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以猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)为模板,通过RT-PCR扩增编码非结构蛋白2 (Nsp2)的基因,插入到pET32a表达载体中并在大肠埃希氏菌中进行表达.SDS-PAGE电泳结果显示融合表达的Nsp2分子量约为68 kDa,Western blotting分析该融合蛋白能与PRRSV阳性血清发生特异性反应.纯化融合表达产物Nsp2,按100 μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化,经腹腔免疫BALB/c小鼠3次后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,分别以Nsp2和His-Tag为抗原,通过间接EL ISA方法对融合细胞的上清液进行检测,筛选阳性克隆.经过3次亚克隆后,最终得到了6株能稳定分泌抗Nsp2抗体的阳性细胞克隆株.间接免疫荧光试验、Western blotting和间接ELISA试验鉴定这6株单克隆抗体均能够特异、单一地识别Nsp2,亚型鉴定结果显示6株单抗均属IgG2a型,其轻链均为κ链.所制备的这些单抗将为鉴定PRRSV Nsp2的B细胞抗原表位以及分析该蛋白的结构和功能奠定基础. 相似文献
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转录组测序(RNA-seq)是通过高通量测序方法全面快速的获悉特定组织或细胞的特定发育阶段或功能状态下所有RNA序列信息的技术。该技术以其准确和高通量等特征,被广泛应用于生物学、医学和农学等基础性研究。寄生虫在体外发育、感染入侵和体内繁殖等不同阶段,发生着一系列复杂的生物变化。采用RNA-seq技术筛选寄生虫发育、感染和繁殖等不同阶段的差异表达基因,阐明其功能,获悉寄生虫-宿主互作的分子调控机制等研究是目前的研究重点和热点。基于此,作者对RNA-seq技术在寄生虫研究中的应用作一综述。 相似文献
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西双版纳州橡胶树重要害虫的发生及防治 总被引:2,自引:0,他引:2
介绍了云南省西双版纳州橡胶树重要害虫橡副珠蜡蚧(Parasaissetia nigra Nietner)、六点始叶螨[Eotetranychus sexmaculatus(Riley)]、油桐尺蛾(Buzura suppressaria Guenee)的发生、危害及形态特征,并提出了农业防治、生物防治和化学防治等措施。 相似文献
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为了对云南省玉溪市某养殖场的霍尔多巴吉鹅进行隐孢子虫检测,本试验采集疑似感染隐孢子虫的霍尔多巴吉鹅的粪便样品,利用饱和盐水漂浮法进行镜检,并结合分子生物学鉴定方法,提取粪便样品DNA,采用巢氏PCR扩增隐孢子虫核糖体小亚基RNA(SSU rRNA)基因,测序后通过NCBI进行Blast在线比对,构建系统发育进化树。结果显示,所采集的鹅粪便样品中,隐孢子虫检出率为20.45%(9/44);隐孢子虫SSU rRNA基因的PCR扩增结果显示,该鹅源隐孢子虫与贝氏隐孢子虫同源性达100%;系统进化分析显示,二者位于同一分支。结果表明,该养殖场的霍尔多巴吉鹅存在贝氏隐孢子虫感染。 相似文献
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针对昆明某动物园鸽子病死及感染肠道线虫病情况进行调查,并采取药物治疗分析效果。对送检2只病死鸽检获虫体进行形态学鉴定,并采集园内40份鸽粪样(用药前的14份和用药后的26份)进行寄生虫的检测和鉴定。结果表明:2只病死鸽肠道解剖检获蛔虫161条;驱虫前线虫感染率为57.14%(8/14);采用阿苯达唑驱虫后的肠道线虫感染率为7.7%(2/26)。本次调查发现该动物园观赏鸽死于严重的肠道线虫感染,同时也发现高海拔地区鸽肠道线虫,尤其是蛔虫感染率高低同其所在地域的海拔高度可能存在相关性;从驱虫前后的结果发现,阿苯达唑对治疗肠道线虫感染有极显著效果;对其防治应采取定期肠道寄生虫检测,制定科学防控措施和方案。 相似文献
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随着我国改革开放经济不断发展,人民物质生活水平和消费能力日益提高,肉、奶、蛋等畜禽产品成为日常生活里餐桌上的主要动物源性食品。畜产品的质量安全关系到食品健康安全,关系到人民的健康状况和生活水平。本文总结了云南永德县畜产品质量安全工作中出现的主要问题,并针对性提出了解决措施,明确动物产地检疫员的责任地位,认真做好产地检疫工作。 相似文献
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为了解中甸牦牛消化道寄生虫感染情况,为牦牛寄生虫病提供有效的防治措施,从昆明小哨和香格里拉市随机采集106份新鲜粪便样品,采用饱和盐水漂浮法和自然沉淀法共检测出49份样品有寄生虫感染,平均感染率为46.23%。其中,线虫感染率为40.57%,吸虫感染率为16.98%,线虫和吸虫混合感染率为11.32%。调查表明,该地区中甸牦牛肠道寄生虫感染情况较为严重,以线虫感染为主。中甸牦牛对驱虫药比较敏感,驱虫效果明显,感染率显著低于自由放牧牛群。因此,生产中应加强采取防治措施,提高对寄生虫病的认识和防范,以确保牦牛养殖的健康可持续发展,提质增效。 相似文献