橡胶死皮相关液泡型水通道蛋白基因TIP1的克隆与序列分析

[目的]死皮是指橡胶树（Hevea brasiliensis）产排胶过程中出现的一种割线症状,它会造成橡胶减产甚至完全绝收.研究对一死皮相关的水通道蛋白（Aquaporin,AQP）基因进行克隆和序列分析,以探讨AQP在死皮发生过程中的作用.[方法]基于一条在死皮植株中下调表达的EST,研究采用电子克隆和RT-PCR相结合的方法从橡胶树的树皮中扩增出HbTIP1 774 bp的cDNA,在此基础上采用生物信息学对基因的序列特征、编码蛋白的理化特性及进化关系进行了分析.[结果]该cDNA包含759 bp的ORF、8 bp的5＇UTR和7bp的3＇ UTR;基因预测编码252个氨基酸,理论分子量为25.88 kD,等电点为4.96.生物信息学分析显示,HbTIP1含有1个保守的MIP结构域,6个跨膜螺旋,液泡膜定位,可归为水通道蛋白（Aquaporin,AQP）家族TIP亚族.同源分析显示,Hb TIP1与可可（Theobroma cacao）、人参（Prunus persica）、橙子（Citrus sinensis）和蓖麻（Ricinus communis）中同源蛋白的相似性都在90％以上,显示出高度的保守性.[结论]该研究为下一步揭示AQP调控死皮发生机制创造了条件.     

蓖麻WRKY14基因的鉴别与信息分析

基于已公布的蓖麻基因组序列,利用电子克隆技术纠正了拼接错误的WRKY基因序列,获得蓖麻WRKY14基因信息.结果表明:该基因含有3个内含子,编码318个氨基酸的多肽,理论相对分子质量为35.49×103,等电点为8.64,总平均亲水性为-0.803,不稳定系数为46.88,核定位,属于不稳定的亲水性核定位蛋白;该蛋白含有1个WRKY结构域,其基序为WRKYGQK_X13_C_X5_C_X23_H_X1_H,保守内含子位于199位的K和200位的V之间,可归为Ⅱ大类a亚类;RcWRKY14的启动子区含有多种激素和胁迫应答相关元件Rc WRKY14在叶片、花、胚乳和种子中都有表达,其中在花中的表达量最高,种子和叶片中次之,胚乳中最低.     

橡胶树胶乳死皮相关蛋白的鉴定及分析

橡胶树死皮(tapping panel dryness,TPD)是一种复杂的生理综合症,严重制约了天然橡胶产量的提高。为了分离鉴定橡胶树胶乳中与死皮发生密切相关的蛋白,采用双向电泳技术(2-DE)比较了其健康树和死皮树胶乳蛋白质组的差异。结果显示,在健康树和死皮树蛋白图谱上分别检测到1 158±25和1 173±30个蛋白点,其中54个蛋白点差异表达。经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析和数据库检索后,成功鉴定16个蛋白,这些蛋白中的3-磷酸甘油醛脱氢酶、紫色酸性磷酸酶、动力相关蛋白、烯醇酶以及小橡胶粒子蛋白等可能在死皮发生过程中具有关键作用。为从分子水平上阐明橡胶树死皮发生机制提供了一定的理论依据。     

木质纤维素酶高产菌株的筛选和鉴定

从海南省乐东、三亚和儋州等市县采集的23份土样中粗筛获得186株具有纤维素降解能力的菌株,11株具有木质素降解能力的菌株,经进一步筛选获得纤维素酶高产菌和木质素酶高产菌各2株,编号分别为12—4、3—5、6—1和3—3。在以香蕉茎叶粉为主要基质的培养基中30℃、120r/min振荡培养5d,12—4和3—5分解羧甲基纤维素钠(CMC)的酶活分别达到979U和226U,分解滤纸(FP)的酶活分别为46.4U和15.1U,6—1和3—3的木质素酶活分别为32.8U和16.4U。经初步鉴定,这些菌株分别属于Trichodermasp.,Penicillumsp.,Streptomycesflavus和ChoanephoraCurreysp.,可用于发酵香蕉茎叶生产饲料的进一步研究。      

刺激割制对PR107中龄橡胶树生胶质量及产胶生理特性的影响

用中龄橡胶树PR107为材料,用5种割胶制度,即S/2d2,S/2d/3+ET2.0%,S/2d/4+ET2.5%,S/2d/5+ET3.0%和S/2d/6+ET3.5%连续割胶3a,比较了其生胶质量、胶乳生理参数、叶片光合作用能力等指标。结果表明∶（1）4种乙烯利刺激割胶制度间的生胶质量（灰分含量、氮含量、挥发物含量、塑性初值、塑性保持率、平均分子质量和门尼粘度等7项指标）无显著差异;（2）与传统的S/2d2割制相比,乙烯利刺激割胶的生胶质量无显著的变化;（3）1个涂药周期内不同割胶刀次的生胶质量无显著差异,而不同季节的生胶质量则有显著差异,但并非刺激割制所致;（4）乙烯利刺激割制对橡胶树的光合作用能力———叶片的净光合速率（P）、蒸腾速率（E）和气孔导度（C）等均没有显著的影响;（5）在生产上全面采用这些刺激割胶制度后,PR107的产排胶生理状况是稳定的,并没有出现与先期研究结果不同的变化趋势。     

木霉菌株挥发性物质拮抗尖孢镰刀菌的效果及其鉴定

采用对扣法研究11株木霉菌株挥发性物质对尖孢镰刀菌的抑制效果,采用固相微萃取和气质联用技术对挥发性物质进行成分分析。结果表明,不同木霉菌株产生的挥发性物质的种类和含量差异较大。11株木霉共检出257种挥发性物质,均能检测到六甲基环三硅氧烷、八甲基环四硅氧烷两种化合物;聚类分析在相关系数距离为19时,可将11株木霉菌株归为三大类;257种挥发性物质可简化为3个主成分,包含30种挥发性物质,不同木霉挥发性物质主成分得分与拮抗尖孢镰刀菌的抑菌率之间极显著相关,表明11株木霉菌株对尖孢镰刀菌均有抑制作用。     

蛋白质组学研究技术与展望

蛋白质组学是继基因组学之后兴起的一门前沿学科。本文简要介绍蛋白质组学的概念和研究意义,以及蛋白质组学的主要研究技术,并展望蛋白质组学的技术前景。     

PR107中龄开割橡胶树最佳割胶制度

采用单位面积和单株产量与劳动生产率相结合的相对经济效益评价方法，对橡胶树PR107中龄开割树5种不同的割胶制度——S／2 d／2、S／2 d／3 ET2．00％、S／2 d／4 ET2．50％、S／2 d／5 ET3．00％、S／2 d／6 ET3．50％连续3a的试验结果进行分析评价，结果表明：当割胶劳动报酬占产值的比例(Ⅰ值)在28％以下时，S／2d／3 ET是中龄PR107的最佳削制：当Ⅰ值超过29％时，其最佳割制为S／2 d／6 ET。此外，试验结果还表明，采用乙烯利刺激的4种割制涂药后，同一割次的产量无显差异：不同割制间，对茎围生长、死皮停割树的增加等副性状的影响无显差异。     

橡胶树胶乳全蛋白的提取及双向电泳分析

以橡胶树无性系RRIM600为材料,采用TCA（三氯乙酸）-丙酮沉淀法提取胶乳全蛋白,17cmpH5～8固相pH梯度预制干胶条和快速银染法对提取的蛋白进行分离和染色,所得到的电泳图谱背景清晰,横条纹和竖条纹少,且蛋白点数量多。通过本研究获得了高分辨率的胶乳全蛋白双向电泳（2-DE）图谱的方法,为进一步开展橡胶树胶乳全蛋白质组学研究奠定了基础。     

海南假臭草地理群遗传多样性RAPD分析

对海南省18个市(县)的假臭草地理种群进行RAPD-PCR聚类分析,将海南假臭草地理群分为5个类群:其中澄迈、海口、文昌、临高、儋州、昌江为一类群,东方、乐东、三亚、保亭、五指山、琼海、万宁、陵水、定安为一类群,屯昌、白沙、琼中各为一个类群。通过NTsys-pc2.10数据处理,分析各假臭草地理群的遗传相似系数,其遗传相似系数范围在0.539 682 5~0.904 761 9之间,说明快速进化是假臭草生物入侵的一种手段。