CRISPR/Cas9系统编辑水稻Wx基因

【目的】 直链淀粉含量与稻米品质密切相关。Wx基因是控制水稻直链淀粉合成的主效基因,通过对Wx基因定点编辑以获得稳定遗传、直链淀粉含量适宜的突变体。【方法】 构建CRISPR/Cas9表达载体pGK03-Wx-gRNA (靶点1和2分别在Wx基因第1和第2外显子),利用工程菌EHA105遗传转化超级稻楚粳27,潮霉素筛选获得转化株系,对转化株系及其后代进行分子检测、测序、基因表达和遗传稳定性分析以及直链淀粉含量测定。【结果】 获得9个独立的T₀代转化株系,靶点1(L1~L5) 5个株系,突变频率100%,靶点2(L6~L9) 4个株系,突变频率75%。由T₀代突变体衍生出T₁和T₂代株系,测序发现T₀、T₁和T₂代株系出现缺失(单、双、多碱基缺失)和单碱基插入两种突变类型;T₀至T₁代部分株系(L1、L2、L3和L6)发生再编辑,T₁至T₂代遗传稳定。与野生型相比,突变株系RNA水平Wx基因表达量显著下降(P<0.01),稻米直链淀粉含量显著降低(P<0.01),从17.5%降到1.93%。【结论】 利用CRISPR/Cas9系统成功编辑水稻Wx基因,获得了稳定遗传、低直链淀粉含量的突变体,为稻米品质改良提供了材料。     

高职院校“农产品质量检测技术”课程教学改革实践与探讨

针对高职院校"农产品质量检测技术"课程教学中存在的问题,结合课程特点,从教学内容、教学方法手段、实践教学和考核体系等方面进行了改革与实践,提高"农产品质量检测技术"课程教学效果及学生的职业能力。     

重庆地区家兔呼吸道疾病病原调查

为了研究重庆地区家兔呼吸道疾病的病原分布及感染情况,2012年8月份—2014年6月份,在重庆地区26个兔场共采集疑似家兔呼吸道病病例206份,分离得到病原菌41株,采用PCR方法对16S r DNA进行扩增,并进行BLAST比对。结果表明:分离得到巴氏杆菌23株,波氏杆菌14株,肺炎克雷伯菌1株,葡萄球菌3株。     

H3N2亚型猪流感病毒重庆株的分离、鉴定、基因组测定及序列分析

从猪流感疑似病例中分离鉴定猪流感病毒,并对病毒进行全基因组测序及其序列的分析。采用鼻棉拭子法从猪流感疑似病猪的鼻中收集病样,制成病毒悬液,经SPF鸡胚增殖培养和纯化。采用红细胞凝集、血凝抑制和神经氨酸酶抑制试验进行病毒亚型的判定,并作电镜观察。运用RT-PCR法扩增病毒的8个基因片段,分别克隆到pMD18-T载体,进行全基因组测序及序列分析。结果表明,获得1株猪流感病毒,经血凝、血凝抑制和神经氨酸酶抑制试验,判定为H3N2亚型,命名为A/swine/Chongqing/CQ/3/2011(H3N2),简称SIV CQ3。基因组序列比较分析显示,SIV CQ3 8个节段与不同时间的猪流感广东分离株(H3N2亚型)相应基因的核苷酸相似性最高,可能来源于H3N2亚型SIV。然而NP、HA和NA基因编码氨基酸序列与参考毒株A/New York/392/2004(H3N2)的相似性比较低,分别达95%、89%和90%;而血凝素(HA)裂解位点处的氨基酸序列为P-E-K-Q-T-R↓G,与参考毒株的一致,不具有高致病分子特征。此外,HA和NA的糖基化位点、受体结合位点处氨基酸存在一定程度的差异。最后,系统进化树分析显示NP、HA基因位于SIV群,与A/swine/Guangdong/2006/(H3N2)处于同一分支;而NA基因与禽流感(A/duck/Ontario/2000/AJ697881)和猪流感位于同一个进化单元,表明这株H3N2亚型流感病毒在不断的发生演变。     

不同基因型油菜氮素利用效率的差异及其与农艺性状和氮素营养性状的关系

通过田间试验对50个甘蓝型油菜基因型进行氮利用效率筛选,并将不同氮利用效率基因型在施氮（N 180 kg/hm2）和不施氮（N 0 kg/hm2）条件下的农艺性状和氮营养性状作了比较研究。结果表明,50个油菜基因型的氮利用效率具有显著差异,最大相差2.5倍（施氮）和1.7倍（不施氮）。油菜的农艺性状及氮素营养性状指标均表现出一定的基因型变异,其中第一个有效分枝高度变异系数最大,超过 50%,而籽粒含氮量的变异系数最小,只有 6% 左右。不论供氮水平高低,氮高效基因型的每角粒数,籽粒生物量,籽粒占地上部生物量的比例以及籽粒氮占地上部总氮的比例均高于氮低效基因型,第一个有效分枝高度则显著低于氮低效基因型。另外,油菜氮素利用效率与各器官含氮量、 茎叶氮素累积量、 果荚氮素累积量、 茎叶氮占地上部氮的比例和果荚氮占地上部氮的比例呈显著或极显著负相关,而不同氮效率基因型的地上部总生物量和地上部氮素累积总量则无显著差异。不同氮利用效率基因型的农艺性状和氮营养性状对氮肥的敏感性有显著差异。     

退化喀斯特生态恢复过程对土壤微节肢动物群落多样性的影响

为研究退化喀斯特生态恢复演替过程中土壤微节肢动物的变化特征,采用空间代替时间的方法,选取茂兰自然保护区内的草地、灌木丛、灌木林和原森林4种不同演替过程的典型样地,采集土壤样品并分离鉴定土壤动物,分析退化喀斯特生态环境的恢复过程中土壤微节肢动物群落特征及其与土壤性状的关系。结果表明：共获得土壤微节肢动物121只,隶属2纲3目9科,土壤微节肢动物群落丰富,其中隐气门亚目螨、捕食性螨在不同的恢复阶段处于优势群落的地位。Pearson相关性分析表明,铵态氮、易氧化碳对土壤微节肢动物营养功能群落结构和多样性（除均匀度指数）的影响较为显著。研究表明,退化喀斯特生态环境恢复过程对土壤微节肢动物的多样性、丰富度和均匀性均产生了极显著影响（P≤0.01）,对于土壤微节肢动物微食物网的形成起到积极的作用。     

波兰小麦×普通小麦品系中13重组自交系(RIL)群体穗部性状的QTL分析

小麦穗部性状是与籽粒产量关系密切的重要农艺性状。本研究以一个由99个株系组成的来源于波兰小麦(Triticum polonicum L.)和普通小麦(Triticum aestivum L.)品系中13杂交后代的F8重组自交系(recombinant inbred lines,RIL)群体为实验材料,利用微卫星(simple sequence repeat,SSR)标记对穗长、穗粒数和有效小穗数进行数量性状基因座(quantitative trait locus,QTL)定位分析。所构建的A染色体组和B染色体组共14个连锁群的遗传连锁图谱由115个SSR标记位点组成,图谱全长822.9cM,标记间的平均遗传距离为7.16cM。采用复合区间作图法在两年的环境中检测到分布在2A、3A、3B、5B和7B染色体上的6个穗长QTL,5个穗粒数QTL和2个有效小穗数QTL,表型变异贡献率分别为9.21%～22.94%,9.18%～19.71%和11.48%～13.01%。两年中都在3A染色体上的Xbarc12～Xbarc310区间内检测到控制穗粒数的主效QTL,说明该QTL较少受环境条件的影响,是一个稳定可靠的穗粒数QTL。该QTL与最近标记的遗传距离为0.01cM,可用于小麦产量性状的分子标记辅助育种。     

基于UG NX12.0的课程思政进教材研究

课程思政是新时代中国教育发展的新举措、新课题,课程思政的实施对我国教育乃至国家发展有着深远影响。以UG NX12.0为例,在教材中融入课程思政,如将行动导向式教学法,党史学习、“七一”表彰等重大主题教育巧妙融入,增强教材铸魂育人功能,解决专业课教师“单打独斗”局面,加大课程思政“落地面积”,推进课程思政的落地实施。     

基于4-苯基氨基硫脲的Hg2+共振瑞利散射分子受体的合成与研究

设计合成了受体分子1,2-二(4-苯基氨基硫脲)乙烷(BPSE),采用1HNMR和13CNMR对分子结构进行了表征.考察了乙腈中受体分子BPSE的光学性质对金属离子的响应,结果发现受体分子BPSE对汞离子表现出显著的共振瑞利散射光谱(RRS)增强,其增强倍数可达550倍,检出限为3.7×10-7 mol/L,具有较高的选择性和灵敏度.同时受体分子可应用于乙腈与水的缓冲溶液中汞离子的识别.     

植物生长调节剂对波斯菊种子萌发的影响

为促进植物生长调节剂在园林生产中的应用。采用L_9(3)~3正交设计法,用赤霉素(GA_3)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三种植物生长调节剂组合处理波斯菊种子,研究其对波斯菊种子萌发的影响。结果表明:GA_3和2,4-D对波斯菊种子萌发及幼苗早期生长的影响明显高于6-BA;采用0.5 mg·L~(-1) GA_3处理波斯菊种子,其发芽时间能较对照组缩短1～2 d;采用0.5～1.0 mg·L~(-1) GA_3和2,4-D的混合液浸泡波斯菊种子24 h后催芽,其萌芽率和发芽指数均较对照组高出16%以上,幼苗生长初期生物量也较对照组高出35%以上。