cry基因保守序列克隆及其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中的表达

[目的]对cry基因保守序列进行克隆,并使其在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行表达。[方法]根据NCBI数据库信息设计引物序列,采用PCR技术从抗虫棉基因组DNA中扩增出抗虫基因cry的保守序列,构建重组载体并转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中,利用pGEX原核表达系统诱导蛋白表达。同时,分析了不同IPTG浓度及不同诱导时间对蛋白表达量的影响。[结果]扩增出抗虫基因cry的两段保守序列,长度分别为304和853 bp;SDS-PAGE检测结果显示,经IPTG诱导后重组质粒pGEX-4t-1-304和pGEX-4t-1-853成功地表达了大量GST融合蛋白,分子量分别为39和62.4 kDa,与预期结果一致;确定了IPTG最佳诱导浓度为0.15 mmol/L,最佳诱导时间为7h。[结论]为今后检测转Bt基因农作物奠定了基础。     

正交设计优化南苍术快速繁殖培养基的研究

[目的]保护野生苍术资源,并为南苍术工厂化生产提供技术指导。[方法]以南苍术[Atractylodes lancea(Thunb.)DC]种子为材料得到无菌试管苗,应用正交试验法研究6-苄基腺嘌呤(6-BA)、萘乙酸(NAA)、激动素(KT)及其配比对南苍术无菌苗增殖的影响;同时研究了NAA浓度对南苍术苗生根的影响;以泥土、河沙、棉籽壳为材料,采用正交试验法设计9种轻型基质配方,研究其对南苍术生长的影响。[结果]适合南苍术试管苗增殖的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+KT 0.4 mg/L;适合南苍术生根的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L;最适基质配比为泥土∶河沙∶棉籽壳=3∶3∶2(体积比)。[结论]筛选出了南苍术增殖培养和生根的最佳配方,以及基质的最佳配比,为苍术资源的实验室保存和种苗工厂化生产提供了技术依据。     

利用分子标记技术聚合Pi-1和Pi-2基因改良三系不育系荣丰A的稻瘟病抗性

以籼型水稻材料BL122为稻瘟病抗性基因的供体亲本,三系不育系荣丰A的保持系荣丰B为轮回亲本,通过常规杂交、回交、田间农艺性状筛选和分子标记辅助选择相结合,将Pi-1、Pi-2两个基因导入到荣丰B中,获得5个带有两个目标基因的改良保持系纯合株系。利用广东省致病性代表的30个稻瘟病菌株进行人工接种鉴定,5个改良株系的抗性频率均为100%,而原始对照荣丰B的抗性频率仅为56.67%;自然病圃诱发鉴定5个改良株系的穗颈瘟均为1级,表现高抗,而对照为7级,表现感病。所有改良保持系株系与荣丰A杂交和回交进行不育系转育,根据农艺性状综合评价,筛选出不育性彻底、后期熟色好的三系不育系安丰A。利用该不育系与一批恢复系配组,其杂交稻组合均表现出良好的稻瘟病抗性和丰产性,显示出很好的应用前景。     

高山花椰菜不同季节适栽品种对比试验

海拔在800m以上的山区,夏季气候凉爽,花椰菜播种期较宽,春、夏、秋各季均可播种,但我们在栽培中发现,不同品种在不同的生产季节田间表现不同。为了摸清我县新引进的各松花菜品种在高山区的栽培表现,以筛选出不同季节栽培的最佳适栽品种,为高山花菜产区茬口安排提供依据,而进行本试验。1、试验材料与方法     

社会主义新农村建设中应注意的问题

在社会主义新农村的建设过程中,存在着某些制约因素,如城乡差别问题,部分农村党员干部违法乱纪问题等,应引起重视并加以改进和纠正,以加快新农村建设的步伐。     

视人民如父母 把驻地当故乡——大兴安岭森警支队拥政爱民、警民共建纪实

视人民如父母把驻地当故乡———大兴安岭森警支队拥政爱民、警民共建纪实文／李金华王世俊图／李世勇多年以来，大兴安岭森警支队始终坚持与驻地人民“同呼吸、共命运、心连心”，在圆满完成森林防火工作的同时，认真做好拥政爱民、警民共建工作，用他们的实际行动谱写了...     

猪水肿病的诊断与防治

猪水肿病是由致病性大肠杆菌引起的断奶仔猪以全身或局部麻痹,共济失调、头部和眼睑部水肿为主要特征的疾病。多发生于断奶1～2周仔猪。2006年10月,锦州市义县七里河镇一家养猪户饲养的体重15～30kg的育肥猪152头,突然发病,9头发病,造成8头死亡。发病率为5.92%,死亡率为88.89%,现将诊治情况报告如下:     

油菜/西瓜‖辣椒/棉花高效模式及其栽培技术

试验示范结果表明，油菜/西瓜‖辣椒/棉花模式作物产量高、效益好，每公顷作物产量合计为93020kg，合计收入69868元，纯收入52238元，值得推广应用。在此基础上介绍了该模式种植方式及主要配套栽培技术。     

桑园病虫害的综合防治

1桑园常见病虫害当前桑园主要害虫 有桑螟、桑尺蠖、野蚕、桑象虫、桑蓟马、桑毛虫、天牛、桑卷叶蛾、蜗牛等,桑树病害有桑疫病、桑膏药病、桑拟干枯病等。     

油菜产量与苗期气象条件的相关分析

对南昌市2000~2006年油菜产量及其结构与苗期的气象条件进行相关分析和回归分析,得出:油菜一次分枝数和有效荚果数均与苗期日平均气温呈显著正相关,均与苗期降水量和相对湿度呈显著负相关;油菜苗期光照充足、降水适中、日温差大、日平均气温高是油菜丰产的气象条件。