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RAPD技术应用中的一些问题及对策 总被引:22,自引:0,他引:22
综述了RAPD技术的一些理论性问题,包括RAPD与其它分子标记技术相比的优点,影响结果重复性的因素,显性标记产生的原因,条带取舍的标准等。提出在实验中解决这些问题的一些方法:严格控制反应条件,采用单倍体和单剂量标记,系统学研究中要结合其它方法进行分析,定位基因时要选用合适的群体等。 相似文献
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桑椹浆瘿蚊(ContariniamorulaeJiangnomennudum)是新发现的一种桑树害虫。属双翅目瘿蚊科。寄生于桑种子里。被害小果比正常果早熟,使桑椹畸形,被害种子的胚珠不能发育,果皮发育形成“假种子”形的危害状。该虫严重影响桑椹,桑籽生产和杂交育种工作。在陕西关中地区,该虫年发生1代,以老熟幼虫在土中结茧越夏越冬,3月底开始化蛹。4月中下旬羽化,成虫发生期与桑树开花期相吻合。5月中旬为老熟幼虫离果入土高峰期。桑椹浆瘿蚊的发生受自然气候的影响非常明显。夏季高温干旱不利于休眠体生存、春季干旱使成虫羽化出土困难、5月份干旱少雨会阻碍… 相似文献
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苜蓿根腐病对苜蓿生长和产量造成严重影响,为了解引起根腐病病原真菌的种类,本文对从陕西省定边县牧草草场紫花苜蓿根部分离得到的根腐病病原菌进行形态学观察、EF-1α序列分析鉴定及接种试验。结果表明:通过对病原菌在PDA培养基中的分离、纯化得到的单菌落形态学观察及显微镜下菌丝、孢子的观察,该病原菌属于引起苜蓿根腐病的镰刀菌属(Fusarium);用CTAB法提取病原菌基因组DNA,并对EF-1α序列进行PCR扩增、回收纯化、克隆测序,将测序结果进行Blast比对,构建系统发育树,分析与Genbank已知近缘种属亲缘关系,结果显示与锐顶镰刀菌(F. acuminatum)亲缘关系最近,可信度达99%;最后通过根部接种试验,接种苜蓿根部发病症状与田间根腐病发病症状一致,鉴定结果显示本试验研究的引起紫花苜蓿根腐病的病原菌为镰刀菌属锐顶镰刀菌(F. acuminatum)。 相似文献
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【目的】研究在特纳河痘病毒(Tanapox virus,TPV)感染枭猴肾上皮细胞(Owl monkey kidney epi-thelial cells,OMK)过程中,基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9和其组织抑制剂(Tissueinhibitor of metalloproteinase,TI MP)TI MP-1、TI MP-2的表达变化及其与感染的关系。【方法】用MMPs高特异性抑制剂(MMP-2Ⅱ、MMP-9Ⅰ)降低MMP-2或MMP-9的活性,研究其对TPV感染的影响和对OMK细胞的毒性。采用明胶酶谱法检测MMP-9和MMP-2在TPV感染过程中蛋白质水平的变化,并应用实时荧光定量PCR方法检测TPV感染中TI MP-1和TI MP-2 mRNA表达水平的变化。【结果】MMP-2和MMP-9的高特异性抑制剂对TPV感染具有显著抑制效果,且对OMK细胞没有毒性作用。在TPV感染OMK细胞过程中,MMP-2和MMP-9蛋白水平升高,而TI MP-1和TI MP-2的mRNA表达水平下降。【结论】MMP-2和MMP-9参与TPV感染,可能对病毒的感染具有促进作用。MMP-2、MMP-9和TI MP-1、TI MP-2比例失衡,造成MMP-2和MMP-9相对"过盛",这可能是MMPs促进TPV感染的重要机制。 相似文献
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[目的]研究桑园条桑收获形式与片叶收获形式对产量、工效和养蚕的影响.[方法]针对陕西主要养蚕地区桑树春伐栽培模式设计了春季重剪梢、春伐夏剪2种条桑收获法和轮伐式全年条桑收获技术.通过多年试验调查剪条收获形式对桑树发条、产量、工效和养蚕的影响.[结果]采用春季重剪法和春伐夏剪法比对照春伐法全年枝条总长度分别增加77.89%、38.14%,桑叶产量分别增加30.06%、7.75%;"春季重剪梢-春伐夏剪"轮伐式条桑收获技术能达到全年70%~80%的条桑收获,提高采收桑叶工效2倍,养蚕工效提高18.18%,夏季和秋季条桑的养蚕和产茧成绩优于饲喂叶片.[结论]全年条桑收获方法是可行的. 相似文献
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桑树叶片形态变异株mRNA的差异表达及差异片段J12的克隆 总被引:6,自引:0,他引:6
桑树(Morus alba L.)变异株系凤尾-之濑是新-之濑的辐射突变体,叶片细长,横向皱缩。利用cDNA-AFLP技术对凤尾-之濑和新-之濑的顶芽进行基因表达差异分析,得到大约3200个条带,20个条带存在差异表达,对其中的15个差异条带进行了克隆和测序。序列同源性检索显示,编号为J12的片段与脯氨酰4-羟化酶α亚基基因有较高的同源性,其余片段与现有的网上基因资源相比没有同源性。实验建立了一套利用桑树变异株系寻找差异表达基因的技术体系。 相似文献
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FT(flowering locus T)是高等植物开花过程中关键的信号整合因子,主要在叶片维管束中合成,通过运输抵达茎顶端分生组织发挥作用。为了研究桑树FT基因的转录调控机制,以白桑种(Morus alba Linn.)品种新一之幼嫩叶片的基因组DNA为模板,根据NCBI数据库公布川桑(Morus notabilis)全基因组中FT同源序列的上游序列设计引物,PCR扩增获得FT基因的启动子片段,其长度为921 bp,命名为MaF TP。通过PLACE和PlantC ARE在线启动子预测工具分析,该序列中除含有TATA-box、CAAT-box等真核生物启动子的核心元件外,还存在脱落酸的响应元件ABRE,生长素响应元件AuxRR-core,水杨酸响应元件TCA-element,生理节律相关顺式作用元件circadian,光响应元件I-box、G-box、MNF1等,以及胚乳表达必需的顺式作用元件Skn-1-motif和抗逆性相关的顺式作用元件W-box、MBS、TC-rich repeats,表明FT基因的转录表达可能受光照、干旱、节律性、脱落酸、生长素、水杨酸等因素的调控,并参与胚乳的形成。将5'端缺失的5段FT启动子序列(从大到小依次为MaF TP903、MaF TP762、MaF TP542、MaF TP289、MaF TP162)分别与报告基因GUS融合构建表达载体,利用农杆菌转化烟草(Nicotiana benthamiana)植株,通过GUS染色对不同长度的启动子活性进行分析,结果表明:除了MaF TP903的活性较弱外,其余启动子缺失片段均能驱动GUS基因高效表达,且表达量相近。依据研究结果推测:MaF TP启动子的762~903 bp区段可能存在MaF T基因转录表达的负调控元件。 相似文献