bcl-x基因在两株鼻咽癌细胞中的转录和表达

目的：研究细胞凋亡相关基因bcl-x在人鼻咽癌高分化上皮细胞株CNE-1和低分化上皮细胞株CNE-2Z中的转录和表达。方法：分别抽提两种细胞的总RNA，通过逆转录PCR(RT-PCR)检测bcl-x基因的转录；同时制备两种细胞的蛋白质样品。经免疫印迹检测bcl-x基因的表达。结果：在两株鼻咽癌细胞中均检测到bcl-xL的转录和表达。但没有bcl-xs的表达。结论：bcl-xL在人鼻咽癌高、低分化上皮细胞株中均有表达。但表达量没有明显差异提示其表达可能与细胞分化程度无关。     

高效液相色谱法同时检测丙戊酸等5种抗癫痫药物在人血清和脑脊液中的浓度

本文报道一种用高效液相色谱同时检测人血清及脑脊液中丙戊酸、扑痫酮、苯巴比妥、苯妥英钠、卡马西平5种抗癫痫药物的方法.反相C_(18)柱,乙腈/甲醇/磷酸盐缓冲液为流动相,检测波长210nm,样品用硫酸铵饱和的1mol/L盐酸及少量乙腈处理。范围内线性关系好,日内、日间变异小于5％.方法简便、快速、高灵敏度,适合于药代动力学研究及临床监测.     

高效液相色谱法简易测定血清中氨甲喋呤

氨甲蝶呤(MTX)主要用于治疗白血病、绒毛膜上皮癌、肺癌、乳腺癌及恶性淋巴瘤等。但MTX毒性反应严重,且其血药浓度个体差异大。监测MTX的血药浓度,不但可以指导临床安全用药,增强疗效,尤其在使用大剂量MTX/甲酰四氢叶酸(CF)解救疗法治疗时,还可指导救援剂的合理使用。     

Lipofectin介导bcl-xL反义寡核苷酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞的影响

目的：探讨阳离子脂质体Lipofectin对bcl-xL反义寡核苷酸进入CNE－2Z细胞的影响。方法：采用阳离子脂质体Lipofectin介导bcl-xL反义寡核苷酸转染CNE－2Z细胞，应用MTT法观察Lipofectin介导前后对CNE－2Z增殖的影响；RT－PCR检测处理前后bcl-xL mRNA表达水平。结果：Lipofectin介导bcl-xl反义核酸可提高反义核酸对细胞的增殖抑制率；Lipofectin介导bcl-xL反义核酸可增强反义核酸下调bcl-xL mRNA表达水平的能力。结论：Lipofectin可促进反义核酸转染进入细胞。     

纯化半边旗抗肿瘤有效成分5F的新方法

目的：寻找分离纯化半边旗抗肿瘤有效成分5F的新方法。方法：提取分离出5F精提物后,以H40型硅胶为填料,采用不同的溶剂系统石油醚和丙酮的混合液,氯仿和甲醇的混合液洗脱,分离纯化5F。结果：经薄层色谱鉴定,可以得到纯的5F。结论：分别采用两种不同的溶剂系统洗脱硅胶柱,可以有效地纯化半边旗抗肿瘤有效成分5F。     

肌酐毛细管区带电泳多次进样技术的研究

目的 :探讨肌酐的毛细管区带电泳多次进样技术。方法 :以肌酐、吡啶为例 ,采用 3 6cm× 5 0 μm(i .d)涂层柱 ,0 .1mmol/LpH2 .5的磷酸缓冲液 ,在线多波长检测。多次进样技术是采用改变应用电压、电泳时间两种模式。 结果 :用电压控制模式 ,连续进样五、六个样品总分析时间分别为 10min、11min ,比单次进样分别节省 15min、19min左右 ;采用内标法定量及 5次进样技术 ,肌酐与吡啶的峰高比值的变异系数小于 6.0 % ,且在肌酐浓度为 5～ 80mg/L范围内 ,肌酐浓度与肌酐同吡啶的峰高比值的线性关系非常好 (r =0 .9996)。结论 :多次进样技术采用电压控制模式简便有效。最大进样次数为单次进样分析中诸相邻峰分离度中最小值 (取整数 )。     

原花青素对脂多糖诱导的环氧合酶-2表达的抑制作用

以脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞为模型,研究原花青素对LPS诱导的小鼠RAW264.7细胞中环氧合酶-2(COX-2)mRNA转录的抑制机制。采用RT-PCR法测定原花青素对LPS诱导的RAW264.7细胞中COX-2mRNA转录的影响,采用Western blot和免疫组化法考察原花青素对LPS诱导的RAW264.7细胞核转录因子κB(NF-κB)亚基p65(NF-κB/p65)及NF-κB结合蛋白(I-κB)表达的影响。结果发现LPS处理RAW264.7细胞可以明显上调COX-2 mRNA的表达,同时降低胞质蛋白I-κB的表达水平,增加NF-κB的水平。原花青素对RAW264.7细胞中COX-2 mRNA的转录有较强抑制作用,抑制NF-κB/p65的表达及I-κB的降解,原花青素可能是通过抑制NF-κB/p65的表达及I-κB/p65的降解而抑制COX-2的表达。     

毛细管胶束电动色谱法测定血清中华法林浓度的评价

目的：毛细管电泳是近年发展起来的一种新的分离分析技术，其最大特点是分辨能力强，快速，样品和试剂消耗量小。该技术在体液药物分析领域的应用还有待进一步的开发。本文建立了毛细管胶束电动色谱分析血液中华法林药物浓度，并与反相高效液相色谱法进行了比较，旨在为血药浓度检测开辟一种新的途径。方法：ＢｉｏＦｏｃｕｓ３０００型全自动毛细管电泳仪，配有二极管阵列检测器，毛细管有效长４５．５ｃｍ。用二氯甲烷提取血清中华法林，有机溶剂于４０℃自然挥干，残渣用５０μｌ电泳缓冲液溶解。电泳缓冲液由２５ｍｍｏｌ／Ｌ硼酸盐，２５ｍｍｏｌ／Ｌ十二烷基硫酸钠，１０ｍｍｏｌ／Ｌ氯化钠（ｐＨ９．０）组成。５－乙基－５－ｐ－甲苯基巴比妥酸为内标，操作电压１５Ｋｖ，２１０ｎｍ波长检测。结果：华法林出峰时间为６．１ｍｉｎ，血中内源性物质不干扰测定。日内ＲＳＤ１．４％～６．２％，日间ＲＳＤ１．４％～４．７％，在０～１０ｍｇ／Ｌ范围内呈线性，最低血清华法林检测浓度为０．０３ｍｇ／Ｌ。测定结果与高效液相色谱法进行了比较，两种方法有很好的相关性，ｒ＝０．９９６７（Ｐ＞０．１）。结论：毛细管胶束电动色谱法精密度、准确度高、专一性强、快速，是一种较理想的血药浓度检     

毛细管电泳法测定人血清中草酸浓度

在已报道的草酸测定方法中，主要有比色法、酶分析法、气相色进法及高效液相色谱法，而用毛细管电泳法测定人血清中草酸含量国内报道甚少，为此，笔者作了研究，现将结果报道如下：1材料与方法1．1仪器Bio-Rad3000毛细管电泳仪，石英毛细管柱25μm（id）×24cm（涂层、Bio－Rad公司）1．2样品预处理取血清1ml，加丙二酸作内标，加4满浓HCl，再加0．5gNaCl和0.1NHCl0．5ml到血清中，振荡后加入2ml乙酸乙酯，振荡1min，3000r／min离心，转移有机层，再用2ml乙酸乙酯重复萃取一次，合并两次有机层，在35C通空气吹干，残渣用10VI电泳缓冲…