年已破获的非法利用和走私野生动物案件涉及的种类及其季节性变化。结果表明2007和2008年分别查获案件54起和61起。野生动物走私和非法案件中涉及种类共有71种,隶属15目33科,其中两栖类2种,占所有种数的2.8%;爬行类27种(蜥蜴类8种、龟鳖类5种、鳄类1种、蛇类13种),占38.0%;鸟类25种,占35.2%;哺乳类17种,占23.9%。2007和2008年查获的非法利用和走私野生动物分别是56种和32种,非法利用或走私的种类主要是珍稀濒危的种类,数量大,种类多。广西的野生动物走私和非法利用需要引起关注。 相似文献
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一株新城疫病毒弱毒株的分离鉴定 总被引:7,自引:0,他引:7
于1996年8月从长春地区--养鸡场分离到一株新城疫病毒,该毒株经过鸡胚传代培养,病毒形态学观察,血凝谱测定、鸡胚平均致死时间试验、鸡脑内致病指数试验、脉致病指数试验及1入毒试验等生物学特性结果表明该新城商株为弱毒株。 相似文献
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王中達 《上海畜牧兽医通讯》1958,(1)
屠畜收購与收購栓疫是屠畜兽医衛生管理与监督的首要环节。这一个环节的基本任务,除了保証肉食衛生与防止畜疫的傳播外,更可避免购进不合規格的家畜、孕畜及有劳动力的役畜。收購前的準備工作 1.收購站的設备除因边远地区及交通不便的地点,可实施流动收購外,一般均应有固定的收購站以收購屠畜。作为收购的地点,应地势高燥,交通方便,并且須有上搭蓆棚,地面鋪水泥的收購埸所,以及有簡易的临时畜舍。收购的屠畜在临时畜舍內,不能超过12~24小时。收購埸地与临时畜舍应每日消毒一次。 2.收購用具的准备和檢查收購前要准备好一切用具,如磅秤、杆秤、木籠(铁籠)、开口器、听診 相似文献
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