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以含有Cry3Aa基因的重组质粒pBCC3为基础,利用PCR和DNA重组技术,从pBCC3中克隆出抗虫基因Cry3Aa,将其正向插入载体pCAMBIA1305的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,构建成pCAMBIA1305-Cry3Aa植物表达载体,并导入根癌农杆菌EHA105。采用农杆菌介导的遗传转化法,将Cry3Aa基因转入已转Cry1Ac+API基因的741毛白杨无性系pB29中,获得转双Bt基因的741杨。在含潮霉素的培养基中进行多次继代筛选,获得抗性稳定的无性系9个,编号为pCCA1—pCCA9。采用特异引物分别对转基因植株进行PCR检测,结果显示Cry1Ac基因稳定存在于pB29中,Cry3Aa基因已整合到各无性系的基因组DNA中。ELISA毒蛋白检测,转基因株系都有Cry1Ac和Cry3Aa杀虫蛋白表达。用转基因植株叶片进行柳蓝叶甲(鞘翅目)和美国白蛾(鳞翅目)室内饲虫试验结果表明,转基因植株具有双抗性。根据对测试昆虫的致死率划分高中低3个抗性水平,其中pCCA2,pCCA5,pCCA6,pCCA9具有双高抗;pCCA3,pCCA4和pCCA7对柳蓝叶甲表现出中、低抗性,对美国白蛾则高抗;而pCCA1表现对美国白蛾的极低抗性,对柳蓝叶甲则高抗。 相似文献
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随着社会经济的迅速发展,人们对供水质量和供水系统可靠性的要求不断提高,然而现如今的供水系统存在着原始不足之处-水电供应压力不足。完善的供水系统是通过自动控制技术、计算机技术以及通信技术来构建的,这样的供水系统可以达到高性能、低能耗的目标。 相似文献
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开展营养吸水树脂育秧纸在水稻苗床上的应用,结果表明:在水稻生产上应用吸水树脂育秧纸,产量为8 940.0 kg/hm2,比常规钵体盘应用壮秧剂育苗增产7.4%,效益增加1 726.2元/hm2。 相似文献
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为探究日粮中不同比例的缓释尿素对后备奶牛血常规的影响,选择16头10月龄健康荷斯坦后备奶牛分成4组,分别饲喂缓释尿素添加比例为0、1%、1.5%、2%的日粮。试验发现,2%添加组的血红蛋白含量(HGB)、红细胞压积(HCT)和红细胞数目(RBC)显著低于0%、1%、1.5%组(P0.05),1.5%添加组的平均红细胞体积(MCV)显著低于0%和1%组(P0.05),2%添加组的平均红细胞体积(MCV)显著低于0%组(P0.05),而与其余各组之间差异不显著(P0.05)。0%和2%添加组的平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)显著低于1%和1.5%组(P0.05)。2%添加组的红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)和红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)显著高于1%和1.5%组(P0.05),0%添加组与其余各组间差异不显著(P0.05)。这些指标综合可以做为2%添加组后备奶牛缺铁性贫血的判断依据。而1%和1.5%的添加组血常规生理指标与对照组差异不显著。试验结果表明,对后备奶牛饲喂2%的缓释尿素不利于后备奶牛的健康,而饲喂1%和1.5%的日粮不会对后备奶牛的健康造成影响。所以在后备奶牛日粮中缓释尿素的添加比例可以为1%~1.5%。 相似文献
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转基因技术有助于番茄基因功能研究和遗传改良,其中转基因后代的筛选是一个非常重要但工作量大的环节。本研究基于番茄油体蛋白基因家族序列分析和番茄基因表达数据库SGN-TEA搜索结果,克隆了一个种子特异且高水平表达的油体蛋白基因SlOLE1(Solyc06g034040)。利用无缝克隆的方法将红色荧光蛋白基因TagRFP的编码区序列插入到SlOLE1基因的终止密码子前,形成一个嵌合基因SlOLE1-TagRFP。将嵌合基因插入到pBI121双元载体,构建植物表达载体pSlOLE1-TagRFP,利用农杆菌介导法转化番茄品种‘Money Maker’,T0代植株的自交种子在荧光显微镜下呈现出明亮红色荧光或无荧光。PCR分子标记进一步验证发现,红色荧光种子萌发的幼苗均存在TagRFP序列,表明在种子阶段检测红色荧光筛选转基因番茄后代的准确率为100%。由此,本研究建立了一种利用SlOLE1-TagRFP嵌合基因,可以通过种子红色荧光可视化分析,简单快速、低成本地鉴定转基因番茄后代的方法。 相似文献
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茼蒿中绿原酸抑制西瓜枯萎病菌活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为了确定茼蒿中抑制西瓜枯萎病菌的物质,以西瓜枯萎病菌为指示菌株,对从茼蒿茎叶组织中分离纯化并鉴定出的3-O-咖啡酰奎宁酸(绿原酸)的离体抑菌活性进行了研究。结果表明,绿原酸对西瓜枯萎病菌的最不抑菌浓度(MIC)和最不杀菌浓度(MFC)分别为31.25和125 mg·m L~(-1),经室内毒力测定,其对西瓜枯萎病菌的凌半最大效应浓度(EC50)为53.05 mg·m L~(-1)。在绿原酸浓度分别为31.25、125、53.05 mg·m L~(-1)时,即MIC、EC_(50)、MFC的绿原酸浓度处理下,西瓜枯萎病菌的孢子萌发率分别为64%、33%、12%,而绿原酸浓度为0时的孢子萌发率则达到92%,经邓肯氏差异分析,各处理间孢子萌发率差异均显著。随着绿原酸浓度的增大,西瓜枯萎病菌的菌丝干、鲜重均呈现出下降的趋势。此外,绿原酸处理能使细胞膜通透性增加,从而导致菌体细胞内电解质外渗速度加快。本研究结果为茼蒿的深度开发和利用提供了科学依据,也为其他天然抑菌活性成分的筛选及抑菌机理的研究提供可行的试验方法和理论依据,对研究和开发新的天然植物源杀菌剂具有重要的学术价值和应用前景。 相似文献
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随着旅游业的发展,解说标识系统在湿地公园建设中的作用越来越重要,作为景区与游客间沟通的重要纽带,受到公园建设者和管理者的重视。通过对湿地公园解说标识系统结构的分类梳理,可将其大致分为他人传递式解说和自我获取式解说。为打造安徽环巢湖的一流景区,合肥滨湖湿地公园解说标识系统的整体优化方案应依据湿地生态敏感性的特点,需要整合安徽省旅游资源与湿地资源的综合优势,从而为城市建设添砖加瓦,为同类型景区解说标识系统研究提供重要的基础性理论资源,以促进安徽省旅游业的发展。 相似文献
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