一步法RT-PCR快速检测鸡新城疫病毒强毒株

本文参照NDV融合蛋白(F)基因序列设计引物,通过一步法RT-PCR扩增到NDV强毒株的170bp大小的特异条带。试验中未检出NDV弱毒株、IBV、AIV、IBDV的RNA,能够检出NDV尿囊液毒的最低滴度为10-5稀释度(相当于103.7EID50病毒量)。对山东省不同地区于1997至2003年所分离的21个NDV强毒株检测全为阳性,而6个NDV弱毒株全为阴性。整个实验操作从病毒核酸提取到判定结果,在5h内即可完成。实验结果表明,该方法特异、敏感,适用于强毒感染鸡群的快速检测     

一例进口皮张炭疽杆菌ASCOLI反应和PCR检测双假阳性的确认

炭疽杆菌是公认的严重的人兽共患病之一,是进出口检疫的法检项目。作为我国生牛皮进口国之一的美国,随着近几年美国发生的恐怖分子的炭疽邮件事件及美国炭疽病的发生,对炭疽病的风险分析研究已经在世界各国引起强烈关注。根据行业标准SN/T1700—2006即《动物皮毛炭     

鸵鸟禽副粘病毒II型抗体阳性的检出

１９９５～１９９６年对从津巴布韦，美国，荷兰引起的５批共３０９头鸵鸟进行了检疫；颈静脉采血，分离血清，进行禽副粘病毒Ⅱ型的血凝抑制试验，共检禽副粘病毒Ⅱ型阳性８头，阳性率为２．６％，然后将阳性血清于５６℃来活３０ｍｉｎ平行做凝抑制试验，结果发现１份血清中抗体下降，１完全消失，其余不变，将７份血清中加入等量的红血球于室温上降感作１ｈ，其抗体滴度全部升高且均达到阳性标准。     

基因芯片技术检测5种马病毒的研究

通过分子克隆技术获得马疱疹病毒1型(Equine herpesvirus 1, EHV1)、马动脉炎病毒(Equine arteritis virus , EAV)、马流感病毒(Equine influenza virus, EIV)、马传染性贫血病毒(Equine infectious anaemia virus , EIAV)和东部马脑脊髓炎病毒(Eastern equine encephalomyelitis virus, EEEV)等5种病毒各一段高度保守的特异性基因片段，用芯片点样仪逐点分配到处理过的玻片上，制备成检测芯片。提取样品中的RNA，进行反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交，对杂交结果进行扫描检测和计算机软件分析。结果显示，制备的基因芯片可同时检测和鉴别上述5种病毒，可检测到阳性杂交信号的最高稀释度为10-6的病毒液，约25个病毒DNA拷贝，但其它病毒材料未见红色荧光信号，证明了本方法的特异性。在进口马的隔离检疫期间，采集马鼻肺炎、马动脉炎中和抗体阳性但病毒分离阴性马匹的白细胞悬液，分别在EHV1和EAV位点处可检测到阳性杂交信号。证明基因芯片技术不但快速、准确和敏感，而且可同时进行多种病毒的检测。     

免疫亲和柱净化—HPLC法测定植物油中玉米赤霉烯酮

建立了免疫亲和柱净化—高效液相色谱荧光法检测植物油中玉米赤霉烯酮的分析方法。方法的定量检出限为9.5μg/kg,相对标准偏差低于7.2%,回收率为89.2%～111.5%。该方法简便快速、灵敏准确、重现性好,可以用于植物油中玉米赤霉烯酮的定量检测。     

2008年国际马病疫情动态

2008年在世界各国发生了规模不等、强度不一的多起马病疫情,如马接触传染性子宫炎(美国)、马流感(印度、埃及、日本、澳大利亚、中国、蒙古)、马鼻疽(巴西)、马梨形虫病(美国)、马传染性贫血(法国、德国)、西尼罗病毒病(意大利、奥地利、法国、阿拉伯联合酋长国)、马病毒性动脉炎(以色列、克罗地亚)、非洲马瘟(埃塞俄比亚)、马鼻肺炎(以色列)。一些国家首次出现马病疫情,如马病毒性动脉炎(以色列、克罗地亚)、西尼罗病毒病(奥地利、阿拉伯联合酋长国)、马流感(澳大利亚)。马流感在亚洲国家广泛流行,西尼罗病毒病在欧洲国家时有发生,应引起我国兽医部门和出入境检验检疫部门的高度重视,严防疫情疫病传入传出,特别是防止新出现的人兽共患病(西尼罗病毒病)传入国境,保护我国畜牧业的健康发展。     

鸡传染性贫血

鸡传染性贫血 (ＣｈｉｃｋｅｎＩｎｆｅｃ ｔｉｏｕｓＡｎｅｍｉａ，ＣＩＡ)是由鸡传染性贫血病毒 (ＣｈｉｃｋｅｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＡｎｅｍｉａＶｉｒｕｓ，ＣＩＡＶ)引起的以雏鸡再生障碍性贫血、全身淋巴组织萎缩、皮下和肌肉出血及高死亡率为特征是一种传染病 ,又称为出血性综合症或贫血性皮炎综合症 ,是继鸡传染性法氏囊病之后又一种重要的免疫抑制性疾病。１病原学ＣＩＡＶ属于环状病毒科病毒基因组由１个单链环状ＤＮＡ组成 ,分子量２．３ｋｄ。纯化病毒仅含一个多肽 ,分子量５０ｋｄ。电镜下ＣＩＡＶ呈球形或六角形 ,直径约为…     

进口鱼粉和肉骨粉病原性沙门菌的分离鉴定及其16SrRNA序列的同源性分析

从进口的17批饲料用鱼粉、肉骨粉样品中分离得到4株细菌，采用生化和血清学方法鉴定，提取其DNA，用细茵16SrRNA基因通用引物进行PCR扩增，并对PCR扩增产物测序，将测定的16SrRNA序列在NCBI数据库中进行序列同源性比较，确证为沙门菌，其中样品2、8与鼠伤寒沙门菌的序列同源性大于999／6，样品10、11与伤寒沙门菌的序列同源性大于99％。由此可以认定样品2、8为鼠伤寒沙门菌，样品10、11为伤寒沙门菌。     

从原野库蠓中分离到一株RNA病毒

1992年9月从安徽省某地黄牛体表采集的原野库蠓雌虫经细胞培养连续传代分离到一株病毒。初步试验结果表明该分离毒株无囊膜，呈球形，大小约为24～25nm。分离株的最适培养温度为37℃，对Vero细胞系、C6／36细胞系的敏感性无明显差异。药物抑制试验结果证明该分离毒林为RNA病毒。分离病毒能引起1－2日龄乳鼠发病和死亡。     

Ⅰ型鸭肝炎病毒PCR-DHPLC检测方法的建立

用RT-PCR结合变性高效液相色谱技术(DHPLC),建立Ⅰ型鸭肝炎病毒的快速检测方法.根据获得的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV I)RNA聚合酶基因序列,应用Primer Premier5.0软件设计了1对引物,RT-PCR扩增产物经变性高效液相色谱进行快速检测.以正常鸭胚尿囊液、正常鸭肝组织、鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅细小...