小鼠cofilin-1基因及其真核表达载体的构建与体内外表达

【目的】构建能够在神经系统中高效表达的小鼠cofilin-1野生型(Cfl1-wt)、活化型(Cfl1-S3A)、失活型(Cfl1-S3D)3种真核表达载体,并研究其在鸡胚脊髓神经元中的表达情况,为进一步探讨cofilin-1在大脑发育过程中对神经元迁移的影响奠定基础。【方法】从成年小鼠大脑组织中提取RNA,经反转录获得cDNA样本,RT-PCR扩增小鼠cofilin-1基因的CDS区,经引物设计引入点突变,扩增了野生型、活化型及失活型的cofilin-1基因片段,克隆入pCAG-MCS-myc真核表达载体中。经双酶切和测序鉴定后,转染CHO细胞,通过半定量RT-PCR和免疫荧光染色检测其在细胞中的表达情况。利用鸡胚活体原位电转的方法,将重组质粒转染胚胎发育第3天(E3)的鸡胚脊髓,在胚胎发育第6天(E6)取材,切片后经免疫荧光染色观察并统计分析重组质粒在脊髓中的表达情况。【结果】克隆并模拟了小鼠cofilin-1野生型、活化型和失活型的cDNA片段,成功构建了pCAG-cfl1-wt、pCAG-cfl1-S3A和pCAGcfl1-S3D3种真核表达载体。体外转染CHO细胞,半定量RT-PCR检测及统计学分析表明,转染重组质粒的CHO细胞中,Cofilin-1mRNA相对表达量与对照组(未转染质粒的正常CHO细胞)存在显著性差异;免疫荧光染色后观察到了Cofilin-1融合蛋白的表达。对经活体原位电转转染重组质粒的鸡胚脊髓切片进行免疫荧光染色,检测到Cofilin-1融合蛋白的表达,且重组质粒转染效果与pCAG-EGFP转染效果无明显差异。【结论】pCAG-cfl1-wt、pCAGcfl1-S3A和pCAG-cfl1-S3D3种真核表达载体的成功构建及其在体内外的高效表达,为进一步研究cofilin-1及其Ser3位点的磷酸化在神经元迁移中的作用机制奠定了基础。     

不同耕作措施对粮饲兼用玉米产量形成的影响

2012~2013年在陇中黄土高原半干旱丘陵沟壑区采用大田试验研究了不同耕作措施(传统耕作、免耕、旋耕、深松耕)对全膜双垄沟播技术下粮饲兼用玉米产量形成及水分利用的影响.结果表明:深松耕与旋耕下叶面积指数相近,较传统耕作与免耕提高27.12%~40.24%,光合势动态变化与叶面积指数基本一致;各生育时期干物质积累量都表现为旋耕、深松耕免耕传统耕作,旋耕和深松耕处理双穗率、穗粗、千粒质量均高于传统耕作和免耕;2年平均生物产量、经济产量及秸秆产量旋耕与深松耕处理较高,且有较高的水分利用效率.因此,深松耕与旋耕通过增加叶面积指数提高了叶片光合势,从而增加了玉米干物质积累,且提高了双穗率、源器官光合产物向籽粒的转移量、促进果穗发育,最终有利于粮饲兼用玉米籽粒产量和生物产量及水分利用效率的提高.深松耕与旋耕是适合于黄土高原水土流失地区全膜双垄沟播技术下粮饲兼用玉米栽培的理想技术.     

猪圆环病毒的诊断及防制措施

猪圆环病毒（Porcine circovirus，PCV）感染是近几年发现的猪的一种病毒性传染病，目前已引起世界范围丙养猪生产者的高度重视。     

花生壳可作发电燃料

在美国，加工花生后的下脚料花生壳除有约70％的部分用作家畜饲料的补充物以外，其余30％长期以来便成为废物。美国佐治亚州能源署的研究人员已成功地将煤和花生壳的混合物用作功率为170MW的大型火电站的燃料。电厂每日消耗的燃料量是：1200～1500T煤和50～60T花生壳，其中花生壳可提供发电量的2％～3％。虽然比重较小，但运输花生壳要比运煤轻便得多。（译自俄《动力工作者》）##F38花生壳可作发电燃料@李玲玲     

美国开发风能的主要经验

自70年代石油危机以来，美国一跃成为风力发电大国。尽管目前石油燃料降价，但该国仍坚持以风力发电为辅的能源发展策略，风力发电仍在向20多万用户供电，而加利福尼亚州等地的风电还在继续发展。芙国开发风能的主要经验是：选择风力充足的地区为场址，如加州的内陆部分、秃山较多地带。风力时强时弱的地区发电能力是较差的，其实际发电能力只有最大发电能力的1／5至1／3，因此选择一年四季多风地区作风场很重要。建立风车田，以阵列机群发电。如加州拥有大中型风力发电设备近2万台，年发电量达20亿kw·h，其中阿欠塔蒙风车田占该州风车田发…