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本实验比较了3种RNA提取方法提取单叶省藤的茎、雄花序和根的结果,改良CTAB法和Trizol法提取的RNA无明显降解、完整性好,均可用于cDNA文库构建,而异硫氰酸胍法提取的RNA降解严重;考虑到改良CTAB法成本较低,故推荐为首选方法。将茎、雄花序和根三种组织的RNA等量混合后,利用SMART策略构建了全长cDNA文库;通过涂平板培养后的菌落计数,测得初库滴度为2.91×105cfu/μL;从培养平板上随机挑取16个菌落进行PCR检测,文库重组率为87.5%,插入片段平均长度为1.5kb左右。所建文库的质量可靠,为下一步的EST测序和候选基因发现提供了材料基础。 相似文献
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菊花辐射后代生理生化特性的研究 总被引:6,自引:0,他引:6
为了探明辐射诱变的生理生化机制,对经10,15,20,25,30Gy^60Co-γ射线辐射获得的菊花材料的生理生化指标分别进行了测定。结果表明:经辐射处理的菊花的叶绿素a,b及总叶绿素含量比未经辐射的高,升高的幅度各异;剂量为10Gy处理的类胡萝卜素含量与未处理相同,15,25Gy辐射的升高,20,30Gy辐射的降低;经辐射的植株叶片的光合速率都高于未处理,增加幅度各异;光合色素含量和光合速率与辐射剂量没有明显的相关性;经辐射的材料和未处理的相比过氧化物酶同工酶带数及带的浓度有明显差异。由此说明,辐射使菊花的生理生化特性改变,其表型也表现变异。 相似文献
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对DNA供体慈利玉米、受体DHCK籼稻及浸泡后所获优良类型材料的干胚与芽进行了酯酶同工酶分析,找到了与玉米相对应的酯酶酶带,初步分析说明外源DNA的功能片段已整合到了受体基因组内. 相似文献
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报道了以小麦幼胚诱导的胚性愈伤组织为受体,在无菌操作条件下,用外源DNA 进行浸泡处理的实验方法.设计了2种不同温度、时间和供体DNA 浓度,以及附加不同浓度的二甲基亚砜的处理.处理后胚性愈伤组织的分化有所减弱,特别是低温或较长时间的处理以及附加二甲基亚砜对分化影响较大. 相似文献
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采用RT-PCR技术获得了茶陵野生稻DREB类转录因子的cDNA全长.序列分析表明,此基因核苷酸序列全长为958bp,编码314个氨基酸,该序列与水稻DREB基因的同源性为98%.其编码的蛋白与小麦CRT/DREB4蛋白的同源性为93%,与大麦CBF2A蛋白和CBFIVc-14.1蛋白的同源性分别为93%和92%.推导蛋白第43~112位氨基酸为典型AP2结构,具有AP2/DREB类转录因子的基本结构特征,并构建了茶陵野生稻DREB基因的植物表达载体pWM101DREB. 相似文献
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超级稻DAD1基因的cDNA克隆及其正反义表达载体的构建 总被引:1,自引:1,他引:0
采用RT-PCR方法从超级稻幼苗中扩增DAD1基因的cDNA,并克隆测序,核酸序列表明该基因编码区为342bp,编码114个氨基酸残基.与GenBank发表的序列(XM_472334)相比,有3处碱基不同,分别为105bp处的C(GenBank的为T),148bp处的A(G),149bp处的C(T).将该基因分别正向和反向插入CaMV35S启动子后,构建了基因在植物中的正义、反义表达载体. 相似文献
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