全文获取类型
收费全文 | 320篇 |
免费 | 12篇 |
国内免费 | 24篇 |
专业分类
林业 | 18篇 |
农学 | 33篇 |
基础科学 | 15篇 |
20篇 | |
综合类 | 167篇 |
农作物 | 12篇 |
水产渔业 | 6篇 |
畜牧兽医 | 57篇 |
园艺 | 22篇 |
植物保护 | 6篇 |
出版年
2024年 | 8篇 |
2023年 | 22篇 |
2022年 | 22篇 |
2021年 | 14篇 |
2020年 | 20篇 |
2019年 | 25篇 |
2018年 | 28篇 |
2017年 | 14篇 |
2016年 | 14篇 |
2015年 | 11篇 |
2014年 | 24篇 |
2013年 | 10篇 |
2012年 | 10篇 |
2011年 | 19篇 |
2010年 | 15篇 |
2009年 | 18篇 |
2008年 | 11篇 |
2007年 | 5篇 |
2006年 | 3篇 |
2005年 | 9篇 |
2004年 | 5篇 |
2003年 | 8篇 |
2002年 | 9篇 |
2001年 | 9篇 |
2000年 | 6篇 |
1998年 | 1篇 |
1996年 | 3篇 |
1995年 | 1篇 |
1994年 | 1篇 |
1992年 | 2篇 |
1991年 | 4篇 |
1989年 | 2篇 |
1987年 | 2篇 |
1981年 | 1篇 |
排序方式: 共有356条查询结果,搜索用时 31 毫秒
61.
木霉广泛存在于土壤、根际及其它基质中,对植物土传病原真菌具有拮抗作用。扩大生防因子黄绿木霉(Trichoderma aureoviride)T1010培养料范围是利用生产地资源扩大生产、大面积应用的前提。本试验通过测定黄绿木霉T1010的菌丝生长和分生孢子生长,黄绿木霉T1010在固体基本培养基上生长,最佳碳源为淀粉;优化了培养条件,确定最适宜种子培养用PD培养基,摇瓶培养,生长时间3d后,菌丝生长量为5.75g/ml;最经济适宜扩大培养基为玉米15g/L,豆粉5g/L,摇瓶培养3d后,菌丝生长量为5.83g/ml;最适宜的、经济的固体发酵培养基为麦麸∶醋渣∶水=2∶1∶3.3,发酵产物孢子量为2.46×1010cfu/g。本文研究确定黄绿木霉T1010腐解培养料的能力为多方面扩大生产黄绿木霉制剂提供了科学依据。 相似文献
62.
63.
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的烈性传染病,为了保证其检测结果的准确性和可靠性,需要研制试剂盒中使用的阳性标准质控品。本试验旨在研制含ASFV核酸序列的病毒样颗粒,并探究其在检测方法中的应用。首先扩增p72基因的全长片段,利用昆虫杆状病毒系统,包装出含有p72基因的ASF DNA病毒样颗粒。为了进一步验证该病毒样颗粒在应用中的可靠性,本研究将病毒样颗粒与ASF的组织毒及细胞毒同时进行DNA核酸提取,进行实时荧光定量PCR。结果表明,本研究制备的病毒样粒子能很好的取代ASFV在实时荧光定量PCR检测方法中作为阳性质控品,且能对核酸提取过程进行质控,实时荧光定量PCR检测试剂盒中,病毒样粒子的最低包装浓度为102 TCID50。进一步研究发现该病毒样颗粒也适用于普通PCR及LAMP检测方法中,最低浓度分别为103和101 TCID50。本试验结果将为规范ASF检测方法,促进ASF检测方法的转化应用及保证检测结果的准确度和可靠性提供科学依据。 相似文献
64.
非洲猪瘟病毒主要抗原p54-1的原核表达及多克隆抗体的制备与鉴定 总被引:1,自引:1,他引:1
为进一步深入研究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p54蛋白的主要抗原表位及抗原性质,本试验根据GenBank中p54基因序列(登录号:NC_001659.2)设计表达区域特异性引物,PCR扩增后连接表达载体pGEX6p-1构建pGEX6p-1-p54-1原核表达质粒;将该质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达,切除GST标签后采用阴离子柱纯化目的蛋白并鉴定;将纯化蛋白与佐剂混合乳化后作为免疫原,免疫小鼠制备p54-1蛋白多克隆抗体;采用ELISA和Western blotting检测抗体的效价和反应特性。结果显示,重组p54-1融合蛋白以可溶形式表达,切除标签后的纯化蛋白能够与ASFV阳性血清发生反应,而与PRRSV和PCV3不发生反应。利用该蛋白免疫获得的多克隆抗体经ELISA检测其抗体效价为1∶128 000。Western blotting结果显示,制备的多克隆抗体能够识别ASFV p54蛋白。表明本研究成功获得了较高纯度的p54-1蛋白,制备的p54-1多克隆抗体具有较高反应性和特异性,为后续非洲猪瘟双抗夹心ELISA检测方法的建立提供依据。 相似文献
65.
废气再循环(EGR)可以有效降低NOx排放,因此为了满足国家的排放法规,EGR在柴油机中被广泛应用.对于采用EGR技术的多缸柴油机,若各缸废气分配不均会影响其燃烧稳定性,导致各缸工作不一致.本文采用1D-3D耦合计算方法,对柴油机进气歧管进行仿真分析.通过对比EGR管出口处速度流场、各缸EGR率以及各缸的空燃比,找到优... 相似文献
66.
对抗性番茄材料‘Hawaii 7996’分别接种强致病力青枯菌(RsH)和中等致病力青枯菌(RsM)后,利用双向电泳技术找到了两个差异表达蛋白质--谷胱甘肽S转移酶L3和Remorin 1蛋白。在利用携带八氢番茄红素脱氢酶基因PDS的TRV重组病毒载体通过叶片浸润法证明VIGS体系可行后,进一步利用该技术沉默上述两个蛋白质的对应基因GST-L3和Rem-1,并用半定量RT-PCR检测沉默效果。结果表明,分别沉默GST-L3和Rem-1的番茄植株抗性减弱,在接种中等致病力青枯菌(RsM)后青枯病发病率和病情指数都明显高于对照植株,说明基因GST-L3和Rem-1与番茄对青枯病的抗性相关。 相似文献
67.
68.
为了进行猪流行性腹泻病毒的快速诊断,本研究根据GenBank中登录PEDV E基因设计一对引物,建立了RT-PCR方法,敏感性结果显示,可以检测到8.50×104个拷贝。特异性试验采用该方法对猪伪狂犬病病毒,猪圆环病毒2型,猪瘟病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪轮状病毒等进行,结果表明只有PEDV能扩增出目的条带;利用本方法对现有PEDV阳性病料进行了检测,结果野毒株9份,占64.2%(9/14)。本方法的建立,为PEDV疫情诊断及防控提供了新的技术支撑。 相似文献
69.
70.
"三集五大"体系建设是国家电网公司内强素质的具体措施,是科学管理理论的新创举。"三集五大"究竟是一场怎样的改革,笔者就此问题谈点个人看法。1改革的背景随着我国能源需求的持续增长,亟需转变传统就地平衡的电力发展方式,增强能源远距离输送和大范围优化配置 相似文献