巴斯德毕赤酵母多拷贝整合表达组装禽流感病毒样颗粒

【目的】构建多拷贝整合表达禽流感病毒样颗粒的重组巴斯德毕赤酵母,为H5N1亚型禽流感基因工程疫苗提供基础。【方法】以巴斯德毕赤酵母GS115株18S rRNA基因(rDNA)部分序列,插入pPIC9K载体上XbaⅠ和Bsp1407Ⅰ位点间,构建多拷贝整合表达质粒p8K。再以禽流感病毒H5N1毒株基因组RNA为模板,RT-PCR扩增HA、M和NA基因,分别插入多拷贝载体p8K,构建表达质粒 p8K-HA/M/NA。表达质粒分别扩增后线性化,按比例混合,电转化GS115感受态细胞。增菌后,经遗传霉素G418抗性平板筛选、PCR鉴定携带HA、M和NA基因序列的多拷贝整合菌株。阳性菌株增菌、诱导表达、高压均质破碎后,Western-blot检测表达产物。【结果】PCR鉴定阳性的重组菌株,其细胞裂解蛋白,免疫印迹试验可检测到与HA、M₁和NA分子量一致的蛋白条带;电子显微镜可观察到大小约为80~120 nm 的病毒样颗粒,免疫鸡能产生抗禽流感病毒中和抗体。【结论】重组毕赤酵母能够多拷贝整合、表达、组装禽流感病毒样颗粒。     

应用典型样本对损毁土地进行大尺度调查

在全国土地复垦潜力调查研究工作开展的背景下,以内蒙古自治区煤炭生产建设项目损毁土地为例,探索合理、科学的一定区域范围内大尺度要求下损毁土地面积的推算。采用实地调研法和典型样本分析法,在研究中提出"万吨煤土地损毁系数",并以该参数推算全区损毁土地面积。研究结果:全区范围内露天煤矿、井工煤矿万吨煤土地损毁系数分别为0.26、0.25 hm2.104t-1。该推算方法是政策尺度下所采用的,可以作为本次土地复垦潜力调查的参考数据;若要得到更为准确的数据为土地复垦潜力调查分析评价服务,必须在将来认真组织开展全国范围内损毁土地详查工作。     

浅析少数民族农民工随迁子女教育融入的影响因素

少数民族自身的特殊性导致影响少数民族农民工随迁子女教育融入的因素也更具复杂性。根据抽样调查的结果,分析少数民族农民工随迁子女在迁入地教育融入的影响因素,发现迁入时间、家庭环境、学校环境、年龄、少数民族的特殊身份等是影响其教育融入的主要因素。     

设施蔬菜有机栽培技术的持续优质、稳产效果

蔬菜设施栽培为中国的蔬菜供应发挥了巨大作用,不仅缓解了蔬菜生产季节性和消费均衡性之间的矛盾,还生产了高档蔬菜,增加蔬菜的花色品种,名特优蔬菜、时令蔬菜、反季节蔬菜,基本满足了社会不同消费水平的需求。但蔬菜设施栽培存在营养品质和风味品质下降以及生育障碍严重、病害     

鸡传染性支气管炎病毒XJ株N基因的克隆表达及抗原性初步鉴定

根据发表的鸡传染性支气管炎病毒N基因序列设计一对引物,经RT—PCR扩增得到1230bpDNA片段,将其克隆到表达载体pET-28a（＋）中,构建重组质粒pET—N,经测序鉴定正确后,将其转化感受态细胞E．coli BL21（DE3）,并进行IPTG诱导表达,结果表明,重组菌可表达分子质量为50kD的融合蛋白。Western-blotting结果显示,该重组蛋白能与IBV阳性血清发生特异性的免疫印迹反应,表明该重组蛋白具有良好的免疫原性。     

江洲糯的特征特性和栽培技术

江洲糯的特征特性和栽培技术钱永祥，蒋相根，沙启国（扬中县种子公司２１２２００）（扬中县长旺镇农技站）江洲糯（原名８２０３糯）是江苏省扬中县种子公司从紫金糯天然变异后代中系统选育而成。１９９３年经江苏省农作物品种审定委员会审定通过。该品种１９８６年参加...     

普格县畜牧业发展存在的问题和建议

畜牧业是四川省普格县农村经济的重要支柱产业,畜牧业生产的发展,关系到农民增收、农村经济发展和社会稳定。在全县经济发展的进程中,畜牧业担负着提供产业支撑、改善物质条件、强化经济基础、增加农民收入、保障人民生命健康安全的重任。     

基于水土约束下的城市人口规模测算与分析——以库尔勒市为例

库尔勒市是新疆地区极为重要的城市,其人口日渐呈现增长之势。但是,在人口猛烈增长过程中,必须同时需要考虑其城市水土现状,不仅需要对人口规模进行预测和测算,更加需要结合水土的约束和条件合理控制人口规模。基于此,本文结合库尔勒市水土资源情况探讨其城市人口规模测算。     

杂交狼尾草的抗寒能力及越冬保种技术

杂交狼尾草是一种高产优质、耐热性强的优良饲草,能有效地解决我省养殖业夏季缺青的矛盾,深受生产单位及农户的欢迎。由于该牧草是种间杂交一代品种,是一个三倍体,生产上多采用无性繁殖方法。但杂交狼尾草为多年生的喜温作物,在我省不能自然越冬,只能作一年生利用。因此,明确杂交狼尾草越冬的气象条件,掌握简单易行的越冬保种方法,是大面积推广利用的关键。笔者从1987年开始,进行了杂交狼尾草越冬保种的技术研究,现将主要结果总结如下。