鲤细胞因子多克隆抗体的制备及检测

为从蛋白质水平研究细胞因子在鲤体内免疫应答过程中的合成变化,本研究采用PCR技术克隆TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β基因含有部分抗原决定簇的片段,引入双酶切位点Bam HⅠ和HindⅢ后连接至p ET-32a/21a,构建相应的表达载体,制备多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,并以此作为实验工具,检测经嗜水气单胞菌感染后鲤血清中炎性细胞因子的合成变化。结果显示,基因TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β融合蛋白分子量分别约为31.8、31.7、35.3、32.5、18.0和33.6 ku;抗体效价达到2.4×106;在病原菌感染后的不同阶段,促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12和抗炎细胞因子IL-10、TGF-β呈现出不同的合成变化。研究表明,制备的抗体具有较高的效价、亲和力和特异性,可用于鲤细胞因子的定量研究,该抗体的获得为鲤免疫应答与细胞因子合成的系统研究奠定了基础。同时,获取的鲤细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-12、IL-10和TGF-β的抗体亦可用于其他鱼类细胞因子蛋白质水平的定量研究。     

饲料中n-3/n-6多不饱和脂肪酸水平对黄河鲤幼鱼生长性能及生长相关基因mRNA表达的影响

为了分析饲料n-3/n-6多不饱和脂肪酸(PUFAs)水平对黄河鲤幼鱼生长性能和生长相关基因的影响,实验以鱼油和混合植物油(花生油和紫苏籽油)为脂肪源配制5组等氮等能饲料。对照组(T1)以鱼油为唯一脂肪源,18:3 n-3/18:2 n-6为0.97,第二组(T2)以花生油为唯一脂肪源,18:3 n-3/18:2 n-6为0.02,其他3组实验饲料以花生油和紫苏籽油为脂肪源,且n-3/n-6比值分别为0.46(T3)、1.09(T4)和1.53(T5)。10周养殖实验结束后,分析各组鱼体的生长性能、血清中生长激素(GH)含量及不同部位肌肉中生长相关基因的表达水平。结果显示,与对照组相比,n-3/n-6对鱼体的脏体比(VSI)、饲料系数(FCR)、摄食率(FI)无显著影响,增重率(WGR)随n-3/n-6比值的增加先升后降,n-3/n-6比值等于1.09时,WGR达到峰值,为218.53%±24.32%。T2组血清GH含量显著高于其他处理组,随着n-3/n-6比值增大GH含量逐渐降低。背部肌肉中生长相关基因gh、ghr、igf-1和myod均表现为先升后降的趋势,igf-1r为先降后升,mstn无显著差异。红肌中gh、myod含量逐渐降低,ghr、mstn不存在显著差异,igf-1与背部肌肉相似,先升后降,igf-1r先降后升。腹部肌肉中gh、ghr和igf-1表达情况与背部肌肉一致,igf-1r和myod的表达不存在显著差异。T2组和T4组背部肌肉肌纤维数目存在显著差异,且T4组肌纤维较T2组粗。研究表明,n-3/n-6不仅在一定程度上提高鱼体的WGR,且不同比例的n-3/n-6水平会影响血清GH的含量,不同部位肌肉组织中GH/IGF轴生长相关基因的水平也受饲料中n-3/n-6比例的影响。     

酸性α-醋酸萘酯酶染色法的改良

通过对酸性α-醋酸萘酯酶染色过程中的几个重要因素进行研究,确定了其最佳处理条件,并探讨了几个因素间的相互作用。结果表明,固定液用2.5%戊二醛的效果要优于甲醛-丙酮混合液;用pH值5.8～6.2的孵育液孵育1.5h,甲基绿复染1～10s效果最佳。变化各因素的处理条件对最终的观测效果和结果都有影响,其中以甲基绿复染时间过长影响最大。同时,该染色法应用于贵妃鸡的T淋巴细胞计数中,4次重复的结果表明,贵妃鸡酸性α-醋酸萘酯酶阳性细胞率为37.86±1.89%,各重复间差异不显著。     

羊肠毒血症诊断与综合防治

<正>羊肠毒血症(Enterotoxaemia)又叫软肾病或过食症,主要发生于绵羊的由D型魏氏梭菌引起的一种急性传染病,其典型病变是肾脏松软,像脑髓那样,小肠粘膜急性出血、充血,故也有"血肠子病"之称。本病一般经消化道感染,由于D型魏氏梭菌的芽孢广泛散布于土壤中,随饲料和饮水被健康羊食入,成为胃肠道的常在菌。在正常情况下并不发病,在一些应激条件     

产学合作培养机械专业人才分析与实践——基于大学生就业视角

针对机械专业人才培养中存在的产学脱节、理论脱离实际和实践环节薄弱等问题,分析产学合作在机械专业学生培养中的作用.通过对机电工程学院近五年机械专业学生就业情况的分析,提出在产学合作的框架下,应调动企业的积极性,把机械行业对人才的要求贯彻到机械专业学生培养的教育理念、培养目标、办学机制、教学内容和方法等各个环节中,使机械专业人才的培养在产学合作中紧扣机械行业的发展趋势,实现培养优秀机械人才的目标.实践表明,产学合作极大地提高了学生的就业率和就业质量,可实现学校和企业"双赢",是一种有效的培养模式.     

2011年海河流域“千斤棉”高产攻关实践

2011年国家棉花产业技术体系海河综合试验站先后在所属区域的河间、南宫和宁河实施了＂千斤棉＂创建项目,面积合计19.3hm2。除宁河基地遭遇大风、暴雨灾害性天气导致产量较低以外,河间与南宫两地均克服了8月到9月中上旬的阴雨、沥涝、寡照等不利天气影响,表现为抗病性突出,生长势强,后劲足,叶功能好,不早衰,结铃性强,脱满率低,烂铃少,上中下成铃均匀,秋桃盖顶,伏桃渍腰。现总结如下。     

吉林省玉米杂交种商品品质概述

通过对2004年吉林省市场上推广的134个品种的商品品质进行分析。结果表明,目前吉林省商业杂交种大多数容重都达到了国标二级标准,但晚熟品种整体水平较低。供试品种的子粒平均含水量37.1%。随着熟期的延长,含水量不断增高。     

襄城县烟农增收模式初探

襄城县结合本地烟叶生产实际,依托土地流转政策,通过轮作倒茬,落实先进实用技术,积极探索多元经营、综合发展的烟农增收模式,取得了一定的效果。本文对襄城县烟农增收模式概况进行了系统阐述,对襄城县促进烟农增收所采取的做法进行了分析和总结,为如何做好烟农增收工作提供了新思路。     

冬季马铃薯实生种子日光温室育苗移栽技术

利用冬季进行马铃薯实生种子育苗,可以加快育种进程,但由于冬季气温偏低,对实生苗生长影响很大。我们使用1 500 mg·L-1赤霉素溶液浸种24 h,有效地打破了当年采收马铃薯实生种子的休眠,使当年采收的实生种子的发芽率超过80%;并在日光温室内使用小拱棚控制温度和湿度,有效地防止了低温冷害;移栽前浇透水,减少了对根的损伤,使实生苗移栽的成活率达到100%。