应用ELISA检测鸭瘟抗体

应用ＥＬＩＳＡ间接法检测鸭瘟抗体,具有简单、快捷、特异的优点。小鸭免疫鸭瘟弱毒疫苗２周后抗体水平明显上升,４周达最高峰。用１０００个致死量鸭瘟强毒攻击,结果,抗体效价与免疫保护无明显的相关性。     

ELISA间接法用于猪瘟免疫监测研究

本文介绍以猪瘟兔化弱毒犊睾细胞苗为材料提取猪瘟病毒抗原,以羊抗猪IgG—HRP结合物为免疫试剂,建立快速ELISA检测猪瘟抗体的方法,同时用血清中和试验进行比较,和ELISA抑制试验,证明该法特异,敏感,快速,准确,是进行猪瘟抗体监测的好方法。     

伪狂犬病病毒闽A株gE基因去信号肽片段的克隆与序列测定

根据已经发表的伪狂犬病病毒（PRV）Rice株的gE基因序列,设计并合成了1对引物,通过PCR方法扩增到了PRV闽A株糖蛋白gE基因除信号肽以外的全部编码区段,并克隆到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌XL1-blue菌株,重组质粒pMD18-T-FL经酶切和PCR鉴定证实后,进行了序列测定。结果表明,重组质粒pMD18-T-FL含有PRV闽A株糖蛋白gE基因除信号除信号肽以外的全部编码区段,长1674bp。序列比较分析表明,此区段与PRV Rice株相应区段的核苷酸序列同源性为97．5％,氨基酸序列同源性为94．8％。     

猪瘟不同顺序零天免疫的免疫效果比较

以猪瘟免化弱毒细胞苗分别免疫5组初生仔猪，每头1．5头剂。第1组20头先免疫，1小时后吸初乳。第2组15头，吸初乳后1小时免疫。第5组15头，吸初乳后半小时免疫。75日龄，以猪瘟弱毒单抗酶联方法测定1组动物的平均抗体（OD值）分别为0．25、0．25及0．21。80日龄，每组各随机抽出4头猪，连同非免疫对照猪6头以猪瘟石门系强毒攻击后，对照猪全死，第1组100％保护，第2组75％保护，第5组50％保护。第1组的免疫效果明显优于其他两组。     

疑似猪李氏杆菌病的诊治

深圳某中型养猪场饲养母猪近500头,生产一直很正常。2002年12月,突然发生怀孕母猪散发性流产,而流产前无任何前兆。同时,断奶仔猪呈现不同程度的神经症状,严重的造成死亡。在半个月内,流产9头,死亡仔猪8头,造成较大的损失。根据该场的免疫程度及疫苗使用的情况、临诊特征,初步断定为猪李氏杆菌感染。经采取应急措施后,该病即时停止,同时进行实验室诊断,确定为猪李氏杆菌病。1 临床症状 怀孕母猪流产前无任何前兆,流产的母猪妊娠期长短不一,流出的胎盘大部分出血水肿,胎儿全身潮红。呈散发性,有时一天内流产2-3头,有时3-4头,无规律性;同时断奶仔猪出现散发     

猪瘟不同顺序零天免疫的免疫效果比较

以猪瘟兔化弱毒细胞苗分别免疫3组初生仔猪，每头1．5头剂。第1组20头先免疫，1小时后吸初乳。第2组15头，吸初乳后1小时免疫。每3组13头，吸初乳后半小时免疫。75日龄，以猪瘟弱毒单抗酶联方法测定3组动物的平均抗体（OD值）分别为0．25、0．23及0．21。80日龄，每组各随机抽出4头猪，连同非免疫对照猪6头以猪瘟石门系强毒攻击后，对照猪全死，第1组100％保护，第2组75％保护，第3组50％保护。第1组的免疫效果明显优于其他两组。     

伪狂犬病病毒闽A株gE基因表位抗原编码区的克隆与序列测定

用PCR方法以伪狂犬病病毒闽A株的基因组DNA为模板扩增到了gE基因表位抗原决定域的编码区段。PCR产物连接到pMD18-T载体后，转化大肠杆菌XL1－blue菌株，重组质粒经测序并与GenBank中已登录的gE基因序列比较，确证含有PRV闽A株gE基因的表位抗原编码区，此区段与PRV Rice株相应区段的DNA序列同源性为97．3％，氨基酸序列同源性为94．7％。     

猪附红细胞体病流行病学调查及诊治

通过对广东、海南、江西等地110个猪场送检的2450份血液的检测，结果发现猪附红细胞体病阳性场为102个，阳性率为92．7％，结合生产实际对猪附红细胞体病的流行病学和诊治方法进行阐述。     

猪O型口蹄疫病毒强弱毒株VP_1基因的克隆与序列分析

本研究根据口蹄疫病毒 (FMDV)VP1基因的序列 ,设计并合成了 1对用于扩增整个VP1基因的引物 (5P、P6 )。从细胞培养液或组织中提取总RNA ,通过PT_PCR扩增 ,从F2 9株、O3I3株和T5 0 9株中均获得了 1条约 740bp的DNA电泳带。将PCR产物双酶切后电泳回收 ,插入到相应双酶切的pUC18质粒中 ,获得了重组质粒。通过PCR鉴定 ,证明重组质粒pUCVP1/F2 9、pUCVP1/O313、pUCVP1/T5 0 9均插入了VP1基因。对上述 3个重组质粒进行测序后分析 ,F2 9强毒株与O3I3、T5 0 9弱毒株相比 ,其核苷酸序列同源性分别为 98.75 %和 99.0 6 % ;因F2 9株核苷酸发生 3个碱基缺失与 1个碱基替换 ,故推导的氨基酸序列同源性分别仅为 44 .13%和 41.32 % ;而T5 0 9株与O3I3株相比 ,其核苷酸、氨基酸序列同源性分别为 99.37%和 95 .31%。通过序列分析发现 ,本研究的 3个毒株与国内大多数毒株 (包括 1997年台湾暴发FMDV所分离的毒株 ,除O/A/ 5 8株外 )均属于同一基因型 ,核苷酸序列同源性为 85 %～ 94% ;而与国外毒株相比 ,属不同的基因型 ,核苷酸序列同源性仅为 81%～ 82 %。其推导的氨基酸序列 ,除F2 9株与O/HK/ 93株及 1997年台湾暴发FMDV分离的少数毒株的氨基酸序列同源性仅为 45 %～ 6 3%外 ,本研究的 3个毒株与国内分离的大多数毒株的VP1