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酪蛋白的胰蛋白酶酶解条件的优化 总被引:3,自引:0,他引:3
用二次回归通用旋转设计、响应面分析法,研究三因素五水平下胰蛋白酶水解酪蛋白的反应,得到了一定条件下酪蛋白在酶作用下水解程度的变化规律。根据回归方程利用统计优选法寻优,确定了最优水解条件:温度为58℃,pH值为7.4,酶底比为0.7%。 相似文献
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在25日龄断奶仔猪日粮中添加卵黄抗体(IgY)粉,检测其对断奶仔猪各肠段pH值及肠道内容物微生物区系的影响。结果表明,与空白对照组相比,IgY可以显著降低断奶仔猪空肠和回肠的pH值,有利于乳酸杆菌的生长,抑制大肠杆菌的生长。并且IgY对大肠杆菌的抑制作用与抗生素接近。 相似文献
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甲磺酸达氟沙星在鲫体内药物动力学及残留研究 总被引:7,自引:0,他引:7
【目的】研究甲磺酸达氟沙星(Danofloxacin mesylate, DFM)在鲫体内的药物动力学和残留消除规律。【方法】在试验水温20℃时,鲫以10 mg·kg-1 b.w的剂量单次经口灌服甲磺酸达氟沙星后,用液-液提取、反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定血浆和组织中DFM的浓度。盐酸氧氟沙星做为内标。房室模型分析表明,其药物时间数据符合有吸收二室模型,吸收、分布迅速,但消除缓慢,半衰期(T1/2 Ka 、T1/2α、T1/2β)分别为0.63、4.96、47.79 h,最大血药浓度(Cmax)为3.23 ?g·ml-1,达峰时间(TP)为2.73 h,药时曲线下面积(AUC)为154 ?g·h·ml-1。非房室模型分析表明,平均滞留时间(Mean Residence Time, MRT)为58.56 h。【结果】组织中药物浓度在测定时间里均显著高于血浆(P<s0.05),消除快慢依次为肾脏、肝胰脏、血浆、肌肉和皮肤,其消除半衰期分别为33、44、48、51、177 h。与其它组织相比皮肤消除最慢,建议其作为DFM在鲫体内的残留靶组织。在20℃时, 皮肤以100 ?g·kg-1为最高残留限量(maximum residue limit, MRL)建议休药期不低于23 d。 相似文献
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通过PCR扩增获得鸡福氏志贺菌产超广谱β-内酰胺酶SHV-12和TEM-1V型ESBLs基因片段,定向克隆入质粒载体构建重组质粒,酶切和DNA测序鉴定后转化受体菌BL21,用SDS-PAGE电泳观察目的基因在重组菌中的表达,用双紫外分光光度仪测定表达蛋白的底物水解特性和抑制剂的抑酶作用.结果表明,构建的重组质粒经EcoRⅠ和XholⅠ双酶切后,可切下目的条带;DNA测序发现插入片段与SHV-12和TEM-1V ESBLs基因序列完全一致.重组质柱转化BL21所表达的重组蛋白有超广谱β-内酰胺酶活性.重组菌S-BL21、T-BL21的最优表迭条件分别是IPTG浓度0.5、0.8 mmol/L,诱导温度37℃、37℃,诱导时间5、4 h.SHV-12和TEM-1V型ESBLs能水解青霉素G、氨苄西林、阿莫西林、头孢噻呋、头孢曲松和头孢噻肟;对头孢噻呋钠的Km值最小,分别为4.9和1.29;对头孢曲松钠的Km值最大,分别为53.43和24.13;抑制剂舒巴坦钠、它唑巴坦钠对SHV-12和TEM-1V型ESBLs水解抗生素有不同程度的抑制作用. 相似文献
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本研究旨在探讨不同类抗菌药物诱导引起大肠肝菌主动外排系统调控基因marA、soxS、robA表达水平的变化特点.挑选大肠杆菌标准菌株O78经阿米卡星(AMK),环丙沙星(CIP),头孢曲松钠(CRO)逐代诱导的10、20、30代菌株作为试验菌株,提取其总RNA并反转录,采用荧光定量RT-PCR的方法测定其主动外排调控基因marA、soxS、robA的mRNA表达水平.结果表明:marA基因在CIP20中mRNA的表达水平最高,是母体菌株O78的2.30倍,且其在CIP10、CRO30、CIP30、AMK20的表达量分别为母体菌株O78表达量的2.11、1.71、1.15、1.44倍;soxS基因在AMK20中的表达量最高,是母体菌株的5.98倍,其它高于O78的菌株表达量的菌株为CRO30、CRO20、CIP20、CIP30;robA基因mRNA表达量除了在CIP10的表达量高于O78外,其余均低于母体菌株的表达.结果提示头孢曲松、环丙沙星、阿米卡星能诱导菌株的主动外排调控基因marA、soxS mRNA表达增加,robA基因mRNA表达减少. 相似文献
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从89株临床分离鸭源大肠杆菌中选择5株氨基糖苷类高水平耐药菌,应用实时荧光定量RT-PCR方法测定其主动外排基因acrD mRNA水平,选用1株中介株、1株敏感株和大肠杆菌ATCC25922作为对照,分析其mRNA转录水平与耐药强度的相关性。结果显示,5株耐药菌的acrD mRNA相对表达量均高于中介株和敏感株,其相对表达量分别是2.00、1.96、2.22、1.84、4.39,敏感对照株为1.67,中介对照株为1.75,除4号菌株外,其余4株耐药菌相对表达量和标准菌株ATCC25922具有显著性差异;同是高度耐药的4号菌和5号菌存在较大差异,5号菌相对表达量是4号菌的2.39倍,这说明对氨基糖苷类不同耐药程度的菌株acrD基因的转录、表达存在差异,且与耐药水平呈正相关,但同时存在其他重要耐药机制介导氨基糖苷类耐药。 相似文献
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为探讨主动外排泵在鸡大肠杆菌对抗菌药耐药中的作用和超广谱β-内酰胺酶与主动外排作用之间的关系,采用琼脂二倍稀释法检测主动外排抑制剂氰氯苯腙(CCCP)和利血平存在时,ESBLs阳性和阴性鸡大肠杆菌对10种抗菌药物的外排表型的变化。结果表明利血平缺乏与存在时,ESBLs阳性菌中,氨苄西林、头孢曲松、头孢噻肟、磷霉素对其MIC值的变化差异显著(P0.05),其对抗菌药物耐药率下降7.7%~30.7%,ES-BLs阴性菌对抗菌药物MIC值变化无统计学意义,且ESBLs阳性菌的外排筛选率高于ESBLs阴性菌;CCCP缺乏和存在时,头孢曲松、头孢噻肟、阿米卡星、磷霉素对ESBLs阳性菌MIC值变化差异显著(P0.05),对抗菌药物耐药率降低15.4%~46.12%,在ESBLs阴性菌对抗菌药物也无统计学意义;利血平与CCCP相比较在ESBLs阳性菌中外排阳性株的筛选无明显差异(P0.05),而在ESBLs阴性菌株差异显著(P0.05)。说明主动外排泵抑制剂CCCP和利血平与抗菌药物合用均可筛选出外排阳性株,但二者之间作用有很大的不同;ESBLs阳性菌的外排表型筛选率高于阴性菌,ESBLs阳性菌的多重耐药性可能是ESBLs与外排系统共同作用的结果,产ESBLs的特异性耐药与主动泵过度表达的非特异性耐药之间有协同关系。 相似文献
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制备托曲珠利纳米乳,并考察其质量。选用油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、油酸等为油相,吐温-80、聚氧乙烯辛基苯基醚、聚氧乙烯蓖麻油-40等为乳化剂,乙醇、PEG400、乙二醇、丙二醇等为助乳化剂,通过伪三元相图筛选出制备托曲珠利纳米乳的最优处方,优化处方为油相O1∶乳化剂S5/助乳化剂C4∶水=1.2∶2.8∶6(质量百分数比)。当Km=3时,伪三元相图所形成的微乳区域面积最大;所制备的纳米乳带有淡蓝色乳光,染色特性证明为为O/W型纳米乳,平均粒径为42.99 nm,分布均匀。试验所制备的O/W型2.3%托曲珠利纳米乳澄清透明,12000 r/m in离心10 m in及分别置于4℃冰箱、室温和60℃4个月溶液不分层、不浑浊,仍澄清透明,性质稳定,托曲珠利纳米乳制备工艺简单,稳定性良好。 相似文献