微生物分子生态学技术及其在食品产业中的应用前景

综述了新兴的不依赖于培养的微生物分子生态学技术,包括两类：不基于微生物总基因组DNA的分析方法,主要有单碳源利用图谱法和磷脂脂肪酸图谱法;基于微生物总基因组DNA的分子分析方法,主要有克隆文库分析法、宏基因组文库技术、G＋C含量分析法、总DNA复性动力学分析法、群落水平总基因组DNA交互杂交法、荧光原位杂交技术、DNA微阵列芯片技术、变性/温度梯度凝胶电泳、单链构象多态性分析、限制片段长度多态性/扩增核糖体DNA限制性分析、末端标记限制片段长度多态性、核糖体基因间隔区分析、随机扩增多态性DNA等.并提出了这套技术在食品产业中的应用前景：发现新菌种,生产新型酶制剂,优化改造新工艺,确保食品质量与安全等,为食品产业的继续开发提供新的技术支持.     

利用环介导等温扩增技术快速检测水产品中的副溶血弧菌

副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种重要的食源性致病菌。首次将环介导等温扩增技术（Loop-Mediated Isothermal Amplification, LAMP）应用于副溶血弧菌的快速检测。针对副溶血弧菌不耐热溶血毒素基因（tlh）设计四条特异性引物,建立了副溶血弧菌LAMP检测方法,1 h即可完成。对12种细菌共28株菌进行LAMP扩增,仅副溶血弧菌得到阳性结果,证明引物具有很高的特异性;副溶血弧菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别为90 fg/LAMP反应体系和24 cfu/mL,对模拟食品样品进行直接检测,检测限为89 cfu/g;对40份水产样品进行检测,8份副溶血弧菌LAMP阳性,其中6份传统培养阳性。本研究表明,该方法检测副溶血弧菌特异性强、灵敏度高,并且操作简便、快捷、检测成本低,有望发展成为快速检测副溶血弧菌的有效手段。     

酸性电解水结合冰温对冷却肉保鲜的影响

在冰温保鲜基础上,比较不同电解时间的酸性电解水对冷却肉保鲜的影响。通过测定pH值、菌落总数、挥发性盐基氮、汁液流失率和色差a*值,同时进行感官评定得出:电解水会影响冷却肉pH变化,电解时间为5,10,15 min的电解水均能有效杀灭微生物,且三者杀菌效果并无显著差异,能有效维持挥发性盐基氮含量在较低水平,电解5,10 min的电解水处理样品在15 d后比用电解15 min的水处理样品有更大的汁液流失率,电解水对冷却肉的色泽不会产生不良影响,且不会影响整体感官品质。     

香菇孢子单核体与原生质体单核体遗传差异分析

本研究利用RAPD技术，对香菇孢子单核体和原生质体单核体的遗传差异变化进行了分析。9个随机引物共扩增出79条DNA带，在此基础上分析并构建了遗传相关聚类图。结果表明以交配型基因为标记的孢子单核体遗传变异大于原生质体单核体，同种交配型的孢子单核体遗传相似性分别为66．3％和71．7％，而原生质体单核体的遗传相似性为98．7％、93．7％。     

电解水的保存特性及杀菌效果

为探明电解水的保存特性及杀菌效果,该研究将4种电解水分别保存在(-18±2)℃和室温下,测定其主要理化特性pH值、氧化还原电位(ORP)以及有效氯含量(ACC)随保存时间延长(7~30 d)的变化,比较4种电解水保存前和在(-18±2)℃、室温保存30 d对虾的杀菌效果,并检测电解水浸泡虾后浸泡液中的残留菌。结果显示:在保存过程中绝大多数电解水的pH值呈上升趋势,ORP和ACC有下降趋势;电解水冰[(-18±2)℃保存]的pH值和ACC高于室温保存的电解水,ORP低于室温保存的电解水;保存30 d后,电解水对虾的杀菌效果比保存前差,且电解水冰对虾的杀菌效果优于室温保存的电解水。表明电解水以固态冰的形式保存有利于ACC的保持,能提高电解水对虾的杀菌效果。     

香菇生长过程中几种胞外酶活性的变化规律

本文研究了在常规栽培条件下，香菇整个生长发育过程中培养料中的羧甲基纤维素酶、半纤维素酶、滤纸纤维素酶、淀粉酶、漆酶、果胶酶、酸性蛋白酶活性的动态变化规律，结果表明，培养料成分的不同只影响酶活性的相对大小，而不影响酶活性变化的规律性，大部分酶随着每一潮子实体的成熟出现一个活性峰值，营养生长阶段，酶活性呈总体上升趋势，生殖生长阶段则呈下降趋势。部分酶活性在后期丧失。     

用荧光染色法对柱状田头菇(Agrocybe aegerita)子实体担子和担孢子的观察

运用荧光染色方法对４株不同地域来源的柱状田头菇子实体的担子和担孢子进行了观察。结果显示,来自欧洲希腊的Ａｇ８、中国四川省的Ａｇ１０和台湾省的ＡａＴ菌株的有性繁殖结构特征是４孢双核;而来自贵州省的Ａｇ９菌株的有性繁殖结构特征是双孢４核。这种４核现象首次在蕈菌中观察到。     

多重PCR快速检测食品中的单核细胞增生性李斯特菌

【目的】通过对检测食源性致病菌单核细胞增生性李斯特氏菌(LM)的多重PCR体系的优化,建立一种能够在食品样品中应用的四重PCR。【方法】采用热裂解提取菌液和菌落DNA,以16SrRNA、inlAB、iap、hly基因为靶基因设计引物,从影响多重PCR扩增的引物浓度、退火温度进行优化。【结果】通过其它5种同属异种菌即英诺克李斯特氏菌、西尔李斯特氏菌、威尔西李斯特氏菌、绵羊李斯特氏菌、格氏李斯特氏菌及副溶血性弧菌均未扩增出特异性的片段。纯培养物的最低检测限为102CFU/mL,模拟污染的生猪肉检测限不大于0.4CFU/g。【结论】通过菌落获得DNA的多重PCR方法更好,该方法具有敏感、特异、快速及准确的优点,可用于食品中LM的快速检测。     

一种新发现的香菇球状病毒

迄今为止国际上香菇病毒的研究结果表明,在香菇中含有直径分别为25、30和39nm的球状病毒颗粒,它们的一个共同特征是,这些病毒颗粒的核酸型均为双链核糖核酸(dsRNA).在国家自然科学基金会的资助下,我们对上海地区发生的香菇病毒病进行了研究,发现了一种新的香菇球状病毒颗粒,它的核酸型是单链核糖核酸(ssRNA),并探讨了这种病毒颗粒与病毒病的发生和香菇菌种退化的关系.     

香菇交配型基因的遗传研究 Ⅰ一种交配型基因测定的新方法

本文建立了一种香菇交配型基因测定的新方法——原生质单核体系本交配到极性标记法.用这一方法不仅成功地分离和鉴定出不同香菇菌株的四种标准交配型基因,还有效地区分出亲本型和重用型两种交配型基因类型。这一技术为深入开展异宗结合食用菌的遗传研究提供了一个重要的工具。