磷酸化水平对肌红蛋白稳定性的影响

【目的】肌红蛋白是影响肉色最主要的色素物质,主要存在于肌浆中,其绝对含量和3种肌红蛋白(氧合肌红蛋白、脱氧肌红蛋白、高铁肌红蛋白)间的相对含量决定了肉色。已有研究表明蛋白质的磷酸化可能会通过对糖酵解代谢途径以及肌红蛋白的调控进而负向调控肉色的稳定性,本研究旨在探究磷酸化对肌红蛋白稳定性的影响,进而为通过调控磷酸化水平提高肉色稳定性提供理论依据。【方法】用连二亚硫酸钠还原骨骼肌肌红蛋白纯品,再经超滤除去连二亚硫酸钠。随后采用碱性磷酸酶(AP)体外孵育催化肌红蛋白的去磷酸化反应,采用SDS-PAGE凝胶电泳和Pro-Q与Ruby染色的方法测定肌红蛋白磷酸化水平的变化,测定孵育体系pH的变化,紫外分光光度计测定孵育过程中3种肌红蛋白相对含量的变化,圆二色谱测定孵育过程中肌红蛋白的二级结构变化。【结果】磷酸化水平的测定结果表明,碱性磷酸酶处理组(去磷酸化处理)中肌红蛋白的磷酸化水平在孵育6 h时显著低于对照组(P0.05),表明碱性磷酸酶可以在体外孵育过程中催化肌红蛋白发生去磷酸化反应,降低肌红蛋白的磷酸化水平。3种肌红蛋白相对含量的测定结果表明,从孵育2 h起,碱性磷酸酶处理组中氧合肌红蛋白的相对含量显著高于对照组,高铁肌红蛋白的相对含量显著低于对照组。即与对照组相比,碱性磷酸酶处理组中肌红蛋白的自动氧化速率低,氧化还原稳定性高(P0.05)。pH的测定结果表明,碱性磷酸酶处理组和对照组孵育体系的pH差异不显著(P0.05),即添加碱性磷酸酶进行孵育没有改变孵育体系的pH。二级结构的测定结果表明,肌红蛋白的二级结构以α-螺旋为主。从孵育0 min到6 h,碱性磷酸酶处理组中肌红蛋白的α-螺旋和β-折叠的含量基本不变,而对照中肌红蛋白的α-螺旋含量增加,β-折叠的含量减少,表明碱性磷酸酶处理组中肌红蛋白二级结构的稳定性高于对照组。【结论】肌红蛋白发生磷酸化修饰后,可能会通过改变肌红蛋白的二级结构,降低肌红蛋白二级结构的稳定性,增加肌红蛋白的自动氧化速率,进而加速高铁肌红蛋白的积累,不利于肉色稳定性,这可能是蛋白质磷酸化负向调控肉色稳定性的原因之一。     

信息技术在农机技术推广中的应用研究

伴随我国社会经济的发展,我国的科学技术和信息技术也在不断发展。信息技术的发展为人们的生活工作带来了便利,同时也带动了我国农业经济的进步,农业技术也得到了优化更新。有效利用信息技术可以推动农业产业结构的调整,使农业经济稳固持续发展。但是,在实际的信息技术推广过程中还存在一些问题,所以本文就信息技术在农机技术推广中的应用展开分析。     

荻植株再生体系建立

以成熟种子为外植体建立了荻植株再生体系。荻成熟种子经20%"84"消毒液处理20 min,接种于MS+4%蔗糖(pH 5.5)培养基中培养5 d,萌发率为92%,褐化率为8%,污染率为0。萌发种子继代转入愈伤诱导培养基MS+1mg/l 6-BA+1mg/l 2,4-D+0.5mg/l NAA+4%蔗糖(pH 5.5),光照条件下愈伤组织诱导率为86%,黑暗条件下愈伤组织诱导率64%。荻愈伤组织在MS+1mg/L 6-BA+0.1mg/L2,4-D+0.5mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5)进行不定芽诱导,不定芽发生率为91%。无根丛生芽继代转入不定根诱导培养1/2MS+0.25mg/L IBA+0.25mg/L NAA+4%蔗糖(pH 5.5),5天可见不定根形成,15天后不定根发生率为92%。研究还发现,荻种子萌发后可直接继代转入不定芽分化培养基形成健壮不定芽,不定芽诱导率为95%。     

泰安市行道树生长对道路两侧带的影响研究

行道树是城市绿化的主要组成部分,其生长往往产生一系列的问题,这迫使城市市政部门每年投入相当多的工作时间,完成行道树的栽种、修剪以及人行道维护等工作.通过对泰安市行道树对道路破坏情况进行实地调查及情势分析,对泰安市当地的泡桐、悬铃木、杨树等树种对道路两侧带产生的影响展开实地测量与数据分析归纳,结果表明:各种树木对道路两侧...     

山西省耕地土壤有机质评述

应用第二次土壤普查资料,按全国统一的土壤有机质分级标准和本省生产实践,对全省耕地土壤有机质分区域进行评述,论述土壤有机质的丰缺情况,丰缺原因,并指出培肥土壤、提高耕地土壤有机质的途径。     

创新出活力管理出成绩开创动物监督工作新局面

２００１年５月１４日至１６日河南省动物监督执法工作现场会在西峡县隆重召开 ,省畜牧局还是第一次在一个县级单位召开全省畜牧系统的工作会议。全省各市县区畜牧局长、动检站长对西峡县动检站的工作看了信服 ,听了感动 ,赞叹不已 ,省市畜牧局领导对西峡动检站“用作风好的人 ,用好的作风管人 ,通过管理创新 ,以人为本兴大业”的做法给予了充分肯定和高度评价 ,并称赞西峡县是全省动检监督执法工作的一面旗帜。近几年来西峡县动检站的工作成绩是瞩目的 :荣获国家十部委颁发的“贯彻执行食品卫生先进单位” ,全省、全市唯一一个连续 (１９９…     

猪3种重要病毒寡核苷酸芯片诊断方法的建立

将猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒-Ⅱ(PCV-2)、猪瘟病毒(CSFV)分别应用生物信息学方法,针对病毒基因组保守序列设计特异性强的60-mer寡核苷酸探针,并将其按所设计阵列固定于表面经氨基化修饰的玻片上,制备出寡核苷酸芯片.分别设计出相应的引物,对待测样本进行不对称PCR扩增,从而产生大量可与寡核苷酸探针特异性互补的单链DNA片段,并通过间接荧光标记技术使扩增产物标记上荧光染料.将标有荧光染料的扩增产物与芯片上寡核苷酸探针杂交.扫描、分析芯片上荧光信号.试验结果表明,芯片上各样本对应探针位点呈现阳性荧光信号.而阴性对照和空白对照则基本不能检测到荧光信号.不对称PCR技术制备的单链DNA片段与寡核苷酸芯片进行杂交反应可同时、快速、特异性地检测多种猪疫病病毒.     

山西省耕地资源合理配置的初步探讨

耕地是农用土地中产出效果最大的一种土壤。耕地资源合理配置关系到国民经济发展速度,关系到粮食生产安全,关系到优质高效农业生产,关系到土地资源的质量保护与数量保护。本文通过对山西省耕地现实生产能力、潜在生产能力、未来生活需求的分析,提出耕地资源合理配置的基本思路,即保留3670.67 km2的耕地,才能保证粮食生产安全,耕地中粮经种植比例以6:4较为适宜。同时,还提出了耕地资源合理利用的意见及建议。     

荻植株再生体系建立

以成熟种子为外植体建立了荻植株再生体系。荻成熟种子经20％“84”消毒液处理20min,接种于MS＋4％蔗糖（pH5．5）培养基中培养5d,萌发率为92％,褐化率为8％,污染率为0。萌发种子继代转入愈伤诱导培养基MS＋lmg／16-BA＋1mg／12,4-D＋0．5mg／lNAA＋4％蔗糖（pH5．5）,光照条件下愈伤组织诱导率为86％,黑暗条件下愈伤组织诱导率64％。荻愈伤组织在Ms＋1IYlg,L6-BA＋0．1mg／L2,4-D＋0．5mg／LNAA＋4％蔗糖（pH5．5）进行不定芽诱导,不定芽发生率为91％。无根丛生芽继代转入不定根诱导培养1／2MS＋0．25mg／LIBA＋0．25mg／LNAA＋4％蔗糖（pH5．5）,5天可见不定根形成,15天后不定根发生率为92％。研究还发现,荻种子萌发后可直接继代转入不定芽分化培养基形成健壮不定芽,不定芽诱导率为95％。     

用于诊断4种猪病毒病的寡核苷酸芯片的研制

制备可同时检测引起集约化养猪业常见4种传染病，病毒（猪流感病毒、口蹄疫病毒、猪伪狂犬病毒、猪蓝耳）的寡核苷酸芯片。根据4种猪疫病病毒特异性基因的保守区域设计合成了60mer寡核苷酸探针，制备寡核苷酸芯片。采用不对称PCR和间接荧光标记技术进行单链DNA扩增和荧光标记，标记样品与寡核苷酸芯片杂交后，进行芯片清洗、扫描及结果分析。杂交结果显示，4种病毒的寡核苷酸检测探针均特异地与相应的标记样品杂交，芯片上呈现较强的阳性杂交信号，而除阳性质控探针外，阴性对照和空白对照均检测不到荧光信号。证明寡核苷酸芯片适用于快速、准确、高通量地诊断影响集约化养猪业的多种猪疫痛病毒。