母体脂代谢对子代骨骼肌生长发育的研究进展

骨骼肌是一种动态多样化组织,是动物体维持正常生长发育必不可少的组成部分,其生长发育过程受多重因素调控.已有相关研究证实母体脂代谢在子代骨骼肌生长发育过程中的重要作用.文章综述母体脂代谢对子代骨骼肌生长发育的影响,旨在为畜牧生产及后续研究提供参考.     

“百里腥素”对肉鸡生产性能以及血液相关生化指标的影响

蛋白质是动物饲料中的主要成分,目前畜禽配合饲料中最常用的蛋白质饲料原料是豆粕,而棉子粕、菜子粕等杂粕由于含有特定的抗营养因子,使其在生产实际中的使用量受到限制。为了提高杂粕类蛋白质饲料资源利用率,必须设法消除棉粕中的棉酚、环丙烯类脂肪酸和菜粕中的芥酸、硫代葡萄糖苷等对畜禽的不利影响。     

在体法评价琥珀酸对骨骼肌收缩特性的影响

旨在建立在体测定骨骼肌收缩特性的方法,用于评价琥珀酸对C57BL/6J小鼠胫骨前肌收缩性能的影响。试验以C57BL/6J小鼠为研究模型,制作离体胫骨前肌、在体坐骨神经-腓肠肌和坐骨神经-胫骨前肌样本,对比不同方法、不同周龄和不同肌肉最大张力和张力半衰时间差异。随后,选取12只6周龄雌性小鼠,按体质量随机分为2组(n=6),分别在饮水中添加0和1%琥珀酸盐,单笼饲养,自由采食及饮水,12 h循环光照,每周记录采食量及体质量。饲养结束后,采用所建立的在体法检测胫骨前肌最大张力、张力半衰时间,以及肌肉中葡萄糖、乳酸含量和乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶活性。在体法检测胫骨前肌收缩持久性显著高于离体法。用在体法评价不同日龄、不同部位肌肉发现,腓肠肌的最大张力和张力半衰减时间均极显著高于胫骨前肌(P0.01),8周小鼠胫骨前肌的最大张力半衰时间极显著短于20周小鼠(P0.01),说明已成功建立在体测定肌肉收缩特性的方法。随后的饲养试验表明,虽然饮水添加1%琥珀酸盐对小鼠生长性能无显著影响,但采用在体测定肌肉收缩特性发现,琥珀酸盐显著提高了小鼠胫骨前肌的张力半衰时间和收缩后肌肉中琥珀酸脱氢酶的活性(P0.05),显著降低了收缩后肌肉中的乳酸含量(P0.05)。实验成功建立了在体检测骨骼肌收缩特性的评价方法,并发现饮水添加琥珀酸能增强骨骼肌抗疲劳性。研究结果对于完善骨骼肌类型转化评价方法,研制改善骨骼肌运动机能和畜禽胴体品质的新型营养素提供依据。     

饮水添加氯化钙对高脂日粮饲喂小鼠脂肪沉积和肠道菌群的影响

【目的】研究饮水添加氯化钙对高脂日粮饲喂小鼠脂肪沉积和肠道菌群的影响,为提高动物胴体品质和人体健康提供理论依据。【方法】选用27只4周龄C57BL雄性小鼠,分为高脂日粮组和高脂日粮+饮水添加氯化钙组,试验期13周。每周测定小鼠体质量,试验末测定小鼠体脂含量,试验结束后采集小鼠皮下脂肪、附睾脂肪并称质量。于试验后期10～12周采集小鼠粪便进行16S rRNA高通量测序,并分析对菌群的影响。【结果】饮水添加氯化钙显著降低了小鼠体质量、体脂含量、皮下脂肪指数和附睾脂肪指数,与高脂组相比分别降低了12.85%、32.69%、26.65%和18.60%。饮水添加氯化钙提高了小鼠粪便样中的菌群多样性和菌群丰度。在门水平下,饮水添加氯化钙对拟杆菌门Bacteroidetes、厚壁菌门Firmicutes、变形菌门Proteobacteria、脱铁杆菌门Deferribacteres、放线菌门Actinobacteria、软壁菌门Tenericutes的丰度无明显影响。在纲水平下,与高脂组相比,饮水添加氯化钙显著降低了丹毒丝菌纲Erysipelotrichia和放线菌纲Actinobacteria的相对丰度,并且显著提高了梭菌纲Clostridia的相对丰度。【结论】饮水添加氯化钙能够降低高脂日粮饲喂小鼠的体质量和体脂含量,这可能与饮水添加氯化钙提高了小鼠粪便菌群多样性和特定菌群丰度有关。     

限饲对初情期小鼠乳腺发育的影响及机制

【目的】研究限饲对初情期小鼠乳腺发育的影响及机制,为动物乳腺发育的营养调控提供科学依据。【方法】选用24只4周龄C57BL/6雌性小鼠,分为对照组和限饲组。试验为期4周,每周称体质量并统计采食量和饮水量,在试验结束前对小鼠进行体成像和体组成检测。试验结束后采集小鼠乳腺并称质量。采集血液,测定血清中胰岛素样生长因子(IGF-1)和雌二醇(E2)的水平。采用Whole-mount染色观察小鼠乳腺发育情况,统计小鼠乳腺终末乳芽(TEB)和导管分支数量。利用免疫荧光染色检测乳腺组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。【结果】限饲组小鼠体质量、体增质量、平均日采食量、平均日能量摄入均极显著低于对照组(P0.001),但其饮水量显著高于对照组(P0.05)。限饲对小鼠肌肉含量和脂肪含量无显著影响。限饲使小鼠的乳腺质量降低了29%(P0.05),对乳腺指数无显著影响。Whole-mount染色结果表明,限饲显著抑制初情期小鼠的乳腺发育,其乳腺组织的TEB数量和导管分支数量均显著低于对照组(P0.05)。此外,限饲对血清中E2水平无显著影响,但使血清中IGF-1水平降低了34%(P0.05)。限饲显著抑制了小鼠乳腺组织中PCNA蛋白的表达。【结论】限饲可显著抑制初情期小鼠乳腺发育,这可能与限饲可降低血清中IGF-1水平和乳腺组织中增殖相关蛋白PCNA表达有关。     

高脂日粮对初情期小鼠乳腺发育的影响及分子机制

【目的】研究高脂日粮对初情期小鼠乳腺发育的影响及可能机制。【方法】选用20只4周龄昆明雌性小鼠,设对照组和高脂日粮组,试验期4周,每周称体质量并统计采食量。试验结束后采集小鼠乳腺并称质量,采用wholemount及HE染色观察小鼠乳腺组织形态结构及导管数量。利用Western blot检测初情期小鼠乳腺组织胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor1,IGF-1)、增殖相关信号通路关键蛋白蛋白激酶B(Protein kinase B,Akt)、胞外调控的蛋白激酶(Extracellular regulated protein kinase,Er K)以及炎症信号通路关键蛋白Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)和核因子κB激酶抑制剂(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase,IKK)的表达。【结果】高脂日粮组小鼠采食量极显著低于对照组(P0.01),但在能量摄入方面与对照组无显著差异。高脂日粮组小鼠的体质量增加显著高于对照组(P0.05)。高脂日粮组小鼠在乳腺质量、乳腺质量与体质量的比值上均极显著高于对照组(P0.01)。乳腺组织的whole-mount及HE染色结果表明,高脂日粮组小鼠乳腺导管发育明显被抑制,其乳腺组织的导管数和密度明显降低,乳腺组织的终末乳芽数量也极显著低于对照组(P0.01)。高脂日粮能够显著抑制小鼠乳腺组织IGF-I的蛋白表达以及Akt、Erk和IKK的磷酸化水平(P0.01或0.05),极显著促进小鼠乳腺组织TLR4的蛋白表达(P0.01)和显著促进JNK的磷酸化水平(P0.05)。【结论】高脂日粮能够抑制初情期小鼠乳腺发育,这可能是通过抑制乳腺增殖的相关信号和促进乳腺组织炎症的相关信号来实现。     

猪BMSCs成脂分化中细胞膜钙离子通道、钙敏感受体及成脂定向相关基因表达研究

【目的】研究猪骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)定向分化为脂肪细胞过程中细胞膜上钙离子通道、钙敏感受体(Calcium-sensing receptor,Ca SR)基因及成脂定向相关基因的表达。【方法】从5~7日龄仔猪骨髓中分离纯化出猪BMSCs,诱导猪BMSCs成脂分化。油红O法和三酰甘油法检测细胞分化聚酯状况。在成脂分化不同时间(0、1、2、5和10 d)收集细胞,利用荧光定量PCR检测锌指蛋白423(Zinc finger protein423,Zfp423)、脂肪前体细胞因子(Preadipocyte factor 1,Pref-1)、骨形态发生蛋白2(Bone morphogenetic protein 2,BMP2)、骨形态发生蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)、细胞膜钙离子通道及Ca SR基因的mRNA表达变化。【结果】油红O染色和三酰甘油检测结果表明,成功诱导猪BMSCs成脂分化;定量PCR结果显示,在猪BMSCs成脂分化第5天,成脂定向标志基因Zfp423、脂肪前体细胞标志基因Pref-1及促进成脂分化基因BMP2、BMP4的mRNA相对表达量显著提高(P0.05),说明第5天是猪BMSCs成脂定向形成脂肪前体细胞的关键时期;同时,细胞膜上的电压门控钙离子通道亚基电压依赖型α/δ亚型1(Voltage-dependentalpha-2/delta subunit 1,CACNA2D1)、钙释放激活钙通道调节分子1(Calciumr elease-activated calcium channel modulator 1,Orai1)、瞬时受体电位通道传统型1(Transient receptor potential canonical type 1,TRPC1)、瞬时受体电位通道M型7(Transient receptor potential melastatin 7,TRPM7)、瞬时受体电位通道香草素受体亚型1(Transient receptor potential vanilloid receptor1,TRPV1)基因和Ca SR基因在诱导成脂第5天mRNA相对表达量也显著提高(P0.05),提示细胞膜钙离子通道及Ca SR基因可能参与了猪BMSCs成脂分化过程。【结论】揭示了猪BMSCs成脂分化过程中细胞膜钙离子通道、钙敏感受体及成脂定向相关基因的表达模式。     

α-酮戊二酸/酮戊二酸受体1系统对雄性动物睾酮分泌和精子生成的影响

本试验旨在研究α-酮戊二酸（AKG）/酮戊二酸受体1(OXGR1)系统对雄性动物睾酮分泌和精子生成的影响。首先采用免疫荧光检测OXGR1在睾丸组织中的定位。然后以酮戊二酸受体1敲除（OXGR1 knockout,OXGR1KO）小鼠为模型,采用酶联免疫吸附剂测定（ELISA）法检测血清睾酮含量,运用苏木精-伊红（HE）染色分析睾丸曲细精管空腔面积、睾丸组织形态差异,采用实时荧光定量PCR检测睾丸生精标志基因mRNA表达水平。在急性试验中,选取16只10周龄雄性小鼠,按体重随机分成4组,分别注射0、1、5、10 mg/kg AKG 6 h后检测血清睾酮含量和小鼠攻击性,再选取10周龄雄性小鼠和OXGR1KO小鼠各12只,并按体重随机分成4组,每组注射5 mg/kg AKG 6 h后检测血清睾酮含量。在离体试验中,用不同浓度AKG处理睾丸间质细胞（TM3细胞）24 h后,检测TM3细胞上清液睾酮含量;并使用200μmol/L AKG处理TM3细胞检测细胞内瞬时钙离子浓度。在长期试验中,选取8周龄雄性小鼠和OXGR1KO小鼠各12只,并按体重随机分成4组,分别为WT组、WT+2%AKG组、O...     

小肽复合制剂对断奶仔猪生产性能及血液相关指标的影响

为探究小肽复合制剂对断奶仔猪生产性能、腹泻率及血液相关指标的影响,选用120头31日龄断奶仔猪随机分为4组,每组3个重复,每个重复10头猪(公母各半).A组为对照组,饲喂基础日粮,B、C和D组为试验组,在基础日粮中用5%的玉米替代等量的豆粕后分别添加500、1 000、2 000 g·t-1的小肽复合制剂,同时调整日粮赖氨酸水平.试验期为28 d.试验结果:与A组相比,C和D组的平均日增质量、平均日采食量、耗料增质量比、白蛋白质量浓度和单位增质量成本无显著差异(P＞0.05),但有效降低了仔猪的腹泻率,且在59日龄时C组和D组血清尿素氮水平显著低于对照组;B组在45、59日龄时生产性能、白蛋白浓度均低于对照组,且在45日龄时差异显著.结果表明添加500 g·t-1小肽复合制剂不能完全弥补用5%玉米替代豆粕所造成的日粮蛋白质降低;添加1 000、2 000 g·t-1小肽复合制剂在一定程度上能改善仔猪对蛋白质利用率,弥补用5%玉米替代等量豆粕而降低的日粮蛋白质水平,并能降低腹泻率.     

不同浓度氨基酸对仔猪原代肝细胞尿素循环的影响

【目的】研究不同浓度的氨基酸对仔猪原代肝细胞尿素循环的影响及其机理。【方法】5日龄仔猪门静脉灌流后从中分离纯化出肝细胞并进行培养,在培养基中添加不同浓度的氨基酸(分别为猪血液中氨基酸生理浓度的1、2和4倍),24 h后收集上清和细胞。用比色法检测上清中尿素、底物氨和细胞中氨的浓度以及谷氨酰胺酶(Glutaminase,GLS)和谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)的活性,实时荧光定量PCR法检测细胞中氨甲酰磷酸合成酶1(Carbamyl phosphate synthetase 1,CPS1)、精氨基琥珀酸合成酶(Argininosuccinate synthetase,ASS)、精氨琥珀酸裂解酶(Argininosuccinate lyase,ASL)、鸟氨酸氨甲酰转移酶(Omithine transcarbamylase,OTC)和精氨酸酶(Arginase,ARG)等尿素循环相关酶基因m RNA的表达。【结果】4倍氨基酸组显著提高了仔猪原代肝细胞培养上清中氨和尿素的浓度,增强了细胞中GLS的活性。荧光定量PCR结果表明,4倍氨基酸组显著提高了细胞中CPS1、ASS和ASL等基因m RNA的表达。1.0和2.0 mmol·L~(-1)的NH4Cl显著促进细胞尿素的合成。【结论】在仔猪原代肝细胞中,高浓度氨基酸可以通过提高GLS的活性等途径加速氨的积累,促进CPS1、ASS、ASL等尿素循环相关酶基因m RNA的表达,从而促进尿素的生成。