外源DNA导入技术及其RAPD分析的研究进展

根据近年来植物外源DNA导入技术在我国农业分子育种上所取得的研究成果，对植物外源DNA导入技术所使用的方法、应用研究的领域和所取得的进展进行了详细的分析，并结合现代分子生物学技术在农业分子育种上的应用从分子水平上对外源DNA导入技术的可行性进行了讨论。     

借助粒子轰击提高农杆菌转化水稻的频率

为了提高农杆菌转化水稻的频率，对粳稻品种台北309的幼穗和成熟胚的愈伤组织诱导频率和粒子轰击时其愈伤组织转化频率的影响进行了研究。结果表明，水稻幼穗是诱导愈伤组织的最佳外植体，通过粒子轰击可以有效地提高农杆菌转化水稻愈伤组织的频率，其中以每个样品轰击两次的效果最好，其转化率比对照提高54．5％。     

外源DNA导入水稻体细胞胚研究初报

以水稻Ｒ２８８的幼穗为外植体，培养在附加激素的ＭＳ固体培养基上诱导出愈伤组织，挑选胚性愈伤组织进行液体振荡培养，建立体细胞悬浮细胞系，诱导出体细胞胚并大量增殖．用水稻紫香糯幼苗为材料提取其ＤＮＡ，以不同浓度ＤＮＡ浸泡体细胞胚，发现体细胞胚的生长发育与试管苗发生了明显变化．试管苗移植大田，获得了种子，植株矮小．初步表明外源ＤＮＡ导入体细胞胚能够诱发变异．     

商陆DNA导入水稻引起后代性状变异初报

将商陆DNA通过浸种法、花粉管导人法和穗茎注射法处理水稻．比较3种导入方法对当代结实率和变异率的影响以及导入后代的遗传变异情况。结果表明：花粉管导入法对导入当代结实率和后代变异率影响均最大，商陆DNA处理水稻后引起了水稻若干数量性状和质量性状的较大遗传变异。     

石刁柏辐射诱变的遗传学分析与RAPD研究

以60Co-γ作为辐射源,对石刁柏愈伤组织进行5个不同剂量的辐射诱变,经细胞学鉴定和RAPD分析,不同辐射剂量的辐射诱变效果有明显差异.采用细胞学鉴定染色体结构变异,辐射剂量为1、5、10、20Gy的材料变异率分别为9.4%、36.5%、31.2%、48.2%,在石刁柏辐射品种的RAPD鉴定中,从100个随机引物中筛选...     

铁皮石斛组织培养技术

为构建铁皮石斛快繁体系,以铁皮石斛茎段、叶片为外植体,设计离体培养不同阶段的培养基配方。结果表明:使用70%乙醇进行表面灭菌处理30 s后,再用0.1%氯化汞溶液消毒9 min是最适宜铁皮石斛茎段的消毒方法;不同外植体对愈伤组织的诱导率有很大差异,以茎段诱导的愈伤组织出愈率最高,达到了83.3%;最适宜的不定芽诱导培养基为MS+0.5 mgL 6-BA+0.2 mgL NAA;适合铁皮石斛组培苗生根培养基为12 MS+0.5 mgL NAA。试验确定了最适培养条件,并成功获得了大量的铁皮石斛愈伤组织和幼苗,为铁皮石斛无性繁殖技术的研究提供了科学依据。      

灵芝群体交配基因型分析

研究灵芝群体交配基因型,并与酯酶同工酶试验相比较,探讨它们在群体亲缘关系分析上的异同点。采用OWE-SOJ技术对24个灵芝菌株的单孢分离菌株进行标准交配型鉴定,及群体间交配基因型的测定,并结合酯酶同工酶试验对群体间的亲缘关系进行分析。鉴定出7大类交配基因型,并发现A因子含有4个等位基因,B因子含有4个等位基因,及一个特殊的A混合基因,四类交配型出现了一定程度的偏分离。酯酶同工酶试验检测出了28条不同酯酶酶谱带,在相似系数为0.73214时,样品被分为9大类。比较交配基因型分析与酯酶同工酶试验结果,发现两者具有很高的相似性。交配基因型测定可以作为分析菌株间差异和鉴定品种的一种重要补充手段。     

玉米DNA导入水稻新品系示范栽培报告

１９９３～１９９４年，在长沙县石常农业技术试验站对４个由玉米ＤＮＡ导入的水稻新品系ＤＨ１，ＤＨ２，Ｄ６，ＭＫ３３进行了示范栽培，摸索了一套较完善的栽培技术措施，为今后大面积生产和推广奠定了技术基础。     

月季原生质体分离条件的研究

采用质壁分离和冰冻预处理月季幼叶.用纤维素酶、果胶酶、甘露醇的混合酶液分离原生质体,并对影响原生质体产量及活力因素进行分析.结果表明,纤维素酶对原生质体产量有极显著影响,适宜月季幼叶原生质体提取的酶液组合为:纤维素酶1.5%、果胶酶0.5%、甘露醇0.6 mol/L、酶解12 h;质壁分离后,原生质体产量增加,但活力降低;冰冻处理使产量提高,处理12 h时,原生质体活力达到最高.     

通过PCR技术简单扩增奶牛高GC含量的rDNA重复序列

为了探索利用PCR简单扩增高GC含量的长重复序列的方法，经反复摸索后选用LAPCR法即LA PCR Taq酶结合GC缓冲液Ⅱ来扩增奶牛高GC含量的长片段重复序列，成功获得了全长2538bp，GC含量为65．7％的DNA序列，其中ITS1的GC含量高达80％．探索了克隆复杂DNA序列时引物设计的特别规则、反应体系的改进、DNA聚合酶的选用等措施．