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DNA条形码(DNA barcoding)技术是一种利用生物基因组内短遗传标签进行分类鉴定的方法。桑黄自古以来是一种名贵中药材,而市售桑黄主要依托简单的形态鉴定造成混淆众多。近年来大量研究表明,桑黄类真菌种类至少有7个种,并且其药效也不尽相同。【目的】为更准确、高效对桑黄类真菌进行鉴定,本研究以采集自西藏、吉林和浙江的3种桑黄子实体为材料,筛选最佳DNA条形码与相应PCR条件。【方法】利用组织分离获得3种桑黄纯培养菌株,分别编号为1713、1714和HS菌株。利用ITS、NL、rpb1、rpb2和ef1-α等7组DNA条形码分别对3种桑黄进行PCR扩增、测序、比对和发育树分析,并结合形态学特征,确定其最适DNA条形码和分类学地位。【结果】结果表明,ITS和NL条形码对3种桑黄均能够获得单一目的条带;rpb1Y、rpb2B和rpb2Y条形码特异性低,扩增后获得多个条带;而rpb1B和ef1-α条形码均无法获得条带。通过多序列比对,结合形态分析,确定1713菌株为桑黄纤孔菌(Inonotus sanghuang),而1714和HS菌株均为鲍姆纤孔菌(Inonotus baumii)。【结论】本研究确定ITS和NL为桑黄分子鉴定的最佳DNA条形码,其PCR最适退火温度范围分别为58～59℃和49～50℃,为桑黄真菌快速鉴定提供参考依据。 相似文献
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在Seinhorst的线虫制片方法基础上,提供一种更简便、快速的植物线虫杀死、固定和脱水方法.通过对垫刃目胞囊线虫属(Heterodera)的雄虫和二龄幼虫、螺旋线虫属(Helicotylenchus)和潜根线虫属(Hirschmanniella)以及矛线目的剑线虫属(Xiphinema)和长针线虫属(Longidorus)等不同类群线虫的固定、脱水和制片观察,发现在线虫分类和鉴定中起重要作用的一些形态特征(如垫刃类线虫口针的形状、侧区侧线数和雄虫交合伞及长针类线虫的导环位置、齿针基部和尾部形态等特征)均可以取得较好的效果. 相似文献