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猪miR-22前体上游序列片段突变可能对miR-22的表达起到重要调控作用,为进一步探究其功能,基于CRISPR/Cas9基因编辑技术,通过针对猪miR-22前体上游序列片段设计2个靶标sgRNAs(short guide RNAs),构建重组表达载体pX459-sgRNA1和pX459-sgRNA2;随后将重组质粒转染猪肾上皮细胞系(PK15),经嘌呤霉素初步筛选后,提取基因组DNA,通过PCR及测序鉴定编辑效果;最后,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测编辑前后miR-22相对表达量的变化。结果显示,81个阳性克隆中,共产生6种突变类型,突变率达60.49%;qRT-PCR检测显示,编辑后miR-22的表达量显著下调约50%。本研究成功获得了miR-22前体上游序列突变的猪PK15细胞模型,为今后猪miR-22的功能研究提供了新的可应用研究对象。 相似文献
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采用盆栽试验,设置了不同梯度的麻渣配施化学钾肥处理,并测定了剑麻的生长指标和叶绿素荧光参数。结果显示:与不施用钾肥处理(NP)相比,施用化学钾(NP+K)和麻渣(NP+ST)2处理对剑麻叶片宽度、单叶生物量、增叶数、总叶片生物量有显著的影响。施用麻渣处理(NP+ST)和施用化学钾肥处理(NP+K)对剑麻生长指标没有显著差异。麻渣的某些养分元素对提高剑麻叶片的叶绿素含量有显著效果。施麻渣配施1/2化学钾肥处理(NP+ST+1/2K)具有最大的光能转化效率和最强的耐受性,显著提高了剑麻的生物量;在当前钾肥推荐用量[100 g/(株·年)]下,施用麻渣可以节省一半的化学钾肥用量[50 g/(株·年)]。麻渣配施1/2化学钾肥处理(NP+ST+1/2K)对剑麻具有最大的光能转化效率和最佳的生长效果。建议在剑麻大田生产中,施足麻渣有机肥,配施化学钾肥推荐用量的50%,即50 g/(株·年)。 相似文献
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教师资格制度是国家对教师实行的一种法定的职业许可制度,它有利于我国教师资格认定的规范化、科学化、法制化,但同时也存在学历要求偏低、测试项目缺失、认证机构单一等问题,应从提高学历要求、完善考试制度、成立专业团队等方面来完善教师资格制度. 相似文献
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为了探究铁皮石斛叶对蛋鸡生产性能、蛋品质、脏器指数和血清生化指标的影响,试验选用健康的19周龄京红一号蛋鸡240只,随机分为3个处理组,分别为：对照组、1 200 mg/kg铁皮石斛叶组、3 600 mg/kg铁皮石斛叶组,采用单因素试验设计,试验期16周。结果表明,与对照组相比,在日粮中添加铁皮石斛叶干粉对京红一号蛋鸡的产蛋率、平均蛋重和料蛋比均无显著影响,说明铁皮石斛叶不影响蛋鸡的产蛋性能;3 600 mg/kg铁皮石斛叶能够显著降低31～34周龄蛋鸡的日平均采食量和27～34周龄鸡蛋破损率,显著增加19～22周龄的蛋黄颜色及血清总蛋白水平和球蛋白水平;1 200 mg/kg铁皮石斛叶能够显著降低31～34周龄蛋鸡的日平均采食量和31～34周龄的鸡蛋破损率,显著提升27～30周龄蛋鸡所产鸡蛋的蛋黄颜色和蛋黄比例、31～34周龄蛋鸡所产鸡蛋的哈氏单位;与其它两组相比,3 600 mg/kg铁皮石斛叶干粉组极显著提高了蛋鸡的脾脏指数。说明在饲粮中添加铁皮石斛叶干粉不影响蛋鸡的产蛋性能,但可以改善蛋品质和免疫能力。 相似文献
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