猪瘟免疫猪接种PRRSV nsp2Δ1882-2241弱毒疫苗后IL-12、IL-10、TNF-α应答特征

不同时间段采集猪的血液样本,利用ELISA方法检测血清和细胞培养上清中IL-12、IL-10、TNF-α等3种细胞因子的水平,分析猪双重免疫CSFV、PRRSV弱毒苗后血清和细胞培养上清中细胞因子的变化规律。结果显示,IL-12在血清中的浓度显著高于细胞培养上清中的浓度(P<0.01),在CSFV高抗体PRRSV高抗体组中28d采血的细胞培养上清中IL-12的浓度高于14d采血的细胞培养上清中的浓度(P<0.05);IL-10血清中水平显著低于细胞培养上清中水平(P<0.01),在CSFV高抗体PRRSV高抗体组中28d采血的细胞培养上清中的IL-10浓度显著低于14d采血的细胞培养上清中的浓度(P<0.01);TNF-α在血清中水平显著低于细胞培养上清中水平(P<0.01),在3组中28d采血的细胞培养上清液中TNF-α浓度高于14d采血的细胞培养上清液中浓度(P<0.05)。结果表明,2种疫苗特异性抗体应答高时,IL-12水平显著上调,IL-10水平显著下调,提示上调IL-12及下调IL-10都是基因缺失疫苗发挥效力的潜在机制。TNF-α总体水平上升,但在血清中水平较低。     

安氏隐孢子虫肌动蛋白部分编码基因真核表达载体的构建

[目的]将安氏隐孢子虫肌动蛋白基因进行克隆并在Hela细胞中真核表达。[方法]根据筛选安氏隐孢子虫T7噬菌体展示文库获得的肌动蛋白(CA42)部分编码基因序列设计特异性引物,扩增目的基因CA42,构建重组真核表达载体pVAX1-CA42,将其转化入He-la细胞,用间接免疫荧光、SDS-PAGE、Western blotting检测CA42蛋白在转染细胞中的表达情况。[结果]重组质粒能在Hela细胞中表达,且表达产物具有反应原性。[结论]成功克隆并表达了安氏隐孢子虫肌动蛋白基因,并在Hela细胞中能够稳定表达。     

小球隐孢子虫子孢子表面蛋白CP15/60原核表达载体的构建及表达

用Xho I和EcoR I酶分别从pET-28a( )和pMD18-T15/60质粒中酶切得到线性片段和CP15／60基因片段，然后用T4DNA连接酶连接，构建重组的CP15／60的原核表达载体，在大肠杆菌BL21（DE3）中表达，并用SDS－PAGE、ELISA和Westem lot进行鉴定。结果表明构建了CP15／60的原核表达载体，得到了一分子量约为16kDa的融合蛋白，占大肠杆菌总蛋白的42％。     

农药市场的管理

自《农药管理条例》颁布实施以来,在各级政府和我州农业局的领导大力支持下,针对我州农药来源渠道复杂、市场秩序混乱、假劣农药严重的情况,我们开展了全州大规模的宣传、培训。同时,对农药市场进行监督管理,开展经常性的农药市场大检查,严厉打击了一大批制售假劣农...     

猪急性细颈囊尾蚴病诊治研究

四月份以来,长春市暴发了多起猪急性死亡事件。患猪主要症状为:发热、食欲不振,减食或不食,两耳发紫,个别猪臀部发紫,重症猪于日内死亡.剖检可见肝脏肿大,表面有大量出血点和白色米粒样虫体寄生,腹腔有大量血色积液,并悬浮大量白色米粒样虫体,用手捞起虫体内眼可见乳白色头节.肝脏切面亦见有大量白色米粒样虫体.经解放军农牧大学寄生虫病学教研室诊断定为猪急性细颈囊尾蚴病,这是长春市首次发现的该病病例。患猪用驱绦灵注射液治疗一次后剖检病猪发现虫体死亡,其他用药猪于次日开始恢复正常.由于该病与猪食入犬泡状绦虫卵有关,因此敬告各养猪户,应严格杜绝猪食到犬粪和生的犬下水.     

驱绦灵注射液治疗犬绦虫病试验

犬绦虫病是由多种绦虫寄生于犬的小肠所引起,其中许多绦虫卵可感染家畜和人,危害极为严重.以往报导的驱绦虫药多为口服剂型,用药后绦虫多呈链体排出,容易污染环境,而且存在给药不方便、易造成犬呕吐等弊病.我室经过多年努力,研制出驱绦灵注射液治疗犬绦虫病,取得了很好的效果.试验选用20只感染绦虫的病犬,其中14只感染犬复孔绦虫,6只感染泡状绦虫.分别以0.2mL·kg~(-1)体重的剂量皮下注射驱绦灵注射液,并检查用药前后粪便中有无绦虫节片及虫卵。同时对一例复孔绦虫病犬和一例泡状绦     

PCR技术诊断隐孢子虫病方法的建立及其初步应用

本研究应用聚合酶链反应(PCR)建立了一种检测人及牛粪便中隐孢子虫卵囊 DNA 的方法.以蔗糖梯度离心法纯化鼠源 C.muris 卵囊;甘油漂浮-G_3耐酸漏斗过滤法纯化牛源 C.muris、牛源 C.parvum 和鼠源C.parvum 卵囊.结果发现甘油漂浮-G_3耐酸漏斗过滤法纯化隐孢子虫卵囊具有纯度高、回收率达96%、介质便宜及操作简便等优点.纯化卵囊经液氮冻融后按常规法提取 DNA 作为 PCR 模板.根据 GenBank 中C.muris 和 C.parvum 18SrRNA 基因序列,应用计算机辅助设计合成一对 PCR 引物(上游引物:5′-AAACCCAACTTTGCGGAAGG-3′,下游引物:5′-CCATGCTGGAGTATTCAAGGC-3′).以此引物扩增     

长春地区发现鸡隐孢子虫病

长春地区发现鸡隐孢子虫病长春市某鸡场１７～１８周龄的种鸡发生一种疾病，呈现精神不振、厌食、拉稀便、消瘦和呼吸困难等症状，接着大批鸡死亡，２周内死亡５００多只，占所养鸡的１６．７％。经对病鸡剖检，发现肺表面有出血点，气管粘膜充血，内有粘性分泌物；肝呈深...     

流式细胞术检测不同试验条件对猪T 淋巴细胞亚群的影响

通过不同方式处理猪外周血淋巴细胞,对不同保存时间的淋巴细胞进行流式细胞术检测,探讨其对T淋巴细胞亚群中CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋亚群的影响。采用肝素钠、EDTA、枸橼酸钠3种抗凝剂抗凝猪外周静脉血,分别在第1、2、4、6、8、10天用流式细胞仪检测。结果表明,肝素钠抗凝,第1、2、4天内检测差异不显著(P＞0.05),第6天检测CD4^＋、CD8^＋细胞显著减少(P＜0.05),第8、10天极显著减少(P＜0.01)。EDTA抗凝,第1、2、4天内检测差异不显著(P＞0.05),第6天检测CD3^＋细胞显著减少(P＜0.05),第8、10天极显著减少(P＜0.01);枸橼酸钠抗凝,第1、2、4、6、8天内检测差异不显著(P＞0.05),第10天检测CD3^＋、CD4^＋细胞极显著减少(P＜0.01),CD8^＋细胞显著减少(P＜0.05)。3种抗凝剂检测比较,处理后的第1、2、4、6天肝素钠抗凝管检测结果CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋均高于EDTA和枸橼酸钠抗凝。本研究表明,流式细胞术检测猪外周血优选肝素钠抗凝,样本采集后4 d内检测完毕。     

硝唑尼特对四翼无刺线虫的驱虫效果

20只自然感染四翼无刺线虫的雌性昆明系小鼠,随机分成4组,每组5只,常规饲喂。第1~3组小鼠分别以200、400、800 mg/kg剂量的硝唑尼特灌胃,第4组设为空白对照组,每24 h一次,连续灌胃5 d。用虫卵减少率和粗计驱虫率作为评价药物效果的指标。结果显示,硝唑尼特对四翼无刺线虫的驱虫效果随药物剂量的增加而提高,以800 mg/kg剂量效果最好。