圆斑星鲽促性腺激素释放激素基因克隆及表达特性

采用RACE技术,在圆斑星鲽(Verasper variegatus)脑中克隆到3种GnRH基因的cDNA序列: cGnRH-Ⅱ、sGnRH和sbGnRH.每种GnRH都包括1个信号肽、1个Gly-Lys-Arg连接序列和1个GnRH相关肽.其中, cGnRH-Ⅱ的cDNA全长为568 bp,编码85个氨基酸, ORF为255 bp,5′UTR为141 bp,3′UTR为169 bp.sGnRH的cDNA全长为457 bp,编码90个氨基酸, ORF为270 bp,5′UTR为41 bp,3′UTR为143 bp.sbGnRH的cDNA全长为381 bp,编码98个氨基酸, ORF为294 bp,5′UTR为48 bp,3′UTR为36 bp.分析了3种GnRH基因的编码氨基酸序列与其他脊椎动物的同源性,圆斑星鲽 GnRH 与鲽形目鱼类氨基酸同源性最高,其次为鲈形目鱼类.对3种 GnRH 基因的系统进化分析表明,圆斑星鲽 GnRH 基因与其他鲽形目鱼类亲缘关系最近,其次为鲈形目、鲑形目和鳗鲡目鱼类.荧光定量PCR分析表明,3种GnRH基因都在脑中表现出最高表达水平且具有性别特异性表达模式:雌性中不同组织的 GnRH mRNA 表达水平都相应高于雄性.组织表达分析表明, cGnRH-Ⅱ的 mRNA 仅在脑中表达,而sbGnRH在各个组织都有表达, sGnRH仅在脑、垂体和性腺中表达.脑中sbGnRH mRNA的表达水平在卵巢成熟过程中变化显著(P<0.05),而其他两种GnRH的mRNA表达水平变化不显著(P>0.05).本研究首次在圆斑星鲽脑中克隆到3种GnRH基因,其组织和季节表达水平变化表明sbGnRH可能是圆斑星鲽生殖调控的关键GnRH类型,本结果可为圆斑星鲽生殖调控机制和人工繁育技术研究提供理论支撑.     

一个水稻金黄色颖壳与节间基因的定位

在粳稻品种浙粳88种子经60Co γ射线辐照的后代中,筛选得到1个金黄色颖壳与节间基因突变体,将该突变体命名为浙粳88GH,该突变体的颖壳和茎间与野生型浙粳88相比具较明显的金黄色。遗传分析表明,该突变体性状受1对隐性核基因控制,暂将该突变基因命名为gold hull 6(gh6)。以该突变体与籼稻珍汕97B杂交的F₂作为定位群体,采用SSR分子标记和隐性群体分析法,将gh6基因初步定位在第2号染色体短臂端的分子标记RM3732和RM6378之间,遗传距离分别为21.2cM和28cM。然后,进一步扩大F₂群体将gh6基因定位在分子标记Indel3和Indel4之间约90kb内。     

迟缓爱德华氏菌SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法的建立及其应用

根据克隆得到的迟缓爱德华氏菌gyrB基因序列设计并合成一对特异性引物,通用性和特异性检测结果显示所设计的引物具有良好的种间特异性和种内通用性,构建含gyrB基因的重组质粒作为标准品,经过反应体系优化后建立了检测迟缓爱德华氏菌的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法线性关系良好,在Tm为63℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个单特异峰,扩增所得标准曲线为y=-3.32x 39.38,相关系数为0.998,扩增效率为1.00,最低能检测到60个拷贝。应用建立的方法对人工感染的大菱鲆病样进行了检测,三个被检样品均呈阳性反应,证明该方法具有较好的适用性。实验结果表明所建立的实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量的优点,可用于迟缓爱德华氏菌病的快速检测。     

水平对置二冲程活塞发动机工作特性仿真研究

利用Comsol软件对水平对置二冲程活塞发动机工作特性进行仿真.首先,确定发动机的曲柄连杆机构的运动形式以及各部分的受力情况;再通过设定7组不同摇臂数据对置活塞发动机的曲柄连杆机构,同时,确定曲柄连杆机构的其它部分数据;然后,利用Comsol软件建立水平对置二冲程活塞发动机仿真模型并对构件运动进行仿真分析,得到曲轴转角...     

某驱动桥壳有限元分析

以某驱动桥壳为研究对象,针对驱动桥壳,在不同状态下进行力学分析,使用CATIA建立模型,通过ANSYS Workbench软件进行静力学分析和自由模态分析.结果表明:该驱动桥壳在不同受力状态下,其强度、刚度均满足要求,且不发生共振现象,该结构符合设计要求.     

羊捻转血矛线虫病对贵州白山羊血液指标的影响

为了了解贵州白山羊的健康状况,给疾病诊断和预防提供依据,本试验对10只12月龄贵州白山羊血液指标和捻转血矛线虫感染强度进行测定,试验数据采用SPSS19.0软件进行分析。结果表明:高感染组血液指标与正常值范围存在一定的差异,低感染组中各指标值均在正常值范围内。对所测试的10项血液指标进行分析,WBC和LYM差异显著,RBC、HGB、MID、LYM#、HCT、MCV、MCH、MCHC差异极显著,说明贵州白山羊血液指标的变化与捻转血矛线虫的感染强度有关。     

注射猪瘟疫苗对杜洛克母猪产仔性能的影响

为了研究猪瘟疫苗对杜洛克母猪产仔性能的影响,试验采用单因素五水平设计,按批次选择44头杜洛克母猪注射猪瘟疫苗作为试验组,选择44头杜洛克母猪注射相同剂量生理盐水作为对照组,每组分为5个胎次(1~5胎),分析不同胎次间杜洛克母猪总产仔数、总活仔数、总健仔数和窝均体重之间的差异。结果表明:注射猪瘟疫苗对1胎和4胎仔猪窝均体重有显著影响(P0.05),对其余胎次无显著影响(P0.05);试验组各胎次间窝均体重差异不显著(P0.05),而对照组各胎次间窝均体重差异显著或不显著(P0.05或P0.05);胎次和猪瘟疫苗对窝均产仔数、窝均健仔数和窝均活仔数均无显著影响(P0.05)。说明注射猪瘟疫苗对杜洛克仔猪窝均体重有影响。     

一个水稻温度敏感失绿突变体的遗传分析及分子定位

从粳稻品种"嘉花1号"60Coγ射线辐照的后代中筛选到一个水稻温敏感失绿突变体tcm12,在20℃条件下的该突变体第2、3幼叶表现为失绿,第4叶开始完全转绿。而24℃以上条件其表型与野生型嘉花1号一致,呈正常绿色,表明其幼苗叶色表现出失绿是一种温度敏感性。透射电镜观察结果表明,突变体叶绿体在20℃条件下发育不全,而在32℃条件下正常发育。遗传分析表明,突变体的温度敏感失绿性状受1对隐性核基因(tcm12)控制,利用SSR和InDel分子标记以及广占63S/tcm12后代中76株F2突变型植株,将tcm12基因初定位在水稻第12号染色体长臂上的RM519和ID22406之间,然后,进一步利用目标区域内分子标记多态性较好的9311/tcm12组合的F2中分离出的157株突变型植株,最终将tcm12基因锁定在分子标记ID21199和ID21436之间的237kb内。本研究结果为今后对该基因的克隆和功能分析奠定了基础。     

米糠对水中Cr(Ⅵ)的吸附机理

利用米糠吸附水中Cr(Ⅵ),分别对总Cr、Cr(Ⅵ)浓度和pH进行了定量测定,探讨了米糠对Cr(Ⅵ)吸附机理.结果表明,Cr(Ⅵ)是以HCrO4-形态通过静电吸引作用被吸附,在吸附过程中同时存在氧化还原和离子交换的作用机理.另外,分析了米糠经化学修饰前后的吸附效果和红外光谱,发现经化学修饰后的米糠对Cr(Ⅵ)吸附能力下降,且米糠中的胺基和羧基在吸附过程中起重要作用.     

澳洲青苹苹果虎皮病关键预警基因的筛选

【目的】筛选澳洲青苹苹果果实贮藏过程中虎皮病发生前的关键表达基因，为澳洲青苹苹果虎皮病发生预警研究提供理论依据。【方法】以澳洲青苹苹果果实为试材，于商业采收期采收并于低温（0±0.5℃）下长期贮藏，监测果实色泽和乙烯释放量，同时统计冷库贮藏期及冷藏后货架期的虎皮病发病情况，并采用实时荧光定量PCR技术检测与澳洲青苹苹果虎皮病发生相关基因的表达水平。【结果】澳洲青苹苹果低温贮藏50 d时，果实在冷库中未发病，置于货架期2 d时，果实出现轻微的虎皮病症状；低温贮藏70 d时，果实在冷库中开始发病。基于前人研究及转录组数据，鉴定到MdACO、MdAFS、MdCAT1、MdCAT2、MdPAL1、MdPAL2、MdC3H、MdPPO、MdPOD1、MdPOD2与澳洲青苹苹果虎皮病相关；通过实时荧光定量PCR技术进一步分析，确定MdAFS、MdC3H和MdCAT1的表达量在虎皮病发生前10 d，即贮藏第40天急剧上升，随后呈现下降的趋势，可作为虎皮病发生的预警基因。【结论】MdAFS、MdC3H和MdCAT1可作为澳洲青苹苹果贮藏期虎皮病发生的关键预警基因。